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目的:构建乙酰肝素酶重组慢病毒转基因和siRNA干扰质粒,为探讨HPSE在在肿瘤浸润转移过程中的分子机理奠定基础。方法:乙酰肝素酶cDNA全长扩增和最佳siRNA干扰片段筛选分别采用PCR和Real-time PCR方法,慢病毒系统载体分别使用pWPI和siRNA pSico系统,采用限制性内切酶快速连接方法联接目的基因和最佳最佳siRNA干扰片段,表达载体鉴定均采用核苷酸序列测定,HPSE重组慢病毒表达质粒和siRNA片段细胞转染采用脂质体转染法。结果:成功扩增乙酰肝素酶全长并连接入pWPI载体构建成重组表达载体HPSE-pWPI,重组质粒测序结果显与HPSE基因的同源性达99%。转染293T后有HPSE基因的表达。筛选出最佳siRNA干扰片段为HPSE-1222并成功插入pSico载体,构建成重组表达载体HPSE-siRNA pSico,重组载体测序显示与构建的shRNA结构序列完全一致。结论:成功采用慢病毒载体系统构建了乙酰肝素酶重组慢病毒转基因和siRNA干扰质粒,为探讨HPSE在在肿瘤浸润转移过程中的分子机理奠定基础。 相似文献
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甘肃木本植物特有种类及其分布 总被引:3,自引:0,他引:3
在系统收集整理甘肃木本植物研究成果的基础是,考证特有树种学名,简述其性状、分布、产地及生境。首次查明,甘肃木本植物特有种类共23科31属38种33变种6变型。研究木本植物特有现象,为深入探讨甘肃森林植物区系组成、性质、特点及演变规律提供资料,对保护和利用树种基因资源有着极其重要的意义。 相似文献
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甘肃悬钩子属系统分类及区系地理研究 总被引:1,自引:1,他引:0
甘肃省产悬钩子属植物34种、8变种、隶属于3组11亚组,其中5个种为甘肃分布新记录、个新种及1个新变种。本文根据实地调查和标本鉴定,编制了系统检索表,并对甘肃悬钩子属植物区系成分及区系成进行了初步探讨。 相似文献