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目的 获得能够在大鼠胰岛β细胞中高效表达的慢病毒载体。方法 以PCR的方法扩增绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)片段,并将其通过穿梭质粒装入pLenti6/V5表达质粒,然后用脂质体转染试剂将plenti6/V5 GFP、pLP1、pLP2以及pLP/VSVG转染入293FT细胞,获得的病毒用人纤维瘤细胞系的HTl080细胞进行滴定。然后用一定滴度的慢病毒转导大鼠胰岛β细胞系INS-1,观察转导效率。结果 通过限制性内切酶和琼脂糖凝胶电泳方法,观察到所克隆入pLenti6/V5表达质粒的GFP片段大小正好与PCR扩增出的片段一致。经测序验证,序列与NCBI网站上GFP序列完全一致。转染结果显示,经293FT细胞所产生的慢病毒,转导效率达到80%以上。而在1×10^6/ml病毒颗粒的情况下,AAV—GFP病毒几乎不能转导β细胞。结论 与同一滴度的AAV—GFP病毒相比,胰岛β细胞的转导效率有非常显著的差异。即慢病毒载体表达系统在对胰岛β细胞转导的能力上,明显优于重组腺辅病毒表达系统。表明慢病毒载体在糖尿病基因治疗中,特别是对胰岛β细胞的转基因工作中,有着良好的应用前景。 相似文献
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利用DYMEX软件构建生物气候模型并通过ArcGIS进行图形处理,对棉铃虫在我国当前和气温升高后的潜在适生分布区进行了模拟预测.模拟结果表明,棉铃虫的高度适生区分布在河南中南部、安徽和湖北北部、江西和福建南部、湖南、广西、广东等华北、华南部分地区,以及陕甘交界处天水地区、川藏交界处巴塘地区等;中度适生区在黄河和长江流域的大部分省份;低度适生区主要分布在东北三省、新疆、西藏、青海地区.模拟21世纪末气温升高3℃预测,棉铃虫中度适生区北界由营口、北京、石家庄、太原、延安、兰州、巴塘一线北移至沈阳、呼和浩特、酒泉、格尔木、拉萨一线,纬度北移约3.,海拔升高300~500 m;新疆大面积地区由低度适生区成为中度适生区.气候变暖使棉铃虫当前的少部分高度适生区(天水、巴塘等)面积扩大,但也使部分分布区(华北地区、华南地区、中国台湾、香港和海南地区等)收缩.最后,结合棉铃虫生物学特性对预测结果进行了讨论. 相似文献
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殷墟玉器对探索晚商时期的文化与科技水平具有重要意义。本文以高分辨硅胶覆模配合显微观察为主要分析手段,选取殷墟出土典型的有孔玉器,针对其孔道内部微痕情况,进行了系统的分析。结果表明,玉器孔道内部微痕可归纳为圆周状凹槽、平行纵向凹槽、弧形口沿、椭圆凹坑、不规则纵向凹线等5个类型。同时,根据微痕形态、分布、完整度、叠压关系等特征,认为其成因主要以加工和使用两大类型为主。研究指出,根据玉器孔道内部微痕特征,可望建立微痕与工艺或使用之间的关系;而通过对其成因的探讨,可对玉器加工、改制和使用等方面提供重要科学证据,由此深入阐释或挖掘古代玉器中的文化内涵。 相似文献
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前列腺增生是中老年男性常见多发病,随年龄增长而增多。超声检查简便,可为临床诊断、治疗方法选择以及疗效观察提供可靠的依据。本文目的探讨超声对前列腺增生半定量检测的价值。 资料 1988~1993五年间,超声检查前列腺增 相似文献
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