LPS诱导脓毒症小鼠脾组织microRNA表达的筛选研究

目的采用Small RNA测序技术检测脓毒症小鼠24 h脾组织microRNA(miRNA)的表达变化,并从非编码基因层面分析脓毒症脾功能损伤的可能机制。方法将30只SPF级健康BALB/C小鼠随机分为对照组和脓毒症组,每组15只。脓毒症组采用LPS 10 mg/kg腹腔注射进行建模,对照组仅予等量生理盐水腹腔注射。两组术毕均行肌肉注射平衡液5 ml/kg,并于术后24 h各组随机取5只小鼠的脾组织提取RNA,采用Small RNA测序技术进行miRNA检测,然后应用生物信息学软件分析脓毒症小鼠脾组织的miRNA表达差异及靶基因预测。结果小鼠建模后24 h,与对照组相比,脓毒症小鼠脾脏组织已知及未知miRNA表达上调数分别为39个、3个,下调数分别为16个、3个。其中已知miRNA表达上、下调倍数最大的前5个基因分别为Rno-miR-217-5p,rno-mir-216a-5p,rnomiR-216b-5p,rno-miR-375-3p,rno-mir-216b-3p。下调倍数前5的miRNA:Rno-miR-138-5p,rno-miR-451a-3p,rno-miR-138-1-3p,rno-miR-202-5p,rno-miR-592。结论LPS诱导脓毒症小鼠可出现miRNA表达量的改变,其上、下调倍数最显著的miRNA可能对预测LPS诱导的脓毒症脾功能损伤有一定指导意义。     

眼镜蛇属神经毒素研究概况

正世界范围内眼镜蛇属约28种[1]。我国有舟山眼镜蛇(naja atra)和孟加拉眼镜蛇(naja kaouthia)两种,前者过去又称为中华眼镜蛇[2]。眼镜蛇是腺管牙类毒蛇,其毒腺分泌的毒液是以神经毒为主的混合毒,即神经毒和血循毒。眼镜蛇毒神经毒素(cobra neurotoxin,CNT)是其毒液中毒性最大的成分,它能使动物产生呼吸抑制和骨骼肌麻痹,甚至死亡[3]。随着分子生物学和蛋白质组学的发展,眼镜蛇毒神经毒素的一些组分已得到分离、纯化、测定,并广泛应用于科研和临床。本文就眼镜蛇毒组分中神经毒素的研究与应用进     

蛇伤胶囊对竹叶青蛇伤血管内皮细胞IL-8、VCAM-1、MIP-1α表达的影响

目的观察蛇伤胶囊对竹叶青蛇伤血管内皮细胞IL-8、VCAM-1、MIP-1α表达的影响。方法根据课题组前期实验方法制备蛇伤胶囊兔含药血清及复制竹叶青蛇伤细胞模型,设空白组(KB组)、模型组(MX组)和低、中、高浓度蛇伤胶囊药液治疗组(DY组、ZY组、GY组)5组,每组10个样本。在细胞实验中,KB组加入10%正常兔血清培养,MX组在KB组的基础上加入5μg/ml竹叶青蛇毒液培养,DY组、ZY组和GY组在MX组基础上培养6h后分别加入5%、10%和15%的含中药兔血清继续培养。各组分别培养72h后,收集细胞培养液,以酶联免疫吸附法检测细胞培养液中的IL-8、VCAM-1、MIP-1α含量。结果MX组的IL-8、VCAM-1及MIP-1α水平相对KB组均显著升高(均P0.01),蛇伤胶囊药液治疗组IL-8、VCAM-1及MIP-1α水平相对MX组均不同程度降低,其中ZY组变化有统计学意义(P0.01或P0.05)。结论蛇伤胶囊可通过降低IL-8、VCAM-1及MIP-1α表达治疗竹叶青蛇伤所致血管内皮炎症反应。     

针对小鼠早期生长反应因子-1发夹结构小干扰RNA载体的构建及其干扰效率鉴定

目的:构建及筛选高效率针对早期生长反应基因-1(Egr-1)进行RNA干扰(RNAi)的质粒.方法:根据Egr-1基因mRNA序列,设计有小发夹结构的3条寡核苷酸序列,克隆到空栽体pGCSIL-GFP中,构建重组质粒,同时设计构建不针对任何特异基因的质粒作为阴性时照.将shRNA袁达质粒转粢HEK293细胞.通过对GFP表达量的观察,荧光定量PCR及western blotting定量检测Egr-1基因的表达,鉴定shRNA表达质粒对Egr-1的干扰效率.结果:针对小鼠Egr-1基因进行RNAi的3个序列中,有1个序列的干扰效率大于70%以上.结论:成功构建了1个针对小鼠Egr-1基因的高效RNAi表达质粒.     

蛇伤胶囊治疗黄蜂蜇伤临床疗效观察

目的观察蛇伤胶囊治疗黄蜂蜇伤的临床疗效。方法将321例黄蜂蜇伤患者随机分为两组,对照组158例采用局部处理、抗感染、注射破伤风抗毒素、应用糖皮质激素、保护胃黏膜、改善细胞代谢及对症处理等治疗;治疗组163例在对照组治疗的基础上加用蛇伤胶囊治疗。比较两组患者治疗前、后的中医证候积分,并进行临床疗效评价。结果治疗前两组患者的中医证候积分无显著差异（P〉0．05）,治疗后两组患者中医证候积分差值比较有显著性差异（P〈0．01）;两组的临床疗效比较差异显著（P〈0．05）。结论蛇伤胶囊可以改善黄蜂蜇伤患者的临床症状,提高临床疗效。     

蛇毒素导致神经肌肉传导阻滞的研究进展

<正>毒蛇是一种在世界范围内广泛分布的生物物种。西半球北纬50°至南纬50°与东半球北纬65°至南纬50°都存在毒蛇;海蛇则分布于北纬30°至南纬30°的印度洋和太平洋中[1]。有数据显示,全世界范围内每年有421000~1841000例毒蛇咬伤患者,并有20000~94000例死亡,而南亚和东南亚是毒蛇咬伤最严重的受灾区[2]。我国是蛇伤的高发区域,目前已知蛇类有209种,其中毒蛇高达80余种[3]。根据蛇     

蛇伤胶囊对竹叶青蛇伤t-PA、PAI-1和AT-Ⅲ的影响

目的研究蛇伤胶囊治疗竹叶青蛇伤凝血障碍的机制。方法根据前期实验复制竹叶青蛇伤的动物及细胞模型,均设置空白组(KB),模型组(MX),低、中、高剂量蛇伤胶囊药液组(DY、ZY、GY),共5组,每组10个样本。在动物实验中,KB组经兔右后腿皮下注射0.75ml/kg生理盐水,6h后灌胃10ml/kg生理盐水。MX、DY、ZY和GY组经兔右后腿皮下注射0.75ml/kg竹叶青蛇毒液,6h后分别灌胃10ml/kg生理盐水和10ml/kg低、中、高剂量蛇伤胶囊药液。各组均每日灌胃1次,连续灌胃1周。于末次灌胃后24h经耳缘静脉采血,分离血清。在细胞实验中,KB组加入10%正常兔血清培养,MX组在KB组的基础上加入5μg/ml竹叶青蛇毒液培养,DY、ZY、GY组在MX组基础上培养6h后分别加入5%、10%、15%的含中药兔血清继续培养,各组分别培养72h后,收集细胞培养液。以酶联免疫吸附法检测兔血清及细胞培养液中组织型纤溶酶原激活剂(tissue plasminogen activator,t-PA)、纤溶酶原激活物抑制物-1(plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1)和抗凝血酶-Ⅲ(Antithrombin-Ⅲ,AT-Ⅲ)水平。结果 MX组的AT-Ⅲ和t-PA水平相对KB组均显著升高(P0.01),PAI-1水平较KB组显著降低(细胞实验中,P0.05;动物实验中,P0.01);DY、ZY和GY组的AT-Ⅲ及t-PA水平相对MX组均明显降低(动物实验:ZY组t-PA和DY组AT-Ⅲ,均P0.05;细胞实验:ZY组AT-Ⅲ,P0.05;其余均P0.01),DY、ZY和GY组的PAI-1水平较MX组明显升高(P0.01)。结论蛇伤胶囊具有促凝和抗纤溶、改善机体凝血功能的作用,是蛇伤胶囊治疗竹叶青蛇伤凝血障碍的部分机制。     

家蝇共生真菌的抗菌活性筛选及菌株CY-03的初步鉴定

利用平板分离法从家蝇中分离出14株家蝇共生真菌,活性筛选表明CY-03有较好的抗菌活性,在供试浓度为0.1 mg/m L时,CY-03发酵液乙酸乙酯萃取物对番茄早疫病菌和苹果树腐烂病菌具有较好的抑制作用,抑制率约60%;在供试浓度为30μg/滤纸片时,与阳性对照相比,乙酸乙酯提取物对枯草芽胞杆菌有中等的抑制作用,抑菌圈直径为21.0 mm。进一步研究CY-03发酵液不同极性溶剂萃取物的抗菌活性,结果表明其活性物质主要集中在中等极性部位,在供试浓度为0.1 mg/m L时,CY-03发酵液乙酸乙酯提取物对苹果树腐烂病菌、杨树溃疡病菌、番茄早疫病菌和苦瓜枯萎病菌等具有较好的抑制作用,抑制率均大于45%;在供试浓度为30μg/滤纸片时,乙酸乙酯提取物对金黄色葡萄球菌、枯草杆菌和大肠埃希菌有中等的抑制作用,抑菌圈直径范围为14.8~23.0 mm。通过形态学特征观察和5.8S r DNA测序分析,初步确定该菌株为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)。CY-03作为微生物源杀菌剂值得进一步研究。     

毒蛇咬伤致局部组织肿胀坏死的中西医结合治疗进展

毒蛇咬伤是临床常见的危重病,治疗不及时或治疗不当可能导致患者肢体严重肿胀、坏死甚至死亡。本文综述了毒蛇咬伤所致局部肢体肿胀坏死的发病机制和治疗方法,分析了中西医治疗毒蛇咬伤的优势和存在问题,在毒蛇咬伤的临床治疗中选择中西医结合治疗可互补长短,中西医结合治疗毒蛇咬伤的规范化仍有待进一步提高。     

胚胎发育基因Twist在宫颈癌中的研究进展

Twist基因是具有高度保守的转录因子,属于螺-环-螺(basic helix-loop-helix,bHLH)转录家族。已有研究发现,许多上皮性肿瘤细胞中Twist基因通常呈过度表达,在抗细胞凋亡、耐药性、上皮-间质转变(epithelial-mesenchymal transi-tion,EMT)、肿瘤新生血管形成、肿瘤侵袭、转移起到了非常重要的作用。目前,国内外对宫颈癌中Twist的作用研究较