红和绿香椿芽贮藏过程中花青素和木质素含量变化及相关基因表达分析

为了探究低温贮藏对香椿芽品质的影响,研究以贵州省织金县板桥镇红光村种植的红和绿香椿芽为材料,在4℃低温黑暗贮藏过程中对其叶片和叶柄进行外观形态和组织细胞学观察,花青素、木质素含量及其相关合成基因表达水平分析。结果表明,(1)红香椿芽贮藏3 d后色泽保持较好,而绿香椿芽贮藏1 d后开始出现黑色斑点,且黑色斑点的数量随贮藏时间的延长逐渐增加;(2)红香椿芽叶脉和叶柄木质部细胞比相应绿香椿芽小且数量少;红、绿香椿芽贮藏过程中次生细胞壁均逐渐增厚,且绿香椿芽叶脉和叶柄细胞染色程度较深;(3)在低温贮藏过程中,红、绿香椿芽花青素含量均降低,木质素含量均升高,红香椿芽花青素含量始终高于绿香椿芽,而其木质素含量始终低于绿香椿芽,且红香椿芽升降幅度较小;(4)在采后低温贮藏过程中,香椿芽叶片和叶柄中花青素和木质素相关合成基因的表达水平与花青素和木质素含量的变化趋势基本一致。研究表明,红、绿香椿芽贮藏过程中均发生了木质化和蒸腾失水,花青素含量降低,但绿香椿芽的变化更明显;香椿芽花青素和木质素含量的差异与其合成相关基因的表达水平具有相关性。     

半夏缓慢生长法保存及体细胞变异的ISSR检测

以添加了不同浓度的甘露醇、PP333和ABA的培养基对半夏试管苗进行缓慢生长法保存,并对保存材料再生后代的体细胞变异进行检测。结果显示,甘露醇、PP333和ABA均能有效抑制试管苗生长,且存活率高;最佳浓度分别为甘露醇2%～4%,PP3332.0mg·L-1,ABA 2.0～4.0mg·L-1。保存在添加了2%～4%甘露醇或2.0mg·L-1 PP333培养基上的植株未检测到变异,而保存在添加了2.0～4.0mg·L-1 ABA培养基上的植株检测到1条新增标记和1条缺失标记,位点变异率为1.7%,个体变异率为30%。研究表明,ABA不宜用于半夏试管苗的缓慢生长法保存,但有助于新突变体的产生,在种质创新上具有特殊意义。     

樱桃砧木实生苗对根癌菌侵染的抗性及生理响应

以贵州樱桃的6个砧木实生苗为材料,采用人工接种根癌菌的方法,探讨它们对根癌菌侵染的抗性及生理响应特征,评价其抗病性能力。结果显示:(1)接种根癌菌120d后,青岩樱桃实生苗发病率较低(6.67%),冠瘿瘤直径较小(1.76mm),感病系数也较低(6.67),属高抗砧木;沿河樱桃实生苗发病率高达50.0%,冠瘿瘤直径达6.43mm,感病系数达33.76,属高感砧木。(2)感染根癌菌后,各樱桃砧木幼苗的生理特性受到一定影响,其叶片游离脯氨酸含量增加,根系过氧化物酶(POD)和超氧化物歧化酶(SOD)活性增强,而过氧化氢酶(CAT)活性降低,其中,青岩樱桃的游离脯氨酸含量升高幅度最大,沿河樱桃的保护酶活性变化幅度明显较大。(3)樱桃砧木幼苗的发病率与感病系数呈显著正相关(0.98*);发病率与SOD活性、感病系数与POD活性和SOD活性均呈显著正相关,相关系数分别为0.86、0.82、0.83;其余指标间相关性不显著。研究表明,6个樱桃砧木实生苗对根癌菌的抗性有明显差异,并以青岩樱桃最强,且其抗性强弱与其感病后叶片脯氨酸含量和根系的POD、SOD活性增加幅度有密切关系。     

发育期火龙果内参基因的筛选和验证

[目的]筛选火龙果果实发育期稳定表达的内参基因。[方法]以火龙果不同发育时期的果实为材料,利用qRT-PCR技术检测17个看家基因的表达水平,借助ge Norm和Norm Finder筛选出果实发育期理想的内参基因。[结果]Ge Norm评估YLS8和ACT并列排名第一,表达稳定值均为0. 221,配对差异值V_2/3为0. 105; Norm Finder排名前两名为TBP2和YLS8,表达稳定值为0. 160和0. 191。使用内参基因YLS8和TBP2分析火龙果甜菜色素合成途径关键基因HpCytP450-like1的表达水平,与基因Hp Cyt P450-like1在火龙果果实发育期表达趋势一致。[结论]从17个候选基因中筛选出2个理想的的内参基因YLS8和TBP2,可作为火龙果果实发育期相关基因的表达调控研究。