柠条锦鸡儿CkGR基因克隆及功能分析

通过RACE技术从柠条锦鸡儿中克隆得到一个新的GR基因,全长2 122 bp,包括5'非翻译区(5'-UTR)57 bp,3'非翻译区(3'-UTR)415 bp,开放阅读框(ORF)1 650 bp,编码550个氨基酸,推测的蛋白质分子量为59.2k Da,理论等电点为8.2,命名为Ck GR。Ck GR与鹰嘴豆Ca GR的同源性较高,为90.1%。利用染色体步移法克隆得到Ck GR起始密码子ATG上游648 bp的启动子序列,Plant CARE软件分析表明,该序列具有启动子的基本元件CAAT-box和TATA-box以及多种与逆境胁迫相关的顺式调控元件。实时荧光定量PCR分析表明,Ck GR在柠条锦鸡儿的根、茎和叶中均有表达,没有组织特异性;Ck GR的表达受低温、高盐和干旱胁迫的诱导,表明Ck GR在柠条锦鸡儿适应低温、高盐和干旱胁迫的过程中发挥作用。     

肠道湿热泄泻和寒湿泄泻“同病异治”的物质基础研究

目的 建立湿热、寒湿泄泻大鼠模型，采用白头翁汤与理中汤治疗湿热、寒湿泄泻模型大鼠，分析湿热、寒湿不同证型泄泻大鼠临床症状、细胞密度、氧化应激等指标的差异，为探索泄泻“同病异治”的治疗特色提供客观依据。方法 将SD大鼠分为：空白组(CON组);湿热泄泻模型组(DHD组);湿热+白头翁汤组(DHB组);湿热+理中汤组(DHL组);寒湿泄泻模型组(CDD组);寒湿+理中汤组(CDL组);寒湿+白头翁汤组(CDB组)7个组。番泻叶+湿热、寒湿环境建立湿热、寒湿泄泻大鼠模型，采用白头翁汤和理中汤进行“以方测证”研究，记录各组大鼠的临床症状。HE染色观察脾组织病理学变化。AB-PAS染色观察结肠、回肠中杯状细胞，回肠中潘氏细胞密度变化。Western Blot检测大鼠结肠组织Nrf2、HO-1、AQP-4的表达量。结果 (1)湿热、寒湿泄泻大鼠模型成功建立，湿热泄泻大鼠临床症状更明显。(2)白头翁汤、理中汤可有效改善湿热、寒湿泄泻大鼠的临床症状与脾病理组织变化。(3)泄泻大鼠肠杯状细胞、潘氏细胞密度均降低(P<0.01),湿热泄泻大鼠更明显。白头翁汤、理中汤可分别提高湿热、寒湿泄泻大鼠肠杯状...     

苦豆子对脂多糖诱导的RAW 264.7细胞炎症的抗炎作用和机制研究

以RAW 264.7细胞为研究对象，探究苦豆子对脂多糖诱导的RAW 264.7细胞炎症的抗炎作用和机制。采用水煎煮、水超声、75%乙醇回流和75%乙醇超声分别制备苦豆子水煎煮提取物(water decocting extract, WDE)、水超声提取物(water ultrasonic extract, WUE),75%乙醇回流提取物(ethanol reflux extract, ERE)和75%乙醇超声提取物(ethanol ultrasonic extract, EUE),D101大孔树脂吸附法制备苦豆子总生物碱提取物(total alkaloids extract, TAE)和总黄酮提取物(total flavonoids extract, TFE),水提醇沉法制备苦豆子总多糖提取物(total polysaccharides extract, TPE),通过酸性染料比色法、NaNO₂-Al(NO₃)₃-NaOH分光光度法、苯酚-硫酸法分别测定TA、TF和TP的含量，并采用正交法初步设计TAE、TFE和TPE ...