表皮生长因子受体基因突变检测方法改进及初步临床验证

目的:改进现有的检测表皮生长因子受体(EGFR)基因突变的荧光PCR法并开发出新的试剂盒,将其与直接测序法和ARMS法进行对比,验证该试剂盒用于临床诊断的敏感性、特异性和准确性。方法:收集2013年6月至2015年8月手术确诊的141例非小细胞肺癌(NSCLC)的石蜡包埋组织标本。采用盲法分别使用直接测序法、ARMS法和新试剂盒检测EGFR突变,比较新试剂盒与其他两种检测方法的差异,结果不一致时采用三种方法分别重复检验一次。结果:三种方法检测成功率均为100%,新试剂盒与直接测序法测得结果完全一致的比率达75.9%(107/141),在直接测序法测得的96例突变阳性中,92例在新试剂盒检测中得到验证(95.8%)。而直接测序法显示突变阴性的45例中,新试剂盒检测发现了23例突变阳性,两种检测方法的结果存在统计学差异(x2=40.745,P0.05)。与直接测序法进行比较,新试剂盒检测EGFR突变的敏感性、特异性分别为95.8%、48.9%,阳性预测值、阴性预测值分别为80.0%、84.6%,检测准确度为80.9%。以ARMS检测法为金标准,新试剂盒测得结果完全一致的比率达84.4%(119/141),两者的一致性比较好(K=0.749,P0.05),敏感性、特异性分别为94.1%、86.4%。结论:改进后EGFR基因突变检测的试剂盒在技术上较好地控制了检测结果的假阳性和假阴性,该检测方法较直接测序法具有更好的敏感性和准确性,与现有的ARMS法一致性较高。     

12C6＋离子束辐照对大青叶生理生化特性的影响

利用辐射能量为100 MeV/u的12C6＋ 重离子束辐照大青叶种子,辐照剂量分别为20、40、50和80 Gy研究其对大青叶M1代的生物学效应.研究结果表明,随着辐照剂量的增大,大青叶的根系活力和叶绿素含量显著降低,发现辐照损伤主要抑制了根的生长及营养吸收;酚酸类化合物含量随着辐照剂量的增大而升高的趋势,表明辐照可提高大青叶的抗氧化和抗病虫害能力;可溶性糖、丙二醛、超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化物酶（POD）含量变化的总体趋势为随着辐照剂量的增大先升后降.表明重离子辐照能改变大青叶的一些生理生化特征,其中40 Gy的12C6＋离子束辐照有利改善大青叶抗逆性和一些有效化学成分的积累.     

响应面法超声辅助提取优化蛇床子素工艺的研究

对独活中蛇床子素超声提取工艺进行了研究。在单因素实验的基础上,选取了对蛇床子素提取率影响较大的4个因素(温度、乙醇体积分数、提取时间和料液比)。采用响应曲面分析法,建立了独活中蛇床子素提取的二次多项式数学模型,优化蛇床子素的超声提取最佳工艺条件,在温度64.63℃,乙醇体积分数73.18%,提取时间45.33 min,料液比20.67 mL/g条件下蛇床子素最大提取率达到0.987%。表明响应面法超声辅助提取优化蛇床子素工艺的研究方法简便、可靠。     

小剂量16O8+离子预辐射减轻大剂量辐射所致小鼠睾丸组织损伤

为了了解小剂量重离子辐射诱导小鼠睾丸结构的适应性反应,采用小剂量(0.05Gy)~(16)O~(8 )离子照射B6C3F_1雄性小鼠睾丸。4h后,再给予2Gy~(16)O~(8 )离子照射。照射后第35天取材在光镜下观察睾丸结构。结果显示,大剂量(2Gy)照射明显损伤睾丸组织,主要表现为曲精细管直径几乎减小一半,精管内各发育阶段的生殖细胞减少或消失,特别是精原细胞几乎完全消失。而Leydig细胞和Sertoli细胞仅有轻度核固缩及胞浆减少。提示睾丸生殖细胞的辐射敏感性明显高于其间质组织细胞。预先给予小剂量(0.05Gy)照射可明显减轻随后大剂量(2Gy)辐射对睾丸组织的损伤。提示小剂量重离子辐射可诱导小鼠睾丸结构明显的适应性反应。     

原卟啉IX二钠盐的低能铁离子束辐照产物对实验性小鼠再生障碍性贫血的疗效初步研究

利用110keV Fe^ 离子注入原卟啉IX二钠盐薄膜,动物实验和细胞学观察等表明辐照混合产物对于治疗^60Coγ射线所致实验性小鼠再生障碍性贫血具有一定的疗效,且无明显的毒副作用,有望从中筛选治疗再生障碍性贫血的新药或其先导化合物。