枳实提取物及其药效组分对ox-LDL损伤的人脐静脉内皮细胞ICAM-1表达和NO释放的影响

目的:研究枳实提取物及其药效组分橙皮苷和新橙皮苷对氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,Ox-LDL)损伤的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells line,HUVEC)细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)表达和一氧化氮(nitric oxide,NO)释放的影响。方法:体外培养HUVEC,50μg/mL ox-LDL制造HUVEC损伤模型。以MTS染色法检测细胞毒性确定用药浓度。细胞ELISA法测定细胞表面ICAM-1的含量,试剂盒测定细胞培养上清液中NO含量。结果:①枳实提取物小于等于2 mg/mL时,橙皮苷浓度小于等于0.03125 mg/mL时,新橙皮苷浓度小于等于0.25 mg/mL时,HUVEC存活率分别大于80%。②2.0 mg/mL和1.0 mg/mL两个浓度的枳实提取物、15.625μg/mL的橙皮苷和0.2500 mg/mL新橙皮苷对ox-LDL诱导的HUVEC的ICAM-1表达有显著抑制作用。③2.0 mg/mL枳实提取物显著提高ox-LDL诱导的HUVEC和正常HUVEC培养液中的NO含量;7.813μg/mL、15.625μg/mL和31.250μg/mL 3个浓度的橙皮苷能显著提高ox-LDL诱导的HUVEC培养液中的NO含量,31.250μg/mL的橙皮苷能促进正常HUVEC的NO释放;0.2500 mg/mL和0.1250 mg/mL 2个浓度的新橙皮苷能显著提高ox-LDL诱导的HUVEC培养液中的NO含量。结论:枳实提取物及其药效组分橙皮苷、新橙皮苷能抑制ox-LDL诱导的HUVEC的ICAM-1表达,促进ox-LDL诱导的HUVEC的NO释放。     

葛根抗腹泻药效组分实验研究

目的:验证葛根抗腹泻的药效组分,为葛根的质量评价提供科学数据。方法:在经方葛根芩连汤的基础上分析葛根抗腹泻的药效组分,采用组合药理实验辅助验证药效组分。结果:抗腹泻相关实验中葛根水煎液中、高剂量组、葛根药效组分组、葛根芩连汤组与阴性对照组比较均有显著性差异(P0.01)。结论:葛根素-大豆苷-大豆苷元-3'-羟基葛根素是葛根抗腹泻的药效组分。     

安宫牛黄丸药效组分对内毒素损伤小鼠脑组织ATP酶活性的影响

目的:观察安宫牛黄丸药效组分对内毒素损伤小鼠脑组织ATP酶活性的影响。方法:腹腔注射脂多糖制备内毒素损伤小鼠模型,利用比色方法测定安宫牛黄丸药效组分对模型小鼠脑组织Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶的影响。结果:安宫牛黄丸药效组分可显著提高内毒素损伤小鼠脑组织Na+-K+-ATP酶及Ca2+-Mg2+-ATP酶活性,与安宫牛黄丸具有等效性。结论:安宫牛黄丸药效组分可使脑组织ATP酶活性升高,在安宫牛黄丸改善脑损伤、促清醒中发挥积极作用。     

枳实提取物及其药效组分对OX—LDL损伤的人脐静脉内皮细胞ICAM-1表达和NO释放的影响

目的：研究枳实提取物及其药效组分橙皮苷和新橙皮苷对氧化低密度脂蛋白（oxidized lowd ensity lipoprotein,Ox—LDL）损伤的人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells line,HUVEC）细胞间黏附分子-1（intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1）表达和一氧化氮（nitric oxide,NO）释放的影响。方法：体外培养HUVEC,50μg／mLOX—LDL制造HUVEC损伤模型。以MTS染色法检测细胞毒性确定用药浓度。细胞ELISA法测定细胞表面ICAM-1的含量,试剂盒测定细胞培养上清液中NO含量。结果：①枳实提取物小于等于2mg／mL时,橙皮苷浓度小于等于0．03125mg／mL时,新橙皮苷浓度小于等于0．25mg／mL时,HUVEC存活率分别大于80％。②2．0mg／mL和1．0mg／mL两个浓度的枳实提取物、15．625μg／mL的橙皮苷和0．2500mg／mL新橙皮苷对OX—LDL诱导的HUVEC的ICAM-1表达有显著抑制作用。③2．0mg／mL枳实提取物显著提高OX—LDL诱导的HUVEC和正常HUVEC培养液中的NO含量;7．813ixg／mL、15．625μg／mL和31．250μg／mL 3个浓度的橙皮苷能显著提高OX—LDL诱导的HUVEC培养液中的NO含量,31．250μg／mL的橙皮苷能促进正常HUVEC的NO释放;0．2500mg／mL和0．1250mg／mL 2个浓度的新橙皮苷能显著提高OX—LDL诱导的HUVEC培养液中的NO含量。结论：枳实提取物及其药效组分橙皮苷、新橙皮苷能抑制Ox-LDL诱导的HUVEC的ICAM-1表达,促进Ox-LDL诱导的HUVEC的NO释放。     

利用生物效应比评价利咽丹质量的方法研究

目的:测定利咽丹(Liyan Dan,LYD)及其药效组分(active components alignment,ACA)抗Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV-Ⅰ)的生物效应比,探讨使用药效组分标准生物效价表述中药质量的新鉴定方法。方法:用MTT染色法检测对HSV-Ⅰ所致细胞病变(cytopathogenoc effect,CPE)的抑制作用,用HPLC和UV法检测药效组分。用利咽丹及其药效组分对感染HSV-Ⅰ的细胞保护率(protective percent,PP)计算其生物效应比(biologlical effect ratio,BER)。BERS=PPS／PPACA(药物对细胞的保护率／药效组分对细胞的保护率;药物浓度2-x mg/mL)。结果:利咽丹有抑制HSV-Ⅰ所致CPE的活性,其生物效应比为1．16。结论:中药及其药效组分的生物效应比可以反映和揭示其品质的内涵,该指标可以客观地表述中药疗效的本质。本研究提出了中药品质研究的新思路和方法,引入了生物效应比和药效组分的新概念。中药药效组分生物效应质量鉴定方法如下:第一,建立药效组分标准生物效应作为效应标准;第二,按照药效组分生物效应标准的检测方法测定供试品;第三,按照公式计算生物效应比(BERS=PPS／PPACA)。中药药效组分质量评价生物效应比标准:1≥BERS≥0．9时,为合格药品;BERS>1时为优质药品;BERS<0．9时为不合格药品。此质量评价方法比仅依靠一种或两种化学成分含量来评价质量要更科学。     

安宫牛黄丸中黄芩苷和黄芩素的含量测定

目的:利用高效液相色谱法建立安宫牛黄丸中黄芩苷和黄芩素含量的测定方法.方法:采用高效液相色谱法.以VenusilASB-C18柱(4.6mm×250mm,5μm)为色谱柱;流动相分别为:乙腈-0.4%磷酸(21:79;35:65);检测波长:277 nm;流速:1 ml.min-1.结果:安宫牛黄丸中黄芩苷和黄芩素的含量分别为0.148%;0.0169%.结论:该方法准确、灵敏度高、重现性好,可以作为安宫牛黄丸中黄芩苷和黄芩素含量的测定方法.     

四种棋楠沉香的FTIR鉴定

目的:探讨四种棋楠沉香(Lignum Aquilariae Resinatum Qinan)黑棋、绿棋、黄棋、紫棋的红外鉴别特征和鉴定方法,为商品棋楠的质量评价提供科学依据。方法:采用傅里叶红外光谱法(FTIR)和二阶导数光谱法。结果:四种棋楠沉香的特征吸收峰为:2929、1735、1659、1512、1454、1377、1329、1267、1160、1055、897、700、561cm-1。其中,1244cm-1是黄棋特征峰;1650、1384、1246、1122、849、781、759cm-1是绿棋特征峰;1602、1103、10034、861、750cm-1是黑棋特征峰;1638、1601、1388、1272、1246、1122、1032、965、847、780、758cm-1是紫棋特征峰。在二阶导数谱中,1658、1512、1454、1377、1317、1163、1128、895、780、700cm-1处的吸收峰经二阶导后强度增强,在谱图上特征性更明显。经比较,绿棋和紫棋之间的相似度比较高。结论:红外光谱鉴定法简便易行,可用于棋楠沉香的定性鉴别。