用两相法纯化玉米精细胞质膜

纯系玉米(Zea mays L.)708的新鲜花粉经蔗糖溶液等渗温育、低渗胀破,用30％Percoll不连续密度梯度离心,制备大量的生活精细胞。精细胞用French压力室破碎后离心(90000×g,4℃),获得微粒体。随后,用16g的(6.2％Dextran T500/6.2％PEG3350)两相系统加以纯化。一级分离后,上相液(U_1)的K~ 刺激的Mg~(2 )-ATP酶活性稍低于下相液(L_1);对U_1进行二级分离后,U_2的K~ 刺激的Mg~(2 )-ATP酶活性远远高于下相液(U_2L),分离率达到61.1％。膜蛋白质的分离趋势与K~ 刺激的Mg~(2 )-ATP酶相似。选用细胞色素C氧化酶作为线粒体的标志酶,虽只经一级分离,但在U_1中已检测不到该酶活性。精细胞质膜的磷钨酸特异染色电镜观察结果显示,由二级分离所得质膜的纯度达到90％以上。     

小麦返白系返白期间Poly(A)RNA与蛋白质水平的变化

比较了小麦返白系与其原始品种矮变1号在返白期间Poly(A)RNA与蛋白质水平的变化。在心叶变白过程中。返白系的蛋白质含量下降,随着复绿又回升;而RNA含量变化与此大致呈平行关系。在全白阶段,返白系的Poly(A)RNA含量大幅度下降。体外合成的蛋白质也少得多,但其翻译活性/Poly(A)RNA及各期的蛋白质/Poly(A)RNA比例并不比对照低。可能返白系在返白期间蛋白质水平的变化与转录水平的基因调控有关。     

利用蓖麻毒素（RCA I）亲和层析进一步分离纯化玉米精细胞

利用ＲＣＡ Ｉ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ６ＭＢ大孔径凝胶对玉米（Ｚｅａ ｍａｙｓ Ｌ．）离本活性精细胞进行亲和层析。结果表明,当精细胞数量小于ＲＣＡ Ｉ－凝胶的饱和吸附量时,７０％左右的精细胞被特异性地吸附;４２．１％被吸附的精细胞可由 性单糖一次性洗脱回收。而且镜检,活性检测及ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳分析表明,所回收的精细胞仍具有一定的活性,尤其是具有较高的纯度。     

嗜极菌的极端酶

近年来,嗜极菌极端酶的分离鉴定取得了很大进展。本文简述了极端酶的分离纯化及其某些生化特性、极端酶的稳定因素和应用。极端酶的发现与研究,拓宽了传统的生物催化及应用的范围。但是,关于极端酶的稳定机制及其工业应用,仍有许多难题需要解决。     

批量分离玉米活性精细胞方法的某些改进(英)

目前,从玉米花粉中分离活性精细胞时,若用半乳糖作低渗介质,虽然得率较高,但是花费较大;若以蔗糖为介质,花粉胀破率（约50％）与精细胞得率（17％左右）均较低。而且,所用的Percoll不连续密度梯度离心,对于大批量分离操作繁琐。通过4种不同方法对玉米花粉的胀破效果的比较,发现经BKS35温育后再以蔗糖低渗缓冲液处理,花粉胀破率可提高到95％以上。该花粉胀破液经过滤,用30％Percoll溶液离心分离精细胞,得率达23．4％。用这种改进的批量分离方法,6h内可从100g新鲜花粉中获得约1．2×108生活精细胞。它不仅提高了产率,以满足玉米精细胞表膜特异蛋白生化分析的需要,而且还简化了操作,更具有经济节省等优点。     

被子植物的受精识别与糖蛋白

被子植物的受精识别与糖蛋白＊徐恒平＊＊曹宗巽（北京大学生命科学学院,１００８７１,北京关键词被子植物体外受精受精识别糖蛋白近年来,随着发育生物学的迅猛发展［１］,植物生殖生物学也成为一门国际性的热门学科［２,３］。由于被子植物与人类生存息息相关,研究其雌雄配子的识别机理及受精过程,自然是该学科的重点之一。该研究属于跨学科的国际前沿课题,对于阐明植物生殖过程的奥秘与服务农业遗传育种,具有理论与...     

嗜极菌的极端酶

近年来,嗜极菌极端酶的分离鉴定以得了很大进展,本文简述了极端酶的分离纯化及其某些生化特性,极端酶的稳定因素和应用。极端酶的发现与研究,拓宽了传统的生物催化及应用的范围,但是,关于极端酶的稳定机制及其工业应用,仍有许多难题需要解决。