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核糖体蛋白L6/Taxreb107的核定位信号的分析 总被引：3，自引：0，他引：3
核糖体蛋白L6（RpL6,Taxreb107）含有三个具有核定位信号特征的基序.用作者构建的核定位信号捕获系统分析了这些核定位信号是否具有介导蛋白质进行核转位的功能.将RpL6/Taxreb107分段插入核定位信号捕获载体的克隆位点后转化宿主酵母,发现其前两个核定位信号可以介导融合蛋白进入细胞核,而第三个核定位信号无此作用.将RpL6/Taxreb107分段与绿色荧光蛋白融合后转染培养的哺乳类细胞,证实了以上在酵母中所得的结果.进一步发现RpL6/Taxreb107的前两个核定位信号同时具有核仁定位的功能.当在细胞中表达的早期,进入核内的融合蛋白优先定位于核仁.这些结果一方面有助于理解RpL6/Taxreb107核转位的机理,同时说明作者构建的核定位信号捕获系统也可用在蛋白质中寻找核定位信号. 相似文献
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粒酶B（granzyme B, GrB）是一种重要的丝氨酸蛋白酶参与细胞毒性T淋巴细胞(CTL)和自然杀伤细胞(NK)介导的细胞杀伤过程.为研究粒酶B在肿瘤细胞中异位表达后能否诱导细胞死亡,将构建的活性型粒酶B（GrBa）基因及其酶活性中心突变型（mGrBa）基因的真核表达载体,以脂质体法瞬时转染HeLa细胞,通过绿色荧光蛋白(GFP)共表达、间接免疫荧光、细胞计数、MTT等方法,观察到GrBa蛋白的异位表达引起多核巨细胞形态异常,并且表达细胞的生长受到抑制.Percoll分离多核巨细胞后,观察到其生长状态较差,是导致生长抑制的直接原因.细胞骨架破坏和具有多极纺锤体的异常有丝分裂,推测是多核巨细胞不断产生的根源.上述结果为GrBa应用于肿瘤基因治疗提供了一定依据. 相似文献
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