卵泡刺激素受体FSHR234纳米抗体的分离纯化及多克隆抗体的制备

【背景】卵泡刺激素受体(Follicle-stimulating hormone receptor,FSHR)在人体成熟破骨细胞及单核细胞表面表达,成为阻断卵泡刺激素(FSH)作用的潜在靶点,制备亲和力较高的FSHR抗体已成为靶向治疗FSH相关疾病的切入点。【目的】构建FSHR重组载体获得表达量较高的可溶性蛋白,进一步制备骆驼多克隆抗体及其纳米抗体。【方法】利用XhoⅠ和Bam HⅠ双酶切重组质粒p ET30a-FSHR234,将目的基因fshr构建于p GEX-4T-1载体并进行原核表达,利用Western blot及ELISA检测目的蛋白的配体结合能力。免疫新疆双峰驼制备骆驼多克隆抗体,并利用噬菌体展示技术筛选获得FSHR纳米抗体。细胞免疫化学法检测FSHR抗体在coav-3的表达情况。【结果】构建了pGEX-4T-1-FSHR234重组质粒,获得了表达量较高的FSHR234可溶性蛋白;并构建了5株FSHR纳米抗体,鉴定出一株结合能力较强的纳米抗体,命名为VHH-3F9。【结论】制备的骆驼FSHR多克隆抗体效价达1:128 000,筛选获得的VHH-3F9纳米抗体能与FSHR234具有较高的结合性,且两者均能表达于coav-3细胞表面。     

呼吸机辅助美罗培南及胸腺法新治疗重症肺炎的疗效及对患者血清炎症因子水平的影响

摘要 目的：探讨呼吸机辅助美罗培南及胸腺法新治疗重症肺炎的临床疗效及血清炎症因子水平的影响。方法：选取2018年8月至2020年2月我院收治的96例重症肺炎患者作为研究对象,将其随机均分为两组。对照组48例给予美罗培南治疗,研究组48例给予呼吸机辅助美罗培南及胸腺法新治疗,观察和比较两组患者的疗效、肺部症状的改善情况、治疗前后血清白细胞介素(IL,Interleukin)-６、IL-10、肿瘤坏死因子(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)水平的变化及不良反应的发生情况。结果：治疗后,研究组总有效率为97.96 %,显著高于对照组(85.41 %,P＜0.05);研究组肺部啰音消失时间及炎症吸收时间明显短于对照组(P＜0.05),IL-6、IL-10、TNF-α明显低于对照组(P<0.05)。治疗过程中,研究组不良反应率为2.08 %,显著低于对照组(31.25 %,P＜0.05)。结论：呼吸机辅助美罗培南及胸腺法新用于治疗重症肺炎患者的临床疗效明显优于单用美罗培南治疗,其能有效减轻炎症反应,且安全性高。     

宫颈癌患者外周血循环肿瘤细胞检测的意义

目的:通过分析宫颈癌患者的临床资料与循环肿瘤细胞(CTC)之间的关系,评估其在宫颈癌患者诊疗过程中的临床意义。方法:回顾性分析我院2017年3月至2018年6月行机器人辅助下宫颈癌根治术的病例共82例,术前术后分别行CTC检测,分析CTC阳性率及CTC水平与临床参数的相关性。结果:不同病理类型、分化程度、脉管侵犯、淋巴转移及临床分期宫颈癌患者术前及术后CTC阳性率及CTC水平比较差异均无统计学意义(P0.05)。当宫颈癌浸润深度≥5 mm时,CTC的阳性率及CTC水平明显升高,CTC阳性率的差异仅在术前有统计学意义(P0.05);而CTC水平的差异在术前及术后均有统计学意义(P0.05)。结论:CTC的阳性表达及水平与肿瘤的浸润深度密切相关。检测宫颈癌患者CTC水平可为宫颈癌的诊治及预后评估提供重要参考价值。     

不同CO2气腹压力对老年腹腔镜结直肠癌根治术患者苏醒质量、应激反应和术后认知功能的影响

目的:观察不同二氧化碳(CO₂)气腹压力对老年腹腔镜结直肠癌根治术患者苏醒质量、应激反应和术后认知功能的影响。方法:选择2018年5月~2020年12月期间我院收治的择期行腹腔镜结直肠癌根治术患者91例,按入院奇偶号顺序将患者分为低CO₂气腹压力组(低压力组,10 mmHg,45例)和高CO₂气腹压力组(高压力组,15 mmHg,46例)。对比两组苏醒质量、应激反应、呼吸功能指标和认知功能变化情况。结果:低压力组患者的苏醒期躁动发生率低于高压力组(P<0.05)。两组患者注气针穿刺时(T1)、气腹成功建立时(T2)、放气后10 min(T3)时间点C反应蛋白(CRP)、皮质醇均高于入室时(T0)时间点(P<0.05),低压力组T1、T2、T3时间点CRP、皮质醇均低于高压力组(P<0.05)。与气腹前相比,两组气腹20 min后动脉血氧分压(PaO₂)降低,动脉血二氧化碳分压(PaCO₂)升高(P<0.05),与低压力组相比,高压力组PaO₂更低,PaCO₂更高(P<0.05)。术后第1 d、术后第3 d、术后第7 d,低压力组简易精神状态检查量表(MMSE)评分均高于同时间点的高压力组(P<0.05)。结论:老年腹腔镜结直肠癌根治术中,采用较低的CO₂气腹压力可提升苏醒质量,减轻机体应激反应、呼吸系统损害和认知功能损害。     

自然分娩和剖宫产发生产后腰背痛的差异及相关因素分析

目的:比较自然分娩和剖宫产产妇术后发生腰背痛的情况差异及其相关影响因素。方法:选择2014年10月~2016年10月于我院就诊的400例产妇。按照分娩方式的不同分为自然分娩组和剖宫产组,每组各200例。比较两组产妇产后2、3、4个月腰背痛的发生率及疼痛(VAS)评分,并通过logistic回归分析探讨发生产后腰背痛的影响因素。结果:剖宫产组术后2、3、4个月产妇腰背痛的发生率均明显高于自然分娩组(P0.05);术后2个月,两组产妇腰背痛的VAS评分接近,术后3、4月剖宫产组产妇的VAS评分均显著高于自然分娩组(P0.05);生育超过3次、腰背痛史、剖宫产与产后腰背痛的发生密切相关(P0.05)。结论:剖宫产后腰背痛的发病率显著高于采取自然分娩方式的产妇,既往腰背痛史、分娩方式、生育次数、胎儿体重均与是产后腰背痛相关影响因素。     

平行侧入法硬膜外穿刺CSEA对剖宫产术后腰背痛的影响

目的:探讨平行侧入法硬膜外穿刺腰硬联合麻醉对剖宫产术后腰背痛的影响。方法:选择2014年10月至2016年9月在我院行剖宫产的产妇95例,将其随机分为两组。对照组45例,产妇接受平行直入法硬膜外穿刺腰硬联合麻醉,观察组50例产妇接受平行侧入法硬膜外穿刺麻醉。比较两组产妇术后宫缩、伤口、腰背疼痛VAS评分、术中穿刺情况、术后使用镇痛泵的有效按压次数及术后3 d、7 d、14 d和2个月后腰背疼痛的情况。结果:观察组产妇术后宫缩、伤口以及腰背疼痛评分、术后使用镇痛泵的有效按压次数均显著低于对照组(P0.05),且术中一次性穿刺成功率显著高于对照组(P0.05),且术后7 d、14 d以及2个月腰背痛的发生率显著低于对照组(P0.05)。结论:平行侧入穿刺法行腰硬联合麻醉可有效提高剖宫产产妇一次穿刺成功率,显著缓解产妇的术后疼痛,并降低术后腰背疼痛的发生率。     

新辅助化疗联合肿瘤细胞减灭术对晚期卵巢癌患者的疗效及对血流动力学参数的影响

目的:探讨新辅助化疗联合肿瘤细胞减灭术对晚期卵巢癌患者的疗效及对血流参数的影响。方法:选取2015年1月-2017年6月我院诊治的158例晚期卵巢癌患者,按治疗方法分为对照组、观察组,各79例。对照组使用肿瘤细胞减灭术进行常规卵巢癌治疗,观察组在常规基础上联合新辅助化疗进行治疗。比较两组临床疗效、治疗前后血流动力学参数的变化及不良反应的发生情况。结果:治疗后,观察组化疗的表观缓解率(83.54%)显著高于对照组(62.03%)(P0.05)。两组患者治疗前各血流动力学参数比较差异无统计学意义(P0.05),观察组术后1、4、12 w颈动脉收缩期最大流速(peak systolic velocity,PSV)均显著低于对照组(P0.05),血管阻力指数(resisitance index,RI)、搏动指数(pulsatility index,PI)均显著高于对照组(P0.05)。两组患者在治疗期间出现的心脏毒性反应的发生率比较差异无统计学意义(P0.05),对照组患者治疗期间骨髓抑制、恶心呕吐、肝脏损伤、肾脏损伤的不良反应程度显著低于观察组(P0.05)。结论:新辅助化疗联合肿瘤细胞减灭术能够显著提高患者的临床疗效,改善卵巢的血流动力学参数。     

小反刍兽疫病毒诱导巨噬细胞产生炎症反应

[目的]探究小反刍兽疫病毒(Peste des petits ruminants virus, PPRV)感染引起的炎症反应并解析其致病机制。[方法]分离山羊肺泡巨噬细胞(PAM),利用qRT-PCR、ELISA及组织病理切片HE染色等方法分别检测PPRV感染后引起的炎性细胞因子表达、一氧化氮(NO)含量和炎性细胞侵润等现象。进一步利用转录组学测序分析PPRV感染PAM引起的差异基因、信号通路以及差异基因的表达情况。[结果]与正常山羊相比,感染PPRV的山羊其肝脏、肾脏及肺脏的部分细胞坏死并且呈现炎性细胞侵润的现象;与对照组相比,感染后的PAM细胞显著增加了NO含量(P<0.001);与未感染组相比,PPRV感染的PAM其炎性细胞因子IL-1β、TNF-α、IL-10等mRNA表达水平显著升高(P<0.05);此外,PPRV感染诱导的差异基因主要集中在炎症通路及NF-κB信号通路等。[结论]PPRV通过诱导大量炎性细胞侵润、增加炎性细胞因子表达,激活炎症信号通路从而产生炎症反应。