大辽河水系夏季后生浮游动物群落结构及水生态评价

作为建立中国水环境生态学基准的基础性工作,于2011年6月,按照相关规范,对大辽河水系各河段的浮游动物群落结构和水生态状况进行了调查.结果表明:调查期间大辽河水系共检出59种或变种,其中以轮虫类占优势,占总种类数的84.75％,不同采样点的密度从8.63个·L-1至2292.06个·L-1不等,平均值为628.97个·L-1;主要优势种是龟甲轮虫属(Keratella)和臂尾轮虫属(Brachionus)的种类;共检出污染指示种28种,其中β-中污带指示种居多,有11种,占所有指示种的40％;Shannon指数为2.33 ～ 3.93,Margalef丰富度指数为2.84 ～ 9.42,Pielou均匀度指数为0.59 ～0.97;综合水体中后生浮游动物的密度、优势种类、指示种和生物多样性指数评价表明,大辽河水系处于富营养化状态、中等程度污染水平.相比前些年的资料,水生态状况有所好转.     

酵母双杂交筛选心脏cDNA文库中与人热激蛋白70相互作用的蛋白质

目的:利用酵母双杂交系统从人心肌cDNA文库中筛选与热激蛋白70(HSP70)相互作用的蛋白质。方法:从人心脏cDNA文库扩增Hsp70基因,克隆于pGBKT7载体上,酶切鉴定及序列分析,并检测pGBKT7-Hsp70酵母细胞AH109中的自激活活性;将构建的酵母表达诱饵质粒载体pGBKT7-Hsp70转化AH109酵母细胞,与转化有人心脏cDNA文库的酵母Yl87进行交配实验,筛选与HSP70相互作用的蛋白质,通过一对一的回复杂交实验排除假阳性,对阳性克隆进行序列测定和生物信息学分析。结果:构建了"诱饵"质粒栽体pGBKT7-Hsp70,并证明其在酵母双杂交系统中无自激活活性,筛选得到多个与Hsp70相互作用的阳性转化子,并最终得到HSP70的1个相互作用蛋白质HIP。结论:应用酵母双杂交系统筛选出与HSP70相互作用的1个蛋白质,它们的相互作用可能与HSP70发挥细胞分子伴侣作用有关。     

泛素C端水解酶L1的RNA干扰载体的构建及效果评价

目的:获得抑制效果好的泛素 C 端水解酶 L1(UCH-L1)基小干扰 RNA(siRNA)干扰载体.方法:根据 Gen?Bank 中大鼠 UCH-L1基序列设计并合成4对 siRNA 寡核苷酸序列,将4对寡核苷酸序列退火成双链后分别插入siRNA 表达载体 pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR 中构建4个 siRNA 表达质粒,测序鉴定后将4个 siRNA 表达质粒分别转染 HEK293细胞,利用 Western 印迹和 qPCR 方法检测干扰效果;将干扰效果最好的质粒包装成腺病毒,感染大鼠血管平滑肌细胞(VSMC),并采用 TNFα干预诱导 UCH-L1表达升高,Western 印迹验证干扰效果.结果:测序分析证实4对 siRNA 寡核苷酸序列分别插入 siRNA 表达载体 pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR;qPCR 检测与 Western 印迹均表明第3号 siRNA 表达载体对 UCH-L1表达的抑制程度最高,将其包装成腺病毒并转染 VSMC 能显著抑制 TNFα诱导的UCH-L1表达升高.结论:构建并筛选出干扰效果好的 UCH-L1 siRNA 干扰载体.     

大辽河水系夏季浮游植物群落结构特征及水质评价

作为建立中国水环境生态学基准的基础性工作,于2010年7月,按照相关规范的要求,对大辽河水系浮游植物群落结构和水质状况进行了调查.结果表明:调查期间大辽河水系共检出5门124种或变种,其中以绿藻和硅藻为主,分别占43.55％和31.45％;总细胞密度在2.05×105～1.46×107个·L-1,平均6.35×106个·L-1,绿藻和硅藻占优势;主要优势种是硅藻的颗粒直链藻极狭变种(Melosira granulata var.angustissima);共检出污染指示种44种,其中β-中污带指示种居多,有36种,占所有指示种的81.81％;Shannon多样性指数为1.43 ～2.68,Margalef指数为1.00～1.78,Pielou均匀度指数为0.52 ～0.83;综合水体中浮游植物的密度、优势种类、指示种、生物多样性指数评价表明,大辽河水系处于富营养化状态、中等程度污染水平.