去乙酰化酶Sirtuin与衰老的研究进展

Sirtuin蛋白是一组具有NAD⁺依赖性的组蛋白去乙酰基转移酶,该家族成员具有高度保守的催化结构域,可以通过对多种底物进行去乙酰化作用,从而在机体内参与一系列的生物学活动,包括维持细胞抗胁迫能力和基因组稳定性以及参与能量代谢等．Sir2参与了酵母的交配型基因、端粒和rDNA 重复序列的沉默以及细胞寿命等生理功能．在哺乳动物中,SIRT1是该家族中目前研究最为广泛且较为透彻的成员,而SIRT6的功能研究成为近年来继SIRT1后的又一新热点．综述了sirtuin蛋白的结构及其与衰老关系的研究进展．     

基于Illumina测序的运动拮抗OJ致肝损伤炎性差异表达基因分析

本研究采用Illumina高通量测序技术对运动干预阻塞性黄疸致肝损伤模型小鼠的血液和肝组织进行测序,并验证运动在干预血液和肝组织炎症相关的因子差异表达的作用。本研究用雄性健康昆明种小鼠30只,随机分成假手术组、模型组和运动组,采用腹壁悬挂胆总管方法进行阻塞性黄疸致肝损伤造模。造模成功炎性期后,对运动组小鼠采取中等强度的跑台运动进行训练。对小鼠的血液和肝组织分别进行Illumina高通量测序,并对炎性相关差异表达因子进行相关性分析。结果显示,运动能有效地干预阻塞性黄疸致肝损伤所诱发的炎性反应,使炎症相关因子差异表达显著下降,与炎症和免疫相关的信号通路的富集表现显著降低。运动干预小鼠的血液和肝组织中差异表达显著的炎性相关的因子主要富集在NF-κB、TGF-β、TNF等信号通路的相关因子,其相关分子功能主要涉及到细胞信号转导、抑制细胞凋亡、免疫反应等。从KEGG富集的信号通路来看,小鼠血液和肝组织中的差异性显著富集通路也主要集中于NF-κB、TGF-β、TNF炎性相关的信号通路。且各炎性因子及炎性信号通路的差异表达在小鼠血液和肝组织内呈现相同趋势。结果表明中等强度的有氧运动能对阻塞性黄疸致肝损伤起到有效的抗炎效果,其表现在相关的炎性因子表达显著下降,且炎性信号通路的表达也显著降低,同时,各炎性因子和炎性信号通路的富集与差异表达呈现相同趋势。本研究为临床上采用有氧运动干预阻塞性黄疸致肝损伤患者的效果评定及其靶标因子筛选等提供实验基础。     

Prelamin A相互作用蛋白Narf的鉴定和表达分析

目的:探讨A型核纤层蛋白前体( prelamin A)在细胞内堆积造成细胞早老的机理,筛选了prelamin A相互作用蛋白并研究其在早老细胞中的表达情况.方法:以prelamin A的C末端区域为诱饵蛋白,采用酵母双杂交方法从人骨骼肌cDNA文库中筛选prelamin A相互作用蛋白.构建了prelaminA识别因子(Narf)与绿色荧光蛋白融合表达载体pEGFP - Narf,与红色荧光蛋白- prelamin A融合表达质粒pDsRed - PLA共转染HEK293细胞,激光共聚焦显微观察共定位情况.Western blotting检测Narf在衰老表型HEK293PLA细胞的表达情况.结果:筛选得到包括Narf在内的7个候选相互作用蛋白.Narf与prelamin A能相互作用并共定位于核纤层,在prelamin A过表达的HEK293PLA细胞中Narf表达没有升高.结论:Narf在细胞内与prelamin A相互作用,且表达量不受后者影响.