4种饮用水对小鼠固有免疫及T细胞亚群的影响

为了探讨4种饮用水对小鼠固有免疫及T细胞亚群的影响,本研究将ICR小鼠按体重随机分为4组,分别为纯水组、过滤水组、自来水组和矿泉仿生水组,每组20只,雌雄各半,共4批。各组小鼠自由饮水摄食90 d,分别进行碳廓清实验和腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验,应用LDH法检测NK细胞活性,同时测定胸腺和脾脏指数,应用血细胞分析仪检测外周血白细胞和中性粒细胞计数,采用流式细胞术检测T细胞亚群CD4+和CD8+百分比,并计算CD4+/CD8+比值。研究显示,各组小鼠的体重增长、胸腺指数、脾脏指数、吞噬指数α、外周血白细胞计数、中性粒细胞计数、小鼠脾细胞表面标志物CD4+百分比和CD8+百分比差异均无统计学意义(p0.05);过滤水组腹腔巨噬细胞吞噬指数、NK细胞活性高于纯水组和矿泉仿生水组(p0.05);自来水组NK细胞活性高于过滤水组、纯水组和矿化水组(p0.05);过滤水组吞噬率高于矿泉仿生水组(p0.05);自来水组、过滤水组、矿泉仿生水组的小鼠CD4+/CD8+比值均高于纯水组(p0.05);其余各组间无统计学差异。本研究表明,长期饮用过滤水对小鼠固有免疫有一定的促进作用,此外,过滤水和矿泉仿生水对小鼠T淋巴细胞亚群CD4+/CD8+比值有提高作用。     

一株产L-谷氨酸氧化酶的链霉菌分离鉴定及酶学性质分析

采用4-氨基安替吡啉/苯酚显色反应,从土壤中分离出产酶菌株Str-6.通过菌株形态、培养特征和生理生化试验、16S rDNA序列分析,初步将其鉴定为山丘链霉菌.其初步酶学性质研究表明,该菌株所产L-谷氨酸氧化酶为胞外酶,28℃培养36 h时产酶酶活达到0.023 1 U/mg蛋白,对L-谷氨酸具有较强的底物专一性.酶作用最佳反应pH为6.0,反应温度为35℃.在pH6.0-7.0和温度35-40℃下具有较好的稳定性.     

L-谷氨酸氧化酶的克隆表达、纯化及酶学性质研究

为提高微生物产L-谷氨酸氧化酶水平,将Streptomyces sp.X-119-6的L-谷氨酸氧化酶基因(LGOX)与表达载体pET28a连接,导入E.coli BL21(DE3),实现LGOX的高效表达.采用HisTrapTM FF亲和层析柱对重组L-谷氨酸氧化酶进行纯化,并对纯酶的酶学性质进行了研究.结果表明:在IPTG终浓度为0.4 mmol/L下,30℃诱导6h,可以获得比酶活为1.1 U/mg的粗酶液;重组酶的最适反应温度和pH分别为37℃和5.O;km值为2.12 mmol/L,Vmax为1.06μmol/min·mg,对L-谷氨酸具有专一性;具有良好的应用前景.