约氏疟原虫Pys48核酸疫苗传播阻断效应的实验研究

探讨约氏疟原虫（Plasmodium yoelii17XL）Pys48核酸疫苗免疫BALB/c小鼠的特异性抗体产生特点及其效应。将Pys48核酸疫苗肌肉内注射免疫BALB/c小鼠,并以空质粒注射组作为对照,3次免疫后通过P.y17XL攻击小鼠;采用ELISA检测免疫后小鼠血清中特异性抗体水平;通过P.y17XL感染小鼠,取其感染后第3天含有配子体的血液进行体外培养,观察合子、动合子的形成数量。ELISA结果显示疫苗免疫组小鼠血清特异性抗体滴度明显高于对照组;而合子、动合子数量明显低于对照组。提示Pys48核酸疫苗具有良好的免疫原性,免疫小鼠后可以建立起有效的传播阻断效应。     

长效和短效NO发生剂体内干预疟原虫红内期重要侵袭分子转录水平的观察

为探讨NO对疟原虫红内期侵袭相关分子MSP-1、AMA-1和RhopH complex转录水平的影响。通过雌性BALB／c小鼠腹腔感染1×10^6致死型约氏疟原虫P．yoelii 17XL,体内给予NO长效（NOC18）和短效（NOC5）发生剂进行干预后,纯化疟原虫成熟裂殖体,提取总RNA,通过Real—time PCR相对定量方法检测MSP-1、AMA—1和RhopH complex的转录水平。结果显示和正常感染组相比,NOC5处理后疟原虫侵入的关键分子MSP—1、AMA-1和RhopH complex的转录水平明显下降;而NOC18处理则未见这一现象。本研究结果提示NO抑制疟原虫侵袭关键分子的转录水平,进而可能下调疟原虫相应蛋白的表达,从而影响疟原虫的侵入过程。     

左旋精氨酸上调约氏疟原虫感染DBA/2小鼠的抗体应答效应

探讨左旋精氨酸（L-Arginine,L-Arg）对约氏疟原虫（Plasmodium yoelii17XL,P.y17XL）感染DBA/2小鼠体液免疫应答的调节效应。于P.y17XL感染前7 d,连续每日给予DBA/2小鼠L-Arg（1.5 g/kg体重）灌胃预处理,动态观察各组感染小鼠原虫血症水平和生存率;于感染后第0、8和10天分别提取小鼠脾细胞,流式细胞术检测DBA/2小鼠浆细胞分泌IgG1和IgG2a的水平。与NC组比较,L-Arg能够显著降低感染小鼠的原虫血症水平,自愈时间提前。感染后8 d和10 d,L-Arg组CD138＋B220＋IgG1＋细胞数量出现有意义的增加,感染后10 d,L-Arg组CD138＋B220＋IgG2a＋细胞数量明显升高。L-Arg处理可诱导DBA/2小鼠建立更加有效的抗体免疫应答,明显加速DBA/2感染小鼠清除疟原虫。     

不同维生素免疫调节作用在鼠疟模型中的实验观察

探讨不同维生素对P. y17XL感染BALB/c小鼠的免疫调节作用。将6~8周龄,雌性BALB/c小鼠,随机分为维生素（ V）处理组和对照组。 V处理组小鼠分别经50 mg/kg VA、600 mg/kg VE 或1 g/只VC连续10 d灌胃,0.2 mL/只;对照组小鼠分别给予相同剂量的溶剂（大豆油或生理盐水）处理。之后,各组小鼠分别经腹腔接种1＆#215;106 P. y17XL寄生的红细胞,动态观察感染小鼠原虫血症水平和生存率;流式细胞术检测感染后第0、3和5天小鼠脾细胞树突状细胞（ DCs）亚群（ pDCs与mDCs）百分比及功能分子（ TLR9和MHC域）的表达。与对照组相比,VA和VE处理组小鼠原虫血症水平升高,生存率降低;感染后第5天脾细胞中pDCs与mDCs亚群水平以及DCs表面受体TLR9和表面分子MHC域的表达水平显著下降。相反,VC处理组小鼠原虫血症水平降低,生存率延长,pDCs与mDCs亚群以及TLR9和MHC域的表达水平显著升高。结果表明,不同维生素对疟疾感染产生不同的调控作用,VA和VE通过抑制DCs数量和功能,加重疟疾感染,而VC则促进DCs数量和功能,推迟感染进程。