蝙蝠葛酚性碱对BxPC-3裸鼠移植瘤Ptch1、Smo蛋白表达的影响

目的:通过观察蝙蝠葛酚性碱(Phenolic alkaloids from Menisphermum dauricum PAMD)对胰腺癌细胞株Bx PC-3裸鼠移植瘤的抑制情况,及其对裸鼠移植瘤Hedgehog信号通路中关键分子膜受体Patched 1(Ptch1)、偶联受体Smothened(Smo)基因、蛋白表达的影响,探讨其作用机制。方法:将30只裸鼠随机选择6只作为空白对照组,其余24只裸鼠接种人源性胰腺癌细胞株Bx PC-3细胞24小时后,随机分为4组:模型组、5-氟尿嘧啶组(5-FU)、PAMD高、低剂量组,每组6只。连续给药3周后,取出肿瘤组织进行抑瘤率计算,行免疫组化(IHC)、实时定量PCR和Western blot三种方法检测裸鼠移植瘤组织中Ptch1、Smo基因及蛋白的表达影响。结果:①抑瘤率:PAMD低、高剂量组和5-FU组与模型组比较,对胰腺癌裸鼠移植瘤均有不同程度的抑制作用,抑瘤率分别为36.14%、55.88%和30.88%,具有统计学意义(P0.05)。其中以PAMD高剂量组治疗效果最好,差异具有极显著统计学意义(P0.01)。②免疫组化:模型组与各治疗组比较,Ptch1和Smo蛋白均呈现高表达,而各治疗组Ptch1蛋白和Smo蛋白表达均出现不同程度的下调,差异具有统计学意义(P0.05);同组Ptch1和Smo蛋白相互之间具有相同的表达趋势,其中PAMD高剂量组Ptch1和Smo蛋白表达下调最明显,差异有极显著的统计学意义(P0.01)。③实时定量PCR:PAMD低、高剂量组与模型组比较,Ptch1蛋白相对表达量均有不同程度的降低,差异具有极显著统计学意义(P0.01);而Smo蛋白表达量降低但不明显,差异具有统计学意义(P0.05),其中以PAMD高剂量组表达效果最明显,差异具有极显著的统计学意义(P0.01)。④Western blot结果与上述趋势相一致。结论:PAMD可通过降低Hedgehog信号通路中Ptch1、Smo关键蛋白的含量,诱导肿瘤细胞发生凋亡,从而起到抑制BxPC-3裸鼠移植瘤的生长,延缓胰腺癌的发生发展。