人二倍体甲型肝炎灭活疫苗纯化技术的研究

研究人二倍体细胞甲型肝炎灭活疫苗的纯化方法。 经人二倍体细胞培养的病毒液经澄清、浓缩后制成粗制疫苗,采用Sephacryl S 400、DEAE Sepharose FF、Sephadex G 10等柱层析手段进行纯化。试验证明甲型肝炎病毒粗制疫苗经以上3种层析柱纯化后,抗原组分单一,收率达到85%,杂蛋白去除率达85%以上,蛋白总含量、牛血清残留量各项指标符合中国药典要求,适用于大规模生产。     

气相色谱法检测水痘减毒活疫苗原液中二甲基亚砜残留量

目的 建立测定水痘减毒活疫苗原液中二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide, DMSO)残留量的气相色谱法,并进行方法学的验证和初步应用。方法 采用气相色谱法检测,对色谱柱、柱温、分流比以及供试品预处理方法进行了优化,并对优化后的方法进行系统适用性和专属性、线性和范围、准确度和精密度、定量限和检测限、耐用性的方法学验证。结果 色谱柱使用DB-624(30 m×0.53 mm, 3.00μm)毛细管柱,以氮气为载气,进样口温度设定为250℃,FID检测器温度设定为270℃,柱温为120℃,分流比为5∶1。供试品在检测前采用乙腈沉淀蛋白的预处理方式(体积比1∶9～1∶19)以去除其中的干扰杂质。方法学验证结果显示,系统适用性和专属性良好,DMSO色谱峰与杂质分离良好,在50～1 000μg/mL范围内线性关系良好(R²=0.999 9)。检测限为20μg/mL,定量限为50μg/mL;准确度结果均在90%～110%之间,精密度的RSD均<10%。水痘减毒活疫苗原液中的DMSO残留量均未检出。结论 建立的气相色谱法能稳定、准确、快速地检测水痘减毒活疫苗原液...     

碱性羟胺、弱碱和乙酸水解奇异变形杆菌LPS抗原及其活性的影响

采用碱性羟胺、弱碱、乙酸水解奇异变形杆菌LPS抗原,研究不同方式对小鼠活性的影响。检测结果表明,与水解前对比三种方式均能降低LPS抗原内毒素含量,即从2 500×104EU/mL降低至(250~2.5)×104EU/mL;热源性检测表明对家兔体温几乎无影响;但免疫原性结果表明ED50 LPSED50 Acid-LPS+Al(OH)3ED50 Alkaline-LPS+Al(OH)ED350 HA-LPS+Al(OH),3毒性结果为LD50 HA-LPSLD50 Alkaline-LPSLD50 LPSLD50 Acid-LPS。因此,经过乙酸(体积分数2%)或0.1 mol/L弱碱(体积分数2%)水解,能够显著降低内毒素含量及热源性,并保持其生物活性,使之成为有效的候选疫苗组分,用于预防或治疗大面积烧伤及术前或术后感染。