飞虱虫疠霉分生孢子在桃蚜体壁上的附着与入侵

用飞虱虫疠霉（Pandora delphacis)初级分生孢子接种桃蚜（Myzus persicae),24h内定时取样,在扫描电镜下观察孢子的萌发及其对寄主体壁的入侵。结果表明,附着到蚜体表面的孢子在4h内有30－40％已萌发产生芽管,少数是呈叉状分枝的营养生长型芽管。且侵染性芽管的孢子部分孢入体壁蜡质层中,显示孢子有分泌物产生并作用于寄主体壁。接种10h内,侵染性芽管通过顶端膨大的附着胞或直接穿透入寄主体壁。到24h时,产生侵染性芽管的孢子全部侵入寄主体内,寄主体表仅留下少数未萌发的孢子或营养生长型芽管。初级分生孢子在蚜体表面很少产生次级分生孢子,说明桃蚜是适合该菌侵染的寄主。陷入寄主体壁的孢子不因若蚜蜕皮而被去掉,表明该菌对成蚜和若蚜都具有侵染力。     

飞虱虫疠霉继发性感染对桃蚜数量增长的控制作用

用飞虱虫疠霉（Pandora delphaics)“孢子浴”接种的桃蚜(Myzus persicae)无翅成蚜在离体甘蓝菜叶片（65cm^2)上建立蚜群,在不同温度（10－30℃）和湿度（74％－100％RH）的组合条件下任其繁衍,发病和交互感染,以评价该菌的控蚜效果。在25个温,湿度组合处理（8次重复,每重复含3头接种成蚜)中,蚜群均不同程度的发病死亡,在历时30d的观察中,以高温（20－30℃）,高湿（95％RH）组合条件下的蚜群发病快且死亡率高,蚜尸上产生的孢子有效地引起若蚜继发性感染。与相同温度下不带菌的对照蚜群相比,次于30℃下,各湿度除个别例外,第8d的控蚜率达30％以上,第20d达80％以上。在10℃和15℃下,控蚜效果一般不如上述较高温度下,且与湿度的关联程度相对较低,但最大控蚜效果均发生在100％RH处理中。结果表明,飞虱虫疠霉用于蚜虫防治的潜力很大,值得深入研究和开发利用。     

用感染病毒细胞超微结构的差异区分RMV及TMV株系

通过透射电镜观察被长叶车前草花叶病毒(RMV)和烟草花叶病毒(TMV)不同株系感染的普通烟叶肉细胞的超微结构,发现两种病毒的粒子分布、内含体类型、被感染细胞超微结构的病变均存在差异.病毒粒子分布有成束、分散、环状、膜包被及角状成层或平行成层排列等类型,存在于细胞质及液泡中,但未见于细胞核、线粒体及叶绿体等细胞器中.内含体的X-小管形状有长杆状、短杆状及颗粒状,数量各异.细胞壁常引起增厚、结构松散及扭曲等变化.叶绿体聚集成堆或分布于细胞边缘,其数量、大小、形状及所含淀粉粒、嗜锇颗粒等存在差异,有些还有颗粒状物质积累.线粒体及内质网等在不同株系间也存在差异.本项研究表明,被感染细胞超微结构的差异可作为RMV和TMV株系区分的依据.     

镧与钕对红假单胞菌的生长、类胡萝卜素生成及固氮活性的影响

本文报道了不同浓度的La³⁺和Nd³⁺对红假单胞菌(Rhodopseudomonas sp.)的细胞形态、生长、类胡萝卜素生成和固氮活性的影响。LaCl_3在25和50mg/L时对红假单胞菌的细胞生长有轻微刺激作用;当浓度高于75mg/L时有抑制作用,随浓度的提高而抑制作用增强,细胞缩小;NdCl_3在25和50mg/L时对该菌细胞生长有轻微抑制作用,高于75mg/L时抑制作用明显增强,细胞缩小。两种稀土元素在25和50mg/L时对该菌类胡萝卜素的生成有刺激作用,高于75mg/L时则有抑制作用。La³⁺在0～100mg/L,Nd³⁺在0～75mg/L时对固氮酶活性有刺激作用,La³⁺和Nd³⁺分别高于100mg/L和75mg/L时则有抑制作用,并随浓度的增高,抑制作用明显增强。     

生物学实验中的湿度控制：改良的装置及工作原理

相对湿度是生物学实验中一个十分重要而又较难准确控制的环境因素．本项研究设计出一种改进的简易控湿装置,可利用普通温光型培养箱同时进行不同湿度水平的生物学实验．该装置由微型气泵、３个试剂瓶串连而成的三联体和一个用有机玻璃制成的生长箱组成,经在２０℃下对饱和酒石酸钠溶液调节的湿度（理论值９２％）连续测定和校正,控湿效果良好,误差仅±１％左右．同时对不同浓度硫酸溶液控制生长箱内不同水平的湿度进行了测定和检验,亦效果良好,且对环境温度的适应性强,在５～３５℃范围内同一硫酸浓度控制相同的稳定湿度．最后,对上述装置控制湿度的稳定性及其影响因素进行了讨论     

根虫瘟霉原始菌株及转寄主菌株在不同培养条件下胞外蛋白酶的诱导表达特性

通过比较根虫瘟霉Zoophthora radicans 3个菌株（原始菌株R₀、转寄主菌株R₁和R₅）在不同培养条件下诱导胞外蛋白酶的差异,发现在含昆虫表皮和明胶的培养基中,均能诱导表达高水平的胞外蛋白酶,而在营养缺乏的MS培养基和营养丰富的萨氏培养基中则胞外蛋白酶的表达水平均很低。37 kD的丝氨酸蛋白酶在任何条件下都能被诱导表达,是各菌株中的保守序列所编码的胞外蛋白酶。46 kD的金属蛋白酶仅能在含明胶的培养基中被诱导表达,而葡萄糖可抑制其表达。在萨氏培养基中,67 kD 的蛋白酶条带在转寄主过程中消失了,而46 kD的金属蛋白酶条带和117 kD的条带随着转寄主传代数增加而明显,表明菌株在转染过程中选择表达了对新寄主具有较高基质特异性的胞外蛋白酶。     

不同寄主来源的根虫瘟霉菌株对小菜蛾幼虫的毒力比较

在不同寄主来源的4株根虫瘟霉Zoophthora radicans对小菜蛾 Plutella xylostella 2龄幼虫的生物测定中,发现源于小菜蛾的菌株ARSEF1100毒力最强,在0.53～319.32/mm²的孢子剂量下,接种后第8 天累计死亡率为2.38%～97.44%,虫尸全部表现典型的虫瘟霉症状;源于叶蝉的ARSEF2699和F99101菌株的同日累计死亡率分别为2.38%～50.00% (剂量为1.56～314.84/mm²孢子)和2.38%～57.89% (剂量为1.84～484.08/mm²的孢子);而源于菜粉蝶的ARSEF1342菌株在3.54～633.0/mm²的孢子剂量下只引发6.52%～13.63%的累计死亡率,后3个菌株致死的小菜蛾幼虫仅部分表现典型症状。所获数据经时间剂量-死亡率模型模拟分析,剂量效应参数依次为ARSEF1100 (1.89) > F99101 (1.48) > ARSEF2699 (1.23) > ARSEF1342 (0.37),相互间差异均达极显著水平。接种后4～8 天内,ARSEF1100的LD₅₀值分别为231.68、113.08、71.41、40.87和35.30/mm²的孢子,其毒力远高于其余3个菌株;ARSEF2699的相应LD₅₀值为1344.43、922.39、555.58、410.06和397.07/mm²的孢子;F99101的LD₅₀值为666.86、451.64、413.82、350.65和332.57/mm²的孢子,而ARSEF1342的毒力太弱难以估计。这些结果表明,ARSEF1100菌株最有希望用于小菜蛾的微生物防治。     

根虫瘟霉不同菌株对小菜蛾幼虫血淋巴酚氧化酶原的激活作用

在对小菜蛾Plutella xylostella幼虫血淋巴酚氧化酶原的存在部位及免疫激活作用特点研究的基础上,比较了根虫瘟霉Zoophthora radicans不同菌株对酚氧化酶原激活系统的免疫激化及防御作用的差异。研究发现, 酚氧化酶原主要位于小菜蛾幼虫血细胞膜及血细胞裂解液中,极少存在于血浆中。在免疫激活剂昆布多糖存在下,分别测得小菜蛾幼虫血细胞碎片、血细胞裂解液和血浆的酚氧化酶活性为26.80 U,16.68 U和2.53 U。酚氧化酶原显著地受血浆和昆布多糖同时存在的激活,但两者单独存在时对酚氧化酶原的激活作用较弱。根虫瘟霉菌丝裂解液对酚氧化酶原有不同程度的激活作用,其激活作用在有血浆存在时显著增强,其酚氧化酶活性可提高2.9～3.4倍。各菌株间对酚氧化酶原的激活作用则以ARSEF1342菌株最强,ARSEF2699和F99101菌株次之,ARSEF1100菌株最弱。被激活的酚氧化酶可粘附于根虫瘟霉菌丝上并能产生黑化反应,各菌株间酚氧化酶粘附于ARSEF1342菌株的能力最强,粘附于ARSEF2699和F99101菌株的次之,粘附于ARSEF1100菌株的最弱。但酚氧化酶粘附于昆布多糖的能力显著强于各虫霉菌株,表明各菌株在一定程度上能逃避寄主的免疫识别;各菌株激活酚氧化酶原及酚氧化酶粘附于菌株强弱,与对小菜蛾毒力呈负相关性,表明高毒力菌株具有易逃避寄主免疫识别的趋向。     

飞虱虫疠霉分生孢子在不同温湿度组合条件下的存活率*

用荧光染色法研究了不同温度（１０～３０℃）和湿度（５１～１００％ＲＨ）组合条件下飞虱虫疠 霉 Ｐａｎｄｏｒａ ｄｅｌｐｈａｃｉｓ分生孢子的存活率。在无放回抽样观察中,孢子弹射后第２４ ｈ的存活 率在５１％、７４％、８５％、９０％、９５％和１００％ＲＨ与不同温度的组合中分别为４２～８１％、６９～８９％、７０～ ９５％、 ６７～１００％、 ７６～１００％和 ５６～１００％。存放４个月后,不同温度下的孢子存活率在 ５１％、 ７４％、 ８５％和 ９０％ＲＨ下分别为 ５５～７４％、 ５２～８７％、 ３８～７３％和 １～６５％。而在≥９５％ ＲＨ下孢子存活率 ２４ｈ 后锐减,至第７ ｄ几乎全部失活。以上结果表明,弹射后的飞虱虫疠霉孢子在头２４ ｈ的存活 易受低湿影响,但存活下来的孢子能继续在低湿下存活较久;饱和或接近饱和的高湿度最不 利孢子长久存活。     

飞虱虫疠霉液培菌丝的凝胶化及其杀蚜活性*

用丙烯酰胺淀粉凝胶包埋飞虱虫疠霉(Pandora delphacis)液培菌丝,制成含营养和不含营养的虫霉凝胶,并测试其产孢能力及对桃蚜(Myzus persicae)的侵染力。经持续9 d产孢观察,相同菌丝量条件下,含营养的虫霉凝胶的累计产孢量(1910.9 个/mm2）为不含营养的虫霉凝胶的3.14倍（608.5个/mm2）和对照（纯液培菌丝）的4.69倍（387.5个/mm2）。用虫霉凝胶的“孢子浴”接种桃蚜居群（成蚜与不同龄期若蚜的混合）,在2.23个/mm2的剂量下,接种后第7 d的死亡率达82.3%。结果表明,丙烯酰胺淀粉凝胶作为载体材料,与飞虱虫疠霉的基本生物学特性相容,对虫霉的剂型化具有重要意义