响应面法优化白及多糖的提取和醇沉工艺

白及多糖的生物活性近来引起了人们的高度关注,本研究旨在对白及多糖的水提醇沉工艺进行系统的优化,为白及多糖的深入研究提供理论基础。在单因素试验的基础上,本实验采用基于BBD (Box-Benhnken Design)的响应面法,分别对回流提取工艺和醇沉工艺进行优化。对回流提取工艺的优化以回流提取率为评价指标,得到最优回流提取工艺为提取时间3 h,提取温度100℃,料液比例为1:34 (g:mL);对醇沉工艺的优化以醇沉分离率为评价指标,得到最优醇沉工艺为:乙醇浓度85%,醇胶比例8:1 (g:g),醇沉时间6 h;在此条件下,提取率达到26.44%。     

长春花愈伤组织的诱导及限速酶活性的研究

长春花生物碱是目前应用最有效的天然植物抗肿瘤药物,目前利用生物工程生产长春花生物碱成果甚微。通过对长春花愈伤组织的诱导条件进行研究,同时对植株各部位的色氨酸脱羧酶(TDC)、过氧化物酶(POD)进行精确测定。认为长春花愈伤组织的诱导以MS培养基、激素2,4-D 2 mg/L和6-BA 0.5 mg/L最好,生物碱的合成是植物体多器官共同参与的结果。     

陈皮黄酮提取工艺优化及抗氧化活性检测

本研究采用超声波辅助溶剂提取法提取陈皮(Citrus reticulata Blanco)黄酮类化合物,通过1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)法和2,2'-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(ABTS)法检测抗氧化活性.设计响应面实验,考察乙醇质量分数、超声时间和料液比对陈皮黄酮提取的影响,得到的最佳提取工艺为乙醇质量分数60％,超声时间36 min,料液比1∶25 (g/mL),所得黄酮提取率为24.75 mg/g;DPPH实验表明纯化前、乙酸乙酯萃取和AB-8树脂纯化后的陈皮黄酮的IC50值分别为427.83、129.76、87.44μg/mL,抗坏血酸当量(AEAC值)分别为1283.85、4266.04、6245.73mg/100 g;ABTS实验表明纯化前、乙酸乙酯萃取和AB-8树脂纯化后的陈皮黄酮的IC50值分别为181.67、50.87、43.3μg/mL,AEAC值分别为8584.79、30690.99、36006.24mg/100 g.并且陈皮黄酮的抗氧化能力具有剂量效应关系,纯化后的能力显著增强.     

内生真菌和诱导子对长春花悬浮细胞及生物碱合成的影响

目的:探讨内生真茵和诱导子对长春花悬浮细胞生长及生物碱合成的影响.方法:接种内生真茵与悬浮细胞的共同培养,添加诱导子到细胞培养液中对长春花悬浮细胞进行诱导处理,检测实验处理后长春花悬浮细胞各项生化指标.结果:培养液pH值上升,悬浮细胞MDA舍量增加,细胞抗氧化酶(POD、CAT)和生物碱合成的关键性酶(PAL、TDC)活性升高.生物碱产量得到提高,诱导组悬浮细胞生物碱产量达到770.36μg/gFW,共培养组生物碱产量为693.76 μg/gFW,分别比对照组提高了48%和32%.结论:真菌及其诱导子能改变长春花悬浮培养细胞的态势,导致细胞代谢结构的改变,使生物碱的产量提高.     

番石榴中结合多酚碱水解与酸水解法提取工艺优化的比较

以红心番石榴果肉的冻干粉末为实验材料,先提取游离多酚,剩下的残渣分别采用酸水解和碱水解法提取结合多酚。两种方法在单因素实验基础上,选择浓度、温度、时间这3个影响因素进行响应面设计。采用Design Expert 8.0.6.1软件进行响应面试验设计及数据分析,结果表明温度对结合多酚的得率影响显著,而且酸水解比碱水解获得的结合多酚多。最终确定为:碱水解最佳提取条件:Na OH浓度为7.24 mol/L,温度98.22℃,时间24.88 h,此条件下结合多酚得率为1.238%;酸水解最佳提取条件:HCl浓度为4.05 mol/L,温度94.87℃,时间29.95 h,此条件下结合多酚得率为2.002%。