家蝇滞育幼虫血淋巴中抗病毒肽甲醇萃取方法的优化

为了优化甲醇萃取滞育家蝇Musca domestica幼虫血淋巴中抗病毒肽的方法, 本实验分别比较甲醇及乙腈萃取血淋巴中抗病毒组分效果及最佳使用梯度、上样蛋白浓度、洗脱次数、洗脱流速及操作环境温度, 用Tricine-SDS-PAGE分析甲醇及乙腈的洗脱组分的构成。结果表明：甲醇萃取的活性组分多于乙腈萃取的; 用连续梯度（10％～100％）甲醇萃取的抗病毒活性组分, 比分别用10％, 30％, 50％, 70％, 90％和20％, 40％, 60％, 80％, 100％间断梯度洗脱的回收率高, 同时获得活性组分的重现性好。在0～4℃冰浴的环境下, 于250 mg/6 mL C18萃取柱内加入1.5±0.4 mg/mL蛋白浓度的血淋巴粗提液, 用1 mL/min流速4次洗脱, 抗病毒活性组分可以得到较好的分离效果。