敲除ebony基因导致二化螟体表黑色素沉积(英文)

【目的】二化螟Chilo suppressalis是中国和其他亚洲地区为害水稻的重要害虫。由于缺乏遗传学操作工具,对二化螟的功能基因组学研究受到严重限制。本研究的目的是借助一个标记基因ebony,在二化螟体内建立CRISPR/Cas9介导的基因编辑体系。【方法】以家蚕Bombyx mori ebony蛋白作为参考序列,通过TBLASTN程序在二化螟基因组数据库获得二化螟ebony基因的cDNA序列;通过PCR技术克隆二化螟ebony全长序列并进行生物信息学分析;运用qRT-PCR技术分析二化螟ebony基因在不同发育阶段(卵、幼虫、预蛹、蛹和雌雄成虫)和4龄幼虫不同组织(头、表皮、脂肪体、肠道和马氏管)中的表达模式;借助基于CRISPR/Cas9的基因编辑技术,把sgRNA/Cas9蛋白复合物显微注射到二化螟新鲜的卵内(产卵后2 h内),靶向敲除二化螟ebony基因。【结果】克隆得到二化螟Csebony基因(GenBank登录号: MZ846208)的全长cDNA序列,开放阅读框长为2 586 bp,共编码861个氨基酸。Csebony蛋白质的分子质量为9.5 kD,理论等电点为5.10,且在N端没有信号肽。结构域分析显示,Csebony有3个保守的结构域。系统发育树显示,Csebony与玉米螟Ostrinia furnacalis的ebony亲缘关系最近。qPT-PCR结果显示Csebony基因在蛹期和头部高表达。敲除Csebony导致二化螟幼虫、蛹以及成虫黑色素沉积。【结论】本研究结果表明,Csebony参与了二化螟表皮颜色模式的调控;CRISPR/Cas9基因组编辑技术可在二化螟中有效应用。借助标记基因在非模式生物中快速建立CRISRP/Cas9基因编辑体系,可为二化螟的功能基因组学研究提供有价值的遗传学工具。     

环境中抗生素抗性基因的水平传播扩散

抗生素抗性基因作为一类新型环境污染物,其在不同环境介质中的传播扩散可能比抗生素本身的环境危害更大,其中,水平基因转移是抗生素抗性基因传播的重要方式,是造成抗性基因环境污染日益严重的原因之一.本文系统阐述了抗生素抗性基因在环境中发生水平转移的主要分子传播元件及其影响因素,这对于正确揭示抗性基因的分子传播机制具有重要意义.结合多重抗药性的传播扩散机制,探讨了行之有效的遏制抗生素抗性基因传播扩散的方法和途径,并针对目前的污染现状,对今后有关抗生素抗性基因水平转移的研究重点进行了展望.     

原发性肝癌患者肝切除术前营养风险筛查及营养支持对营养风险患者康复效果的对照研究

摘要 目的：观察原发性肝癌 (PLC) 肝切除术前营养风险,并研究营养支持对营养风险患者康复效果的影响。方法：选择我院2021年7月~2021年12月期间收治的PLC患者99例,采用营养风险筛查2002 (NRS2002) 量表评估患者的营养风险,单因素及多因素Logistic回归分析PLC患者肝切除术前发生营养风险的影响因素。根据有无营养风险分为营养风险组（n=64）和无营养风险组（n=35）,其中营养风险组患者采用随机数字表法分为术前未接受营养支持组和术前接受营养支持组,各32例。其中术前未接受营养支持组术前不接受营养支持,术前接受营养支持组术前接受营养支持,对比术前未接受营养支持组、术前接受营养支持组的康复效果。结果：经营养风险筛查结果显示,99例PLC患者中有64例术前就已存在营养风险。单因素分析结果显示,无营养风险组、营养风险组在肿瘤直径、贫血、临床分期、家庭月收入、年龄、并发乙肝方面对比存在明显差异（P<0.05）。年龄为60~岁、家庭月收入<3000元、临床分期为Ⅱ期、贫血、并发乙肝均是PLC患者肝切除术前发生营养风险的危险因素（P＜0.05）。术前接受营养支持组的住院时间、首次排气时间、排便时间均短于术前未接受营养支持组（P<0.05）。两组术后7 d白蛋白、前白蛋白、血红蛋白水平均下降,但术前接受营养支持组高于术前未接受营养支持组（P<0.05）。术前未接受营养支持组、术前接受营养支持组的并发症总发生率组间对比无统计学差异（P>0.05）。结论：PLC患者肝切除术前发生营养风险的比例较高,且受到多种因素影响,术前给予营养支持可促进患者术后恢复,有效调节患者术后营养水平。