Notch-Hif-1-alpha信号通路参与调控大鼠肝再生过程的研究

目的：探讨使用酌分泌酶抑制剂Fli-06 特异性阻断Notch 信号通路后,大鼠肝部分切除术后肝再生的情况并初步阐明 Notch-Hif-1-alpha信号通路调控肝再生的可能机制。方法：取SD 大鼠分为对照（生理盐水注射组,n=24）和抑制剂组（酌分泌酶抑制剂 注射组,n=24）。给予药物处理后,两组分别施行大鼠肝部分切除术,术后0 d,1 d,3 d,5 d,每个时间点分别留取对照组（n=6）及抑 制剂组（n=6）再生的肝组织,并检测相应肝重体重比,免疫组化法检测再生肝PCNA（增殖细胞核抗原,Proliferation Cell Nuclear Antigen）表达,RT-PCR 检测再生肝组织中的Notch1、Hes1、VEGF mRNA的变化,Western-Blot 法检测NICD（Notch 胞内段,Notch Intracellular Domain）、Hif-1-alpha（低氧诱导因子-1-alpha,Hypoxia Inducible Factor-1琢)蛋白在肝再生过程的变化情况。结果：1、肝部分切除 术后3 d和5 d,抑制剂组肝重体重比明显低于对照组差异有统计学意义（P<0.05）;2、免疫组织化学染色结果提示：抑制剂组再生 肝PCNA阳性细胞率在术后1 d,3 d,5 d 均明显低于对照组（P<0.05）;3、Western blot 结果表明：NICD 和Hif-1-alpha蛋白水平明显低 于对照组（P<0.05）;同时RT-PCR 结果提示：抑制剂组Hes1 的mRNA表达量术后1 d,3 d明显低于对照组,差异具有统计学意义 （P<0.05）。同时,抑制剂组VEGF mRNA 水平在术后3 d,5 d明显低于对照组,差异具有统计学意义（P<0.05）。结论：在大鼠肝部分 切除术后肝再生过程中,使用酌分泌酶抑制剂Fli-06 抑制Notch 信号通路后,大鼠的肝再生能力明显降低,Notch-Hif-1alpha信号通 路可能参与调控了大鼠肝部分切除术后肝再生过程。     

小鼠肝血窦内皮细胞分离与鉴定新方法

目的:改进小鼠原代肝血窦内皮细胞的分离方法。方法:经过小鼠肝脏的原位灌洗、消化制备单细胞悬液、差速离心、密度梯度离心以及免疫磁珠分选等步骤,分离获得小鼠原代肝血窦内皮细胞,再通过流式细胞仪鉴定、细胞内吞功能染色以及对细胞超微结构的电子显微镜观察,对分离出的肝血窦内皮细胞进行鉴定。结果:肝血窦内皮细胞的平均得率为5.6×10~6个/只小鼠,细胞活性比率约为96%左右;细胞流式鉴定结果显示新鲜分离出的肝血窦内皮细胞VEGFR3阳性率达到95.8%,VEGFR2+CD31+双阳性细胞阳性率达到93.7%。分选出的LSECs能够有效吞噬FITC-FSA和Dil-Ac-LDL。培养1天后肝血窦内皮细胞的微观结构,可见其特征性的窗孔和筛板。结论:本文总结的分离方法可以稳定、高效地获得小鼠原代肝血窦内皮细胞。     

一个门静脉血管海绵样变治疗的新方法——门静脉人工血管置换

目的:探索手术治疗门静脉血管海绵样变的新方法.方法:采用单纯门静脉人工血管置换,即不做分流、断流术,并保存脾脏治疗门静脉血管海绵样变的患者2例.结果:2例患者的术后肝功能及门静脉内血液流速恢复正常,脾脏逐渐缩小.结论:门静脉人工血管置换是治疗肝前性门静脉血管海绵样变的安全、可行的新方法.     

一个门静脉血管海绵样变治疗的新方法--门静脉人工血管置换

目的：探索手术治疗门静脉血管海绵样变的新方法。方法：采用单纯门静脉人工血管置换,即不做分流、断流术,并保存脾脏治疗门静脉血管海绵样变的患者2例。结果：2例患者的术后肝功能及门静脉内血液流速恢复正常,脾脏逐渐缩小。结论：门静脉人工血管置换是治疗肝前性门静脉血管海绵样变的安全、可行的新方法。