双胸蚓纤溶酶的纯化及性质

 用硫酸铵分段盐析、超滤膜分级分离及DEAE-纤维素、Sephadex A-25和Sephadex G-50三种柱层析方法从双胸蚓组织的粗提取液中分离纯化出一种纤溶酶,分子量为29kD,由一条肽链组成。此晦具有强烈的溶解纤维蛋白的作用,对家兎实验性血凝块也具有明显的溶解作用。此酶的最适pH为8.0,在pH7.6～8.4之间活力相差不到2％;酶在PH4.7—11.0范围内稳定;酶作用的最适温度为57℃;此酶热稳定性较好,于25～50℃保温3小时,酶活力基本不变,60℃时,活力保留65％。金属离子Na~(+)、K~(+)、Mg~(2+)等可提高此酶的活力,而Hg~(2+)、Ca~(2+)等金属离子对此酶有不同程度的抑制作用。     

双胸蚓胶原酶的萃取、纯化、性质及化学组成的研究

从双胸蚓组织中分离出水解胶原的酶(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)。其中酶Ⅱ是一不具亚基结构的大分子糖蛋白,酸性氨基酸含量高于碱性氨基酸,缺乏胱氨酸。最适pH6～7,最适温度35～45℃,80℃10分钟酶失活。Ca~(++)、Mg~(++)、Ba~(++)、Mn~(++)促进酶活性,Co~(++)、Hg~(++)、EDTA、巯基化合物及正常人血浆抑制酶活性。胶原酶解产物在PAGE图谱上表现为泳动较快的新带。