酵母表面展示T载体构建及目的蛋白的表面展示

构建一种能对PCR产物进行直接克隆并展示于酵母表面的新型T载体。根据酵母表面展示载体p YD1多克隆位点序列设计出利用两端带有XcmⅠ内切酶酶切位点的含有黄色荧光蛋白基因的XcmⅠ酶切盒,通过NheⅠ和XhoⅠ酶切位点插入到p YD1载体上形成质粒p YD-YFP,并对其进行酶切鉴定和DNA测序分析,再经XcmⅠ酶切后形成两端带有d T的表面展示T载体。利用PCR扩增两个含有荧光蛋白的融合蛋白PCAD-CFP和PSR-Ds Red的基因并直接克隆到所构建的T载体中,检测其表达功能。酶切鉴定和DNA测序结果显示PCAD-CFP和PSR-Ds Red正确插入载体上,分别转化至酿酒酵母EBY100中,激光共聚焦显微镜下观察到相应的荧光的酵母,表明克隆有融合蛋白基因片段的载体成功在酵母细胞中进行表面展示,证明了所构建的酵母表面展示T载体具有直接克隆和表面展示目的蛋白的功能。     

甲基强的松龙治疗2型糖尿病合并突发性感音神经聋的临床疗效研究

目的:观察甲基强的松龙治疗2型糖尿病合并突发性感音神经聋患者的治疗效果。方法:本研究共纳入2018年1月至2020年10月期间于深圳大学附属华南医院内分泌科、耳鼻喉科住院治疗的60例合并单侧突发性感音神经聋的成人2型糖尿病患者,按照随机数字表法分为治疗组(n=30)和对照组(n=30)。两组患者均给予营养神经、胰岛素降糖和高压氧治疗,治疗组给予甲基强的松龙静脉滴注3日后,减少甲基强的松龙剂量继续治疗4天,两组总疗程为14天。观察两组患者治疗后听力障碍改善情况,两组患者分别于治疗开始前、治疗1周后、治疗2周后分别测定纯音听阈均值(PTA)、听性脑干反应(ABR)以评估治疗效果。结果:治疗2周后治疗组听力障碍分级优于对照组(P<0.05);治疗2周后,治疗组的PTA和70dB、80dB、90dB声波刺激ABR指标均优于对照组(P<0.05)。结论:甲基强的松龙联合营养神经、降糖和高压氧等综合治疗,可有效提高2型糖尿病合并突发性感音神经聋患者的听力,值得临床推广应用。     

研究报告: Cystatin C敲除诱导的长爪沙鼠抑郁模型

目的 内源半胱氨酸蛋白酶抑制剂Cystatin C (CysC)由CST3基因编码,在脑中高表达,在多种神经病理过程中具有保护作用。本文旨在观察敲除（knock out,KO）长爪沙鼠CysC基因能否诱导动物的抑郁模型,并探讨模拟病理条件下CysC对内皮细胞和神经细胞的保护作用。方法 使用qPCR验证CysC敲除（CysC-KO）沙鼠不同组织中CysC的转录水平;通过糖水偏好、社会互交、新物体识别、明暗箱和旷场实验,评估CysC-KO对长爪沙鼠行为的影响;分别在缺氧和饥饿（H&S）、氧糖剥夺/复氧（OGD/R）或炎症因子刺激（TNF-α/LPS）模拟的病理条件下,利用MTT法检测CysC或其抑制剂对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）和小鼠神经母细胞瘤细胞（N2a）活力的影响。结果 在CysC-KO长爪沙鼠的各种组织中CysC表达显著降低,尤其是大脑。长爪沙鼠的CysC缺失,可通过年龄依赖的方式诱导沙鼠的抑郁样行为,但其运动和探索行为未见异常。CysC在H&S、OGD/R和炎症条件下,能显著改善内皮细胞和神经细胞的增殖;而抑制CysC则具有相反作用。结论 敲除CysC的长爪沙...