内皮特异性miR-342-5p敲除致小鼠内皮损伤和心血管功能紊乱

摘要 目的：我们前期研究发现有氧运动促进内皮细胞等分泌miR-342-5p,miR-342-5p通过外泌体富集至心肌细胞后发挥心脏保护作用。本研究的主要目的是明确内皮来源的miR-342-5p在心血管功能调控中的作用。方法：我们构建了内皮特异性miR-342-5p敲除小鼠,通过心脏超声检测和血管收缩舒张功能检测观察了该小鼠心血管功能的变化;培养血管内皮细胞,通过对细胞存活率检测、相关蛋白的表达检测等方法对miR-342-5p发挥心血管保护作用的机制进行探究。结果：内皮miR-342-5p敲除致小鼠运动能力降低、心脏收缩功能不变,但舒张功能紊乱。且内皮miR-342-5p敲除致小鼠血管口径变小、微血管密度降低和血管内皮功能紊乱。内皮miR-342-5p敲除致小鼠心血管功能紊乱的机制与其引起的内皮细胞损伤有关。敲低miR-342-5p致内皮细胞中caspase 9水平增加,引起内皮细胞活性降低和凋亡增加。结论：这些结果进一步证实了内皮细胞来源的miR-342-5p在心血管功能中的重要作用,提示miR-342-5p在防治心血管疾病中的潜在应用。     

抑制谷氨酰胺代谢减轻血管紧张素Ⅱ诱导的心肌纤维化

本文旨在探讨心脏成纤维细胞(cardiac fibroblasts, CFs)谷氨酰胺(glutamine, Gln)代谢在高血压所致心肌纤维化中的作用及机制。用微渗透泵给予C57BL/6J小鼠血管紧张素Ⅱ (angiotensin Ⅱ, Ang Ⅱ, 1.6 mg/kg per d)诱导心肌纤维化,用免疫组织化学法和Western blot检测心肌组织谷氨酰胺酶1 (glutaminase 1, GLS1)的表达。小鼠腹腔注射GLS1抑制剂BPTES (12.5 mg/kg)以抑制Gln代谢,用Masson染色法观察心肌纤维化程度,用RT-qPCR和Western blot检测心肌组织Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达变化。Sprague-Dawley (SD)大鼠乳鼠CFs在有/无Ang Ⅱ (0.4μmol/L)刺激下接受Gln 4 mmol/L或BPTES (5μmol/L)处理。用划痕实验和CCK-8法分别检测CFs迁移和增殖,用RT-q PCR和Western blot检测CFs中GLS1、Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达变化。在Ang Ⅱ和BPTES处理的条件下,给予CFs 2 mmol/L ...