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大肠杆菌AroG蛋白F209S突变体对苯丙氨酸反馈抑制作用的影响(英文) 总被引：2，自引：0，他引：2
在大肠杆菌中 ,80 %的 3 脱氧 D 阿拉伯 庚酮 7 磷酸 (3 deoxy D arabino heptulosonate 7 phosphate,DAHP)合酶由aroG基因编码。分别以大肠杆菌K1 2及其抗苯丙氨酸类似物的突变体总DNA为模板 ,以PCR方法扩增得到aroG基因及其突变体。基因测序结果表明抗苯丙氨酸类似物的突变体 ,其aroG基因核苷酸 62 5位发生了T→C的点突变 ,从而使AroG蛋白的 2 0 9位氨基酸由Ser取代了Phe。aroG基因及其突变体克隆到表达质粒 pTrc99A上 ,在大肠杆菌JM 1 0 5中进行表达 ,表达产物的SDS PAGE上可以看到分子量相当明显的条带 ;菌体粗提物中DAHP合酶的活性提高了 1 .8倍 ;酶活抗性检测表明AroG蛋白突变体在一定程度上解除了苯丙氨酸的反馈抑制作用 ;与含K1 2aroG基因的JM1 0 5细胞相比 ,含aroG基因突变体的JM1 0 5细胞可以在含高浓度苯丙氨酸类似物的培养基上生长。 相似文献
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在大肠杆菌中,８０％的３－脱氧－Ｄ－阿拉伯－庚酮－７－磷酸（３－ｄｅｏｘｙ－Ｄ－ａｒａｂｉｎｏ－ｈｅｐｔｕｌｏｓｏａｔｅ ７－ｐｈｏｓｐｈａｔｅ,ＤＡＨＰ）合酶由ａｒｏ基因编码。分别以大肠杆菌Ｋ１２及其抗苯丙氨酸类似物的突变体总ＤＮＡ为模板,以ＰＣＲ方法扩增得到ａｒｏＧ基因及其突变。基因测序结果表明抗苯丙氨酸灯似物的突变体,其ａｒｏＧ基因核苷酸６２５位发生了Ｔ→Ｃ的点突变,从而使ＡｒｏＧ蛋白的２０ 相似文献
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