利用CRISPR/Cas9n double nick系统构建人DNAH2基因敲除的U2OS细胞株

基于CRISPR/Cas9n double nick技术构建人DNAH2(Homo sapiens dynein,axonemal,heavy chain 2)基因敲除的U2OS稳定细胞株,旨在研究DNAH2基因的生物学功能。首先设计并合成A、B两个sg RNA(Single guide RNA)以及各自的互补链,退火连接形成DNAH2 sg RNA-A、B双链,再分别与带有BbsⅠ粘性末端的p X462线性载体相连,形成p X462-DNAH2-A、p X462-DNAH2-B重组真核表达质粒。质粒共转染至U2OS细胞后,加入嘌呤霉素,以有限稀释法获得阳性单克隆细胞株,再以蛋白印迹实验检测DNAH2蛋白的表达,最后通过PCR-基因测序技术分析突变特点。结果显示A、B sg RNA双链成功插入p X462载体,U2OS-DNAH2-KO单克隆细胞株中DNAH2蛋白不表达,DNAH2基因发生移码突变,从而证实利用CRISPR/Cas9n double nick系统成功构建人DNAH2基因敲除的U2OS稳定细胞株,为研究DNAH2基因提供有利工具。     

大蓟紫外光谱鉴别特征的初步研究

为了研究大蓟(Cirsium japonicum)紫外光谱的显著鉴别特征，以快速、准确地鉴别正品大蓟，采用多溶剂紫外光谱法分析福建省不同地区的自采大蓟和市售18批不同厂家商品大蓟在无水乙醇、氯仿及石油醚溶剂中紫外特征差异，并采用主峰值(含肩峰值)及主谷值的均值加方差归纳比较特征。结果表明，自采大蓟在无水乙醇溶剂中表现为“谷—峰—谷—峰”，即在273±3 nm、326±2 nm处的峰值和250±2 nm、298±1 nm处的谷值具有显著鉴别意义；在氯仿溶剂中，表现为“峰—谷—峰”，即在245±3 nm、273±4 nm处的峰值和260±3 nm处的谷值具有显著鉴别意义；在石油醚溶剂中表现为“肩峰—谷—峰”，即在233±3 nm处的肩峰、265±5 nm处的峰值和257±5 nm处的谷值具有显著鉴别意义。紫外光谱的峰谷特征可用于大蓟鉴别。     

武夷山市药用植物资源调查及其民间传统应用分析

通过查阅文献、野外采集调查、民间走访及传统集市访查等方法，对武夷山市药用植物资源和民间传统用药的特点进行调查分析。武夷山市药用植物有1842种，分属于253科923属。其中，共收集到有实物的民间常用药用植物226种，整理鉴定后，明确其来源、入药部位、功能主治的有164种。武夷山市药用植物种类多，民间医药文化知识丰富，具有较好的发展前景。     

当归及其混淆品独活、欧当归的紫外鉴别

为寻找当归及其混淆品独活、欧当归的紫外吸收光谱鉴别特征，采用紫外谱线组法对三者在不同极性溶剂中的紫外吸收光谱图进行比较。结果表明，当归和独活在四种极性溶剂中均存在明显差异，而当归和欧当归仅在无水乙醇和蒸馏水溶剂中鉴别差异显著。紫外谱线组法可以鉴别当归及其混淆品独活、欧当归。