三种一元醇从卤水中萃取硼酸的效果比较

溶剂萃取法从卤水中提取硼酸是卤水提硼较好的方法之一,萃取剂的选择是萃取操作的关键。据已有资料报道从卤水中提取硼酸效果较好的一元醇有异辛醇（又称2-乙基己醇）、异戊醇、异丁醇。本文主要通过试验对这三种一元醇的萃硼效果作一比较,并从反应机理方面对试验结果加以解释。     

骨桥蛋白通过调控MMP-2和VEGF参与肝癌细胞侵袭的机制研究

目的：骨桥蛋白（Osteopontin,OPN）在肝癌细胞侵袭中的作用机制。方法：采用siRNA干涉的方法处理人肝癌细胞,用PCR和Western-blot法检测OPN的表达;用transwell小室检测不同处理后的HepG2和MHCC97H细胞的侵袭能力;采用Western．b1．ot和ELISA方法检测基质金属蛋白酶-2（matrixmetalloproteinase-2,MMP-2）和血管内皮生长因子（vascularendothelialgrowthfactor,VEGF）蛋白表达和活力的变化情况。结果：在不同肝癌细胞系中,随着肝癌细胞系侵袭能力的增强,OPN的表达逐渐增高。siRNA可以降低HepG2和MHCC97H细胞中OPN的表达,并且能够降低HepG2和MHCC97H细胞的侵袭能力;抑制OPN的表达能够降低MMP-2和VEGF蛋白表达和蛋白活性。结论：OPN在肝癌侵袭过程中起着重要作用,其作用机制可能是通过调控MMP-2和VEGF蛋白表达和活性来参与肝癌的侵袭,OPN可作为肝癌侵袭转移治疗的新靶点。     

樟子松无性系生长性状与结实量变异研究

为选育高产、优质的樟子松种质资源,本研究以吉林省白城市林木种子园的304个樟子松无性系为材料,对其生长性状（树高、地径、胸径、3 m处直径、冠幅、分枝角度和侧枝粗度）和结实性状（2015、2016和2017年的结实量）进行调查分析。方差分析结果表明除冠幅外无性系间各性状差异均达极显著水平（P<0.01）;各指标表型变异系数的变化范围为3.79%~65.22%,重复力变化范围为0.24~0.70;相关性分析结果表明除侧枝粗度与3 m处直径相关未达到显著水平外,树高、胸径、地径、冠幅与侧枝粗度间相关均达极显著水平,不同树龄的结实量与大部分生长性状相关未达显著水平。依据生长性状,以5%的入选率对无性系进行综合评价,15个无性系入选,入选无性系在树高、地径、胸径、3 m处直径、分枝角度和侧枝粗度等指标的遗传增益分别为5.47%、4.48%、15.18%、11.78%、2.38%和6.66%;依据3年结实量,以5%的入选率对无性系进行综合评价,15个无性系入选,入选无性系在2015年、2016年和2017年的平均结实量的遗传增益分别为2.89%、46.32%和13.88%。该研究为樟子松种子园优良无性系的选择提供材料,也为吉林西部樟子松良种选育提供基础。     

miR-200a 及AFP 在肝癌、肝硬化患者血清中表达比较分析*

目的:分析miR-200a及AFP在肝癌、肝硬化患者血清中的表达水平并进行比较,探索其成为肝癌早期诊断血清标志物的可能性。方法:临床收集肝正常、肝硬化、肝癌患者血液标本。运用实时定量PCR技术检测血清miR-200a的相对表达情况,血清AFP水平从临床资料中提取。结果:临床标本分析结果显示,miR-200a在肝硬化及肝癌患者中均显著下调(P<0.05),AFP仅在肝癌患者中出现异常表达。结论:血清miR-200a极大程度地参与了肝癌发生,对肝硬化及肝癌具有一定的诊断价值。     

负载肿瘤细胞抗原的树突状细胞联合奥沙利铂抑制胰腺癌细胞BxPC-3增殖的实验研究

目的：化疗是晚期胰腺癌的主要治疗手段,但临床效果有限。为提高胰腺癌化疗效果,本研究将化疗药物奥沙利铂（OXA）联合肿瘤全细胞抗原负载的树突状细胞（DC）体外作用于胰腺癌BxPC-3细胞系,观察对其增殖的影响。方法：自健康人外周血中分离培养DC和T细胞。反复冻融BxPC．3细胞,使其裂解并提取全细胞抗原后致敏DC,再以DC激活T细胞。ELISA检测T细胞培养上清中IL-2、IL-4、IL-10和IFN-g的含量。将T细胞与不同浓度的OXA联合作用于BxPC-3细胞,MTT法检测杀伤率。结果：负载BxPC．3全细胞抗原的DC能显著激活T细胞使其成为效应性T细胞,并使其分泌IL-2和IFN—Y。不同浓度的OXA与效应性T细胞联合作用于BxPC．3细胞可明显抑制其增殖,且杀伤效果与OXA的浓度呈正相关。结论：负载BxPC-3全细胞抗原的DC可诱导出抗肿瘤的效应性T细胞,联合OXA能显著提高对BxPC-3细胞的杀伤作用。生物治疗联合化疗抑制胰腺癌细胞增殖的作用明显,具有较好的临床应用前景。     

通过花药培养筛选水稻耐镉突变体

通过花药培养筛选出三个水稻耐镉突变体并都获得再生植株。再生植株及由根尖诱导产生的愈伤组织都保持稳定的耐镉性。突变植株的花药经再培养鉴定也具有耐镉性,从而表明所获突变体的耐镉特性是可以遗传的。在对愈伤组织耐镉机理进行的分析中发现,突变体愈伤组织中的胱氨酸和半胱氨酸的含量高于对照。将一定量的胱氨酸加到含镉的培养基中用于检查野生型愈伤组织的增殖情况,观察到胱氨酸可以降低镉对细胞的危害,表明突变体耐镉机理可能与细胞中积累有较多的胱氨酸和半胱氨酸有关。     

新基因人MOB cDNA的克隆与功能分析

人MOB基因被认为是在脑组织中高表达的5次跨膜而功能未知的膜蛋白.从胎儿和成人肾脏消减杂交cDNA文库中获得了一条新的表达序列标签（expressed sequence tag,EST）序列,该序列对应于功能未知的MOB基因.利用生物信息学分析工具和分子生物学技术,从胎儿肝脏中成功地克隆了人MOB基因cDNA序列,同时也获得了含有完整开放读码框的大鼠和鸡MOB的电子全长序列.人MOB基因定位于10q11.1～11.2之间,含有一个1 242 bp的开放阅读框,第415位开始的ATG可能是翻译起始位点.核酸序列相似性搜索发现,其他种属中存在与之高度相似的EST序列,如爪蟾（79%）、羊（87%）、猪（94%）、牛（93%）.蛋白质序列相似性搜索发现,人MOB与大鼠、小鼠和鸡MOB有97%、97%、91％的相似性,与其他一些不同种属来源的假想蛋白有45%～73%的相似性.不同物种之间MOB基因核酸和蛋白质序列的高度相似说明,MOB是进化上高度保守的蛋白质.保守结构域分析发现,人、小鼠、大鼠和鸡MOB结构域组成完全一致,N端均与不育α基序（sterile alpha motif,SAM）结构域显著匹配,随后出现匹配显著性稍差的几个结构域.核酸和蛋白质序列的保守性提示,除N端约70个氨基酸组成SAM结构域外,其余的保守氨基酸可能形成一个新的保守的MOB结构域.表达谱分析表明,人MOB基因在所有被检组织和细胞中都表达.亚细胞定位研究显示,人MOB广泛表达于细胞内,主要在细胞核.DNA含量测定结果表明,人MOB基因过表达并不影响HeLa细胞的细胞周期和凋亡.总之,人MOB蛋白是一个在多种组织和细胞中广泛表达、细胞内广泛分布、进化上十分保守的蛋白质,可能通过特定蛋白质之间的相互作用,参与多种发育过程的调节.其过表达不影响HeLa细胞的周期和凋亡.     

人伴肌动蛋白相关锚定蛋白基因cDNA的克隆与功能分析

小鼠伴肌动蛋白相关锚定蛋白(N-RAP)是已知的与肌纤维生成有关的细胞骨架蛋白,但是,与此对应的人类N-RAP基因的cDNA序列及其功能一直是未知的.为了明确N-RAP基因在人类中所起的作用,利用生物信息学分析工具和分子生物学技术,成功地克隆了人N-RAP基因.人N-RAP基因cDNA序列含有一个5 088 bp的开放读码框,与小鼠N-RAP基因有86%的相似性.染色体定位分析表明,人N-RAP基因定位于10q25～q26之间,编码区由41个外显子组成,与HABP2和CASP7紧密连锁.电子表达谱分析表明,肌肉、心脏、脑、脊髓和前列腺有人N-RAP基因不同长度的cDNA序列.人N-RAP与小鼠N-RAP蛋白质序列有88%的相似性,与人Nebulin有约63%的相似性,与小鼠Nebulin有约59%的相似性.结构域分析发现,N端为LIM结构域,从第170位氨基酸开始,连续出现40个Nebulin相关重复序列.RT-PCR实验表明,人N-RAP基因在成人脑、骨骼肌和心脏组织中都有表达,在骨髓中不表达.亚细胞定位研究显示,人N-RAP基因表达于胞浆.基于序列相似性、结构域分析、表达谱分析和亚细胞定位研究,可以推测人N-RAP与小鼠N-RAP同属Nebulin家族,具有类似的功能.     

OIP5对肝癌细胞SMMC-7721增殖和侵袭迁移能力的影响

目的:探讨OIP5对肝癌细胞SMMC-7721增殖和侵袭迁移能力的影响。方法:采用RNA干扰技术沉默肝癌细胞中OIP5的表达后,通过qRT-PCR和Western-blot技术检测OIP5的下调效率,CCK-8和平板克隆法检测肝癌细胞的增殖能力,Transwell法检测肝癌细胞的侵袭和迁移能力。结果:转染OIP5-siRNA后,肝癌细胞SMMC-7721中OIP5 mRNA和蛋白的表达水平均明显降低(P0.05);同时,与对照组相比,OIP5-siRNA组肝癌细胞SMMC-7721的CCK-8实验的OD值、平板克隆法测得的克隆球个数、Transwell法测得的迁移细胞数与侵袭细胞数均明显低于对照组(P0.05)。结论:OIP5能够促进肝癌细胞的增殖和侵袭迁移,可能作为肝癌治疗的潜在靶点。