昆虫呼吸系统的超微结构

<正> 本文用扫描、透射电子显微镜和“冰冻复型及蚀刻”方法,观察了数种昆虫的呼吸系统的超微形态,以及它们与各组织器官的关系。文中对昆虫气孔向体内气管的分枝情况,气管分枝伸入胃盲囊内,端细胞伸入中肠环肌层内,以及用冰冻复型及蚀刻方法观察到气管的超微结构等。呼吸系统承担复杂的呼吸代谢,以维持生命和繁衍种族。 气管、气囊是网状遍布全身,承担体内组织与外界交换气体的任务。虫体利用食入的养料产生能量进行呼吸代谢,使虫体能生长发育变态和生殖。因此,呼吸代谢是维持生命和繁衍种族的基础,这一切的进行是由结构简单的气孔、气囊和气管来承担的。水生昆虫体内有完整的气管系统,但无气孔开口于外,仅在皮细胞层下面有很多微气管群,CO_2和O_2即经过体壁的薄膜进行交换的;陆生昆虫的气门、气管系统遍布全身,通过气孔直接交换气体;寄生昆虫的气体交换,则在虫体与寄主的血液间通过体壁进行。     

用冷冻复型法制备生物样品

冷冻复型法作为电镜的样品制备方法及研究膜结构的手段目前已经有许多单位在开展,但是,操作进程中许多小问题掌握不好都影响成功率。根据我们的经验,认为有如下几个问题:     

人糖皮质激素β受体基因正、反义重组逆病毒载体构建

为研究人糖皮质激素受体hGRβ亚型的功能及其作用机制,用L-PCR方法从人胚脑表达文库内扩增hGRβ基因全长约2．4kb的cDNA片段,克隆至pGEM-Teasy载体;经限制性核酸内切酶谱证实后,进一步将其亚克隆至逆病毒载体pLXSN中,并经测序证实,为进一步的基因转移和基因治疗研究准备材料。     

排除法PCR加变性梯度凝胶电泳鉴别未知基因

通过鉴别未知的cry4亚组基因来确定排除法PCR加变性梯度凝脉电泳新方法。方法：应用排除法PCR的组基因和亚组基因引物扩增杀蚊毒素基因,cry4。这些引物是根据已知的cyr4基因的共有或特有DNA片段来设计的。组基因引物扩增产物被用于变性梯度凝胶电泳。平行变性梯度凝胶是由8％的聚丙烯酰胺加上20％到80％的变性剂组成。结果：已知的和未知的cry4来组基因被组基因引物扩增的产物在变性梯度凝胶电泳被分离开。尽管它们之间仅有两个碱基对不同（T在位置224和G在位置394）。应用组基因和亚组基因引物扩增,新发现的基因可被分类到次亚组基因水平。从5个苏云金芽孢杆菌亚菌中发现三个未发表的cry4亚组基因。结论：排除法PCR加变性梯度凝胶电泳是一个高度敏感、特异性和可靠性强的新方法,可用于鉴别各种未知的亚组基因。     

一新型SOX9基因致病性突变:R178L(G→T)

人SOX9基因同时参与胚胎骨骼形成和睾丸发育调控．对一例多发畸形的早产女性胎儿进行SRY基因扩增和SOX9基因突变分析，发现其具有男性特异性SRY基因，且SOX9基因发生R178L(G→T)的突变，提示该病例为SOX9基因突变导致的广泛性先天发育不良合并常染色体男一女性性反转．该突变此前未见报道，这也是中国人群中首次报道致病性SOX9基因突变。     

正义、反义MCP-1基因逆转录病毒载体重组质粒的构建和包装

为构建含单核细胞趋化蛋白-1(Monocytechemoattractantprotein-1,MCP-1)基因的重组逆转录病毒pLXSN/MCP-1质粒.用RT-PCR技术从大鼠系膜细胞中扩增出MCP-1全长DNA,将其与Pgem-TE连接,用限制性内切酶EcoRⅠ对pTE-MCP-1和逆转录病毒质粒pLXSN分别进行酶切.在T4连接酶的作用下,构建重组逆转录病毒质粒pLXSN/MCP-1.经BglⅡ,XhoⅠ酶切鉴定MCP-1在质粒中的方向,用脂质体介导的方法把重组质粒DNA转染进入包装细胞PA317中,经过G418筛选出抗性克隆.通过NIH3T3细胞测定病毒液的病毒滴度.结果证实经过RT-PCR技术从大鼠系膜细胞中扩增出MCP-1全长DNA与所需的大小一致.重组质粒经酶切分析与预期的结果一致.G418筛选出抗性克隆,能稳定合成并分泌重组逆转录病毒颗粒.NIH3T3细4胞测定病毒滴度为17×10cfu/mL.     

磁场处理水引起水部分理化性质的变化

生物体、生物组织富含水分,人体内水分占70％以上,人体的生理、病理过程都和水有关。磁场对生物的各种效应有的是通过对水的作用而发生的。研究磁处理水对研究磁生物效应机制具有重要意义。对于磁处理水的理化性质已有过报导,但结果不尽相同,甚至相反。本文对磁处理水的表面张力系数,