Expression Preference of the S-adenosylmethionine Synthetase (Sam-S) Gene in Drosophila melanogaster

Ｓ－腺苷甲硫氨酸合成酶（ＳａｍＳ）是目前已知的唯一在生物体内催化腺苷甲硫氨酸合成的酶。它是除自身以外、所有甲基化反应的甲基供体,并且参与多胺的生物合成。多胺对于稳定ＤＮＡ、ＲＮＡ和蛋白质大分子的双螺旋结构具有重要作用,和ＤＮＡ的甲基化一起参与了基因组的印迹（ｉｍｐｒｉｔｉｎｇ）过程。在分离到ＳａｍＳ基因的基础上,本文通过Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ和酶活两种方法,对该基因在野生型果蝇和四个等位突变体发育过程中主要阶段的转录和转译水平进行了测定。野生型果蝇由瑞典Ｕｍｅａ大学果蝇中心提供。由于该基因的突变是阴性致死突变,研究中采用了杂合子突变体：Ｓｕ（ｚ）５,Ｌ（２）Ｍ６,Ｌ（２）Ｒ２３和Ｄｆ（２Ｌ）ＰＭ４４,均由所在实验室诱变获得。Ｎｏｒｔｈｅｒｎ分析时,以ｃＤＮＡ＃１０和ａ微管蛋白基因为探针,分析果蝇卵巢、幼虫、蛹、胚胎、雄性和雌性成蝇中该基因Ｐｏｌｙ（Ａ）ＲＮＡ的转录水平。通过测定蛋白粗提物中的酶活,分析果蝇卵巢、幼虫、蛹、以及雄性成蝇腹部组织中该基因的翻译水平。Ｆｉｇ．１,２＆３表明：ＳａｍＳ基因主要在成熟雌蝇的卵巢中高表达,在雄性成蝇中该基因的表达水平明显低于雌性。在其它发育阶段及组织部位中仅维持     

Transient expression of hepatitis B virus surface antigen (HBsAg) and human erythropoietin (hEPO) genes in milk after direct introduction into ewe

Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｍｉｌｋｐｒｏｔｅｉｎｇｅｎｅｓｉｓｉｎｖｏｌｖｅｄｉｎａｈｕｇｅｎｅｔｗｏｒｋｏｆｒｅｇｕｌａｔｏｒｙｃｉｒｃｕｉｔｓｗｈｉｃｈａｒｅｌｉｎｋｅｄｔｏｔｈｅｉｎｔａｃｔｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇｍａｍｍａｒｙｇｌａｎｄ,ａｎｄｈｏｍｅｏｓｔａｓｉｓｄｕｒｉｎｇｐｕｂｅｒｔｙ,ｐｒｅｇｎａｎｃｙ,ｌａｃｔａｔｉｏｎａｎｄｉｎｖｏｌｕｔｉｏｎ.Ａｎａｌｙｓｉｓｏｆｐｕｔａｔｉｖｅｒｅｇｕｌａｔｏｒｙｅｌｅｍｅｎｔｓａｎｄｈｙｂｒｉｄｇｅｎｅｉｎｔｉｓｓｕｅｃｕｌｔｕｒｅｓｙｓｔｅｍｓ…     

链霉菌原生质体种间融合提高细胞分裂素效价的研究

本文报道粉红孢类群的泾阳链霉菌与淡紫灰链霉菌不液化亚种的原生质体种间融合重组的结果。利用单亲灭活和双亲株的遗传标记筛选细胞分裂素的融合子,融合率为 10-4—10-2。在所得的融合菌株中,F1211菌株的CTK效价为292μg/L,F1613的CTK效价为857μg／L,比低产原始亲株提高2—7倍,比高产亲株提高0.3--3.0倍。在电子显微镜下观察到融合过程。     

三甲双酮对斑马鱼胚胎早期发育的影响

针对抗癫痫药物的临床神经性毒副作用及致畸性,以三甲双酮为探针药建立了抗癫痫药毒性的斑马鱼胚胎模型。结果显示,斑马鱼胚胎暴露于三甲双酮后出现浓度依赖性的畸形和死亡。畸形表型有生长迟缓,脑区、眼和听囊变小,半规管和耳石受损,以及心血管系统异常。这些表型与临床病例和文献报道很相似。毛细胞染色显示听囊ML2神经丘毛细胞数明显减少。原位杂交检测发现脑标志基因zic1和xb51、自噬基因atg5的表达图式发生了异常变化。RT-PCR检测显示听觉基因val和hmx2的表达水平也发生了异常变化。这些结果提示脑组织和控制身体平衡及听力的神经感受器是三甲双酮的主要毒性靶位。斑马鱼胚胎和幼体可以模拟三甲双酮对哺乳动物的致畸和神经毒性反应。     

牛α—s1酪蛋白基因5’端及上游区的克隆鉴定和部分序列分析

本文以PcR法克隆得到牛α—s1酪蛋白基因5’端800bp片段,并以该片段为探针,筛选了以EMBL3为载体构建的牛基因组文库,得到一个阳性克隆。酶切该克隆,并以牛α—s1酪蛋白基因5’端800bp片段及该基因cDNA为探针杂交,鉴定了该插人片段的方向,亚克隆了各相应酶切片段,制作了较为详细的限制酶图谱,并分析了该基因转录起始点前后部分序列。与该基因现有的资料比较,酶切图谱存在部分位点的差异,序列存在少量突变和缺失,在5’上游区均发现有内含子及外显子部分,且缺失均发生于有重复序列的部位。     

牛α—S1—酪蛋白—乙肝病毒表面抗原融合基因在转基因羊中的表达

利用ＤＮＡ重组技术,将牛α－Ｓ１酪蛋白调控区基因（１６ｋｂ的片段）与乙肝表面抗原基因拼接,构建了融合基因表达构件：λ１０６。构件经转基因技术转入山羊受精卵。待受精卵发育至成熟个体并分娩、泌乳,ＥＬＩＳＡ检测其乳汁中的ＨＢｓＡｇ,证明所构建的牛α－Ｓ１酪蛋白基因表达构件是可以在羊乳腺中表达乙肝表面抗原基因,并将其表达产物分泌到乳汁中。     

病毒治癌

病毒治疗癌症近来有新进展．分子生物学技术的发展,大大促进了病毒在寄主专一性、基因传递的定位性及溶解癌细胞方面的研究：选择适当的病毒种类,根据癌细胞特征性表面蛋白的特性修饰病毒的表面蛋白,使之对癌细胞具有更强的亲和性;去除病毒中原有的致病基因如癌基因,并根据靶细胞的特性针对性地改造有关病毒基因如插入适当的抗癌基因,可能构建成安全有效的工程病毒用于癌症治疗．病毒治癌除具有较强的特异性外,和其他基因治疗方法相比,还具有能利用寄主细胞进行自我复制、级联放大以克服初始剂量不足等特点．     

Apoptin——一种特异性地促进肿瘤细胞凋亡的蛋白质

鸡贫血病毒(CAV)的vp3基因编码的一种小蛋白质apoptin,可以通过独立于p53作用途径的、不被Bcl-2过量表达所抑制的方式,诱导肿瘤细胞或转化细胞凋亡,而对正常细胞不发挥作用.Apoptin的这些特征使其可能成为一种有效的抗肿瘤药物,apoptin诱导细胞凋亡的独特方式对于研究细胞转化机制和细胞凋亡途径也很有启发.     

“匀浆互补法”测试杂种优势的研究(Ⅳ)——对水稻杂种优势的测试

前曾报道,应用“匀浆互补法”替代“线粒体互补法”可以作为测试谷子、玉米和棉花杂种优势的一个生化方法。本文报道应用“匀浆互补法”测试八个水稻组合的杂种优势也获得理想的结果,准确率达85％。     

斑马鱼shh启动子指导绿色荧光蛋白基因在脊索中的表达

体外实验业已证明shh基因的启动子受HNF3β蛋白直接调控。为研究斑马鱼shh启动子在体内的作用模式,构建了由538bp斑马鱼shh启动子(包含两个HNF3β结合位点)与绿色荧光蛋白EGFP组成的表达载体,命名为pShh-EGFP。将pShh-EGFP注射到斑马鱼1-细胞期内的受精卵中,定期在倒置荧光显微镜下观察GFP的表达。GFP在原肠作用期就开始表达,主要发生在中轴下胚层中;在体节形成期,GFP在脊索细胞中表达,但未发现在神经底板细胞中表达。由此可见,含两个HNF3β结合区域的538bp的斑马鱼shh启动子具有脊索表达活性。