内切葡聚糖酶高产菌株的诱变选育

【目的】建立里氏木霉(Trichoderma reesei)高产突变菌株的快速筛选方法,选育出高产内切葡聚糖酶的突变株。【方法】对里氏木霉T306菌株的初筛培养基进行优化,建立快速筛选方法;通过紫外诱变手段选育内切葡聚糖酶高产突变菌株,并对突变菌株的产酶培养基进行优化。【结果】在初筛培养基中添加浓度为0.1%(W/V)的乳糖、蛋白胨及脱氧胆酸钠有利于菌株的筛选。诱变后筛选出菌落形态发生明显变化的内切葡聚糖酶高产突变株0516,其羧甲基纤维素酶活力(CMC酶)较出发菌株提高了38.9%。其产酶培养基经优化后,得到最适碳、氮源分别为:乳糖1.50%、硫酸铵0.14%、尿素0.05%、蛋白胨0.10%,优化后CMC酶活力达64.2 U/mL,较优化前提高了2.3倍。【结论】建立了里氏木霉高产突变菌株的快速筛选方法,通过紫外诱变育种获得了产内切葡聚糖酶能力高且遗传稳定的突变株0516。     

大鼠部分肝切除前后热激处理对过氧化物酶基因表达的影响

用过氧化物酶原位复性电泳(SDS-POD-PAGE)技术分析了部分肝切除(partial hepatectomy,PH)、部分肝切除后再热激(partial hepatectomyfollowing heat shock,PH-HS)和先热激再部分肝切除(heat shock follow ing partial hepatectomy,HS-PH)后肝再生期间过氧化物酶(POD)基因表达差异,结果表明,PH中表达的POD基因种类(7个)>PH-HS(5个)>HS-PH(3个);三个模型的POD总活性为:HS-PH>PH>PH-HS.根据实验结果推测,POD在肝再生和肝损伤恢复中起一定作用。 Abstract:Expression difference of the peroxidase(POD)genes during liver regeneration after partial hepatectomy(PH),partial hepatectomy following heat shock(PH-HS)and heat shock following partial hepatectomy(HS-PH)was analyzed by POD renatured electrophoresis(SDS-POD-PAGE).The results showed that the expressed POD gene kinds in PH,PH-HS and HS-PH were 7,5 and 3 respectively,and that the total activities of POD in the three models were HS-PH>PH>PH-HS.The results suggested that POD play some roles during liver regeneration and in recovery after liver damage.     

饥饿状态下草鱼生长激素的分泌

以两种规模草鱼为对象,研究了饥饿对其生长激素的影响。检测由背大动脉导管抽取的连续血样的结果表明;饥饿状态下草鱼（体重为0．5－1．0kg）生长激素分泌仍是间歇性的,但饥饿明显提高其总体生长激素平均值、基础生长激素平均值和其最大峰值。对于草鱼鱼种（体重为25．30g）,饥饿也明显提高其血液中生长激素水平,但草鱼种的肥满度系数和血糖浓度却。在体外灌流实验中,饥饿的草鱼种脑垂体碎片生长激素基础分泌值明显高于正常投喂的对照组。这些结果表明：饥饿状态下草鱼生长激素分泌增强。     

不同的下丘脑肽和神经递质对鲤鱼促性腺激素和生长激素分泌活动的影响

以１龄性腺发育中期鲤鱼为材料,采用腹腔（ｉ．ｐ）注射的方法,研究不同的下丘脑肽和神经递质对鲤鱼促性腺激素（ＧｔＨ）和生长激素（ＧＨ）分泌的影响。结果表明：促甲状腺激素释放激素（ＴＲＨ）、Ｌ－多巴（Ｌ－ＤＯＰＡ）、甲基睾酮（ＭＴ）、γ－氨基丁酸（ＧＡＢＡ）、促黄体素释放激素类似物（ＬＨＲＨ－Ａ）和三碘甲状腺原氨酸（Ｔ３）都能显著刺激ＧｔＨ的分泌,但最大效应时间各不相同。ＴＲＨ和ＬＨＲＨ－Ａ能促进ＧＨ的分泌,Ｌ－ＤＯＰＡ、ＭＴ、ＧＡＢＡ对血清ＧＨ水平没有明显影响;Ｔ３则对ＧＨ分泌有一定的抑制作用。这说明鲤鱼ＧｔＨ和ＧＨ的分泌除了受各自的下丘脑释放因子和释放抑制因子的双重神经内分泌调控外,还受多种其它相同和不同调节因子的影响,也反映了鲤鱼ＧｔＨ和ＧＨ分泌的神经内分泌调控的复杂性。     

半胱胺盐酸盐和LHRH-A对黄鳍鲷IGF-Ⅰ基因表达和生长的影响

本文以黄鳍鲷 (Sparuslatus)为研究对象 ,利用GeneRaceTM 技术 ,从其肝组织中克隆出类胰岛素生长因子 (IGF Ⅰ )cDNA ,并应用半定量RT PCR方法研究了半胱胺盐酸盐 (Cysteaminehydrochloride)和LHRH A对其肝组织IGF Ⅰ基因表达的影响。黄鳍鲷IGF ⅠcDNA全长为 84 0bp ,编码 185aa多肽 ;序列分析表明 ,黄鳍鲷IGF Ⅰ基因编码的氨基酸序列与金鱼的同源性为 75 8% ,与牙鲆的同源性为 86 5 % ,与同属鲷科的黑鲷同源性高达 10 0 % ,证明鱼类类胰岛素生长因子是非常保守的 ,E区域分析结果表明黄鳍鲷IGF Ⅰ属Ea 4型。在饲料中投喂CSH、LHRH A等添加剂 ,实验组黄鳍鲷鱼种的相对生长率、垂体GH含量、肝脏IGF ⅠmRNA水平均显著高于对照组。以上结果提示 :CSH、LHRH A能促进黄鳍鲷生长激素的合成和IGF Ⅰ基因的表达 ,从而促进鱼种的生长     

一堂生动的英国中学生物复习课

一堂生动的英国中学生物复习课张为民（河南省焦作市教育学院４５４１５２）复习巩固所学知识已广泛被教师应用于课堂教学实践，然而教师在上复习课时，往往会碰到这样一些问题：学生对所复习的内容有了一定的了解，注意力容易分散，产生厌倦、不耐烦的情绪，对复习的内容...     

水稻(Oryza sativa L.)重复DNA顺序的克隆及序列分析——重复顺序存在意义的探讨

以大肠杆菌启动子选择质粒pKK175-6、pKK232-8为载体,将通过复性动力学方法获得的水稻重复DNA顺序片段进行克隆。阳性克隆菌株表现出对四环素或氯霉素不同程度的抗性。DNA序列分析表明,克隆到的某些水稻重复DNA顺序具有丰富的基因表达调节元件的同源序列。     

虹鳟胰岛素样生长因子Ⅰ和Ⅱ在大肠杆菌中的融合表达及促有丝分裂活性

The preparation of recombinant rainbow trout insulin like growth factorsⅠ(IGF Ⅰ) andⅡ(IGF Ⅱ) using the His6 fusion polypeptide technique and the mitogen ic activities of these compounds were investigated. Rainbow trout IGF Ⅰand IGF ⅡB C A D domain cDNA were subcloned into expression vector pET 15b (Nova gen, USA) and expressed in host E. coli BL21 (DE3) as fusion polypeptides co ntai ning a stretch of 6 histidines at the N terminus (referred as His6 fusion polyp e ptide). The addition of IPTG (0 4 mmol/L) induced the expression of polypeptide s with a molecular weight of about 10 0 kDa. The expressed proteins were ammoniu m sulfate fractionally precipitated and further purified using a Ni 2+ His ·Bind R esin (Novagen, USA) affinity column. The reduced SDS PAGE showed that IGF Ⅰ w as of 80% purity and IGF Ⅱ was of 90% purity. The rainbow trout IGF Ⅰ His6 fusi on polypeptide showed dose dependent mitogenic effects on BALB/NIH3T3 cells in th e serum free medium culture, and rainbow trout IGF Ⅱ His6 fusion polypeptide al s o showed this kind of activity, but with lower potency. Taken together,these re sults indicated that the rainbow trout IGF Ⅰ and ⅡHis6 fusion polypeptides pr o duced in E. coli were biologically active, with IGF Ⅰ His6 fusion polypept ide of higher potency.     

生长激素受体的研究进展

生长激素（GH）在促进动物生长、发育等代谢过程中起着重要作用,GH发挥生理作用的第一步是与靶细胞膜表面的生长激素受体（CHR）结合。现已基本阐明了CHR的结构及由CHR介导的信号转导途径,对GHR基因表达调节的机制也有了一定的了解。GHR是由约620个氨基酸组成的单链跨膜糖蛋白,其胞外区、跨膜区及胞区内分别由约245、25及350个氨基酸组成。由GHR介导的信号转导途径主要有：①酪氨酸激酶系统;②蛋白激酶C途径;③胰岛素受体底物途径。营养状况及GH等内分泌因子对GHR的表达也有调节作用。