湖羊瘤胃微生物GH9家族葡聚糖酶基因IDSGLUC9-25的表达与功能表征

【目的】葡聚糖酶是饲用添加剂的重要成分,本研究旨在从湖羊消化道微生物中挖掘性质优良的GH9家族葡聚糖酶基因,用于研发新型饲用酶制剂。【方法】从湖羊瘤胃微生物cDNA中扩增IDSGLUC9-25基因,在大肠杆菌中进行异源表达,对重组蛋白进行诱导表达和纯化,研究重组蛋白的酶学性质和底物水解模式。【结果】IDSGLUC9-25基因编码527个氨基酸,包含一个CelD_N结构和一个GH9家族催化结构域;重组蛋白rIDSGLUC9-25分子量约为62.7 kDa,最适反应温度和pH分别为40℃和6.0,在30-50℃下活性较高,在pH 4.0-8.0范围内能够保持较高的稳定性,经pH 4.0-8.0缓冲液处理1 h后残余活性均大于90%;底物谱分析表明,rIDSGLUC9-25能催化大麦β-葡聚糖、苔藓地衣多糖、魔芋胶和木葡聚糖,比活性分别为(443.55±24.48)、(65.56±5.98)、(122.37±2.85)和(159.16±7.73) U/mg;利用薄层色谱法(thin layer chromatography, TLC)和高效液相色谱法(high performance liquid chromatography, HPLC)分析水解产物发现,rIDSGLUC9-25降解大麦葡聚糖主要生成纤维三糖(占总还原糖64.19%±1.19%)和纤维四糖(占总还原糖26.24%±0.12%),催化地衣多糖主要生成纤维三糖(占总还原糖78.46%±0.89%)。【结论】本研究报道了一种来自密螺旋体属细菌的内切β-1,4-葡聚糖酶IDSGLUC9-25 (EC 3.2.1.4),能高效催化多糖底物生成纤维三糖和纤维四糖,为研发饲用酶制剂和制备低聚寡糖建立基础。     

应用生物完整性指数评价水生态系统健康的研究进展

生物完整性指数(IBI)法是评价水生态系统健康的一种重要且被广泛应用的方法.本文综述了生物完整性指数的指示物种选择原因、构建方法以及在水生态系统健康评价中的应用,并总结了现阶段生态系统评估常用的鱼类完整性指数（F_IBI）、底栖无脊椎动物完整性指数（B_IBI）和着生藻类完整性指数（P_IBI)中候选生物状况参数指标,提出了使用微生物完整性指数(M_IBI)评价水生态系统健康的可行性和必要性.     

翡翠珠的愈伤组织诱导和植株再生

1植物名称翡翠珠(Senecio rowleyanus Jacobsen),又名珠峰千里光. 2材料类别茎段. 3培养条件(1)诱导培养基:MS 6-BA 2.0 mg·L-1(单位下同) NAA 0.01 3%蔗糖;(2)增殖培养基:MS 6-BA 1.0 NAA 0.1 3%蔗糖;(3)生根培养基:1/2MS NAA 0.1 1.5%蔗糖.每种培养基均附加0.8%琼脂,pH 5.8～6.0.培养温度23～27℃,光照时间12 h·d-1,光强为30～40 μmol·m-2·s-1.     

口腔粘膜癌变过程中Bcl-2 及Bax 的表达及临床意义

目的:探讨口腔粘膜癌变过程中口腔粘膜组织中Bcl-2和Bax的表达变化及其临床意义。方法:随机选取我院口腔科就诊的35例口腔粘膜下纤维化(OSF)患者以及15例发生口腔粘膜下纤维化癌变患者为研究对象并分为OSF组和OSF癌变组,并选择15例健康体检者作为对照组。所有研究对象均经统一的口腔科专业医师取口腔内相同部位粘膜组织,通过TUNEL测定其细胞凋亡指数,采用免疫组化法检测其Bcl-2、Bax的表达情况。结果:(1)OSF癌变组、OSF晚期患者的AI均显著高于其他各组(P0.05),OSF癌变组患者AI显著高于OSF晚期组(P0.05),对照组与OSF早期、中期患者AI比较,差异均无统计学意义(P0.05)。(2)OSF癌变组Bcl-2蛋白表达显著高于健康对照组及OSF早、中期患者(P0.05),OSF晚期患者Bcl-2蛋白表达显著高于健康对照组(P0.05);OSF癌变组Bax蛋白表达与健康对照组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论:Bcl-2、Bax蛋白的表达均在口腔粘膜癌变过程逐渐上调,可能参与了口腔粘膜癌变的发生和发展。     

引导学生思考的教学实例

高中《生物》教学内容比初中《生物》复杂 ,且理论性强 ,不只停留在生物现象的表面 ,而侧重于分析现象的机理。教师在课堂教学中 ,注重引导学生思考 ,不仅可以激发学生学习的兴趣 ,增强学习的信心 ,更重要的是可以发展学生的思维能力。1　由常见现象引入 ,诱发好奇心理 ,激发主动思维高中学生有很强的好奇心 ,在课堂教学中创设一个让学生“期待”、“好奇”、“激动”的求知意境 ,从而激发学生强烈的求知欲望 ,是课堂教学中十分重要的环节。“诸论”课中 ,生物具有的 7个基本特征是重点内容 ,而新陈代谢是最根本的特征 ,只有突破这一难点 ,…     

双荚决明的组织培养与植株再生

1植物名称双荚决明(CassiabicapsularisLinn.)。2材料类别成熟种子无菌苗的下胚轴。3培养条件以MS为基本培养基。(1)种子萌发培养基:不含任何激素的M S;(2)诱导分化培养基:MS+6-BA1.0mg·L-1(单位下同)+2,4-D0.01+NAA0.1;(3)增殖培养基:MS+6-BA0.5+2,4-D0.01+NAA0.01;(4)生根培养基:1/2MS+IBA0.5+NAA0.01。上述培养基中附加0.7%琼脂;生根培养基中蔗搪为1.5%,其余为3%;pH5.8。培养温度为(25±2)℃;光照时间为12h·d-1,光强为30￣40μmol·m-2·s-1。4生长与分化情况4.1无菌材料的获得供试材料来源于四川农业大学读书公园。挑选…     

大花天竺葵的组织培养与快速繁殖

1植物名称大花天竺葵(Pelargonium domesticumL. H.Bailey),又名蝴蝶天竺葵、家天竺葵、洋蝴蝶、毛叶入腊红等.