左侧视网膜剥夺鸽左前脑差异表达基因全长cDNA的克隆

利用cDNA末端快速扩增 (RACE)技术克隆了一条由左侧视网膜剥夺造成左前脑差异表达EST片段的全长cDNA序列 ,同源性比较后认定 ,其为鸽e(r)基因 .该基因与人类及斑马鱼等脊椎动物e(r)基因的同源性非常高 ,但C端有明显差异 .RNA斑点杂交、逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)及Northern印迹等方法检测 ,该基因在不同组织中表达量有差异 .结果表明 ,鸽e(r)基因在左眼视网膜剥夺鸽的左前脑及肝、肾中的表达量较高 ,该基因的表达具有一定的组织表达特异性 .     

人膜相关蛋白TEB4的结构及其E3连接酶活性

TEB4（MARCHIV）是酵母Doa10的同源体，作为E3连接酶参与内质网相关蛋白的降解。TEB4和酵母Doa10定位于内质网上，包含一个环指域和多个跨膜域。这个环指结构位于蛋白的N端，具有特殊的CAHC3结构。在泛素结合酶UBC7参与的底物第48位赖氨酸特异点的泛素化反应中，分离开的环指域在细胞液中催化泛素的连接。这些特性与E3酶有关，E3酶是参与内质网相关蛋白降解的重要酶。和一些E3连接酶一样，TEB4可能参与神经退行性病变的调节。     

建立快速、特异检测ApoE4基因型方法

目的:建立快速、特异检测载脂蛋白E(ApoE)基因型的方法.方法:采用碱裂解法抽提漱口水来源的颊粘膜上皮细胞的基因组DNA;优化各种改善高GC含量的的添加剂种类和浓度,包括二甲亚枫、甘油、甲酰胺、甜菜硷等,PCR产物进行HhaI酶切并DNA垂直电泳从而分析个体的ApoE基因型.结果:漱口水来源的基因组DNA能替代外周血DNA进行PCR扩增.甜菜碱、甲酰胺、甘油等对于ApoE4基因的扩增效果并不明显,而5%DMSO能显著提高ApoE4基因的扩增效率,并显著提高PCR扩增的特异性.结论:无创的简单的ApoE4基因分型被建立,极大易化了对ApoE4相关疾病的分子流行病的研究,对于其它基因的基因型研究提供有益的线索.