表没食子儿茶素没食子酸酯对高脂饮食大鼠脂肪组织TNF-α表达的影响及意义

目的 探讨表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对高脂饮食大鼠脂肪组织中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）表达的影响及其与胰岛素敏感性的相关性.方法 将30只SPF级雄性SD大鼠随机分为正常饮食组（ND组,n=10）和高脂饮食组（HFD组,n=20）.喂养16w,当两组大鼠体质量出现显著差异后（P〈0.05）,将HFD组按随机区组原则分为单纯高脂组（HFD组,n=10）和EGCG干预组（HFD＋0.32%EGCG,EGCG组,n=10）.干预16w.留取血清及附睾周脂肪组织.检测每组大鼠空腹血糖（FBG）、胰岛素水平（FINS）及游离脂肪酸（FFAs）,并计算胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）;应用Real-time PCR及Western blot方法检测附睾周脂肪组织中TNF-α表达水平.结果 （1）与HFD组相比,EGCG组FINS水平显著下降[分别为（13.83±0.79）mIU/l vs.（31.71±3.61）mIU/l,P〈0.05];HOMA-IR值下降[分别为（3.36±0.31） vs.（7.59±0.99）,P〈0.05];FFAs值亦明显下降[分别为（0.38±0.08）mmol/l vs.（0.81±0.11）mmol/l,P〈0.05];三组大鼠FBG水平无明显统计学差异（P〉0.05）.（2）与ND组相比,HFD组脂肪组织中TNF-αmRNA水平显著升高[分别为（0.0033±0.00070）vs.（0.0010±0.00008）,P〈0.01];而EGCG组较HFD组则明显下降[分别为（0.0018±0.00037）vs.（0.0033±0.00070）,P〈0.05];同时,EGCG组TNF-α蛋白表达量低于HFD组[分别为（0.42±0.09）vs.（0.67±0.09）,P〈0.05];（3）EGCG组与ND组无明显差异（P〉0.05）.结论 EGCG改善高脂饮食大鼠胰岛素敏感性可能与减轻脂肪组织TNF-α介导的炎症状态相关.     

酒精成瘾诱发的假性库欣综合征一例报道及文献复习

目的报道1例由慢性酒精成瘾诱发的假性库欣综合征,以扩展临床医师对酒精危害及其导致疾病谱的认识。方法对本院发现的1例假性库欣综合征病例的病因进行分析,其临床特点进行对比观察,国内外相关文献报道进行复习总结。结果患者入院后发现皮质醇增多,小剂量地塞米松抑制试验不被抑制,大剂量地塞米松抑制试验被抑制。垂体、肾上腺及其他部位都未发现占位性病变。戒酒后20d皮质醇水平恢复正常,规律随访半年,皮质醇水平及节律无明显异常。诊断为假性库欣综合征。文献复习结果筛选出65篇相关病例报道,对65篇文献报道的慢性酒精成瘾诱发的假性库欣综合征与库欣综合征临床症状和体征进行分析总结,结果只在肌肉萎缩及乏力和中心性肥胖等方面发现了微细差别。结论长期大量饮酒可通过多种机制诱发假性库欣综合征,与真性皮质醇增多症的鉴别比较困难,临床上需结合患者的临床表现、体格检查以及实验室检查结果与库欣综合征进行鉴别,其中重要的方法是通过观察检测戒酒后的一些生化学检查指标进行鉴别和确诊,以防造成误诊而致过度医疗。     

一例复合杂合性突变所致多发性内分泌腺瘤病1型的临床表现与基因型

目的分析1例多发性内分泌腺瘤病1型(MEN1)患者的临床特征和基因型,以期提高临床医生对本病的认识与诊断的准确性。方法分析患者病史、临床表现、实验室检查及影像学资料,并对MEN1基因进行扩增与测序。结果发现1例临床症状符合典型的多发性内分泌腺瘤病1型患者,基因测序鉴定本例患者的MEN1基因第9号外显子内存在同义突变,为c.1818位T→C(rs540012),第10号外显子存在两处复合杂合性突变,分别是c.2098位C→T(R527X,rs104894261),造成第527位氨基酸精氨酸(CGA)突变为终止密码子TGA;和c.2140位G→A(A541T,rs2959656),造成第541位丙氨酸(GCA)突变为苏氨酸(ACA)。结论本例患者表现了典型的多发性内分泌腺瘤病1型的临床症状与体征,遗传学分析进一步验证了患者携带MEN1基因的致病突变,提示根据临床表现结合基因学确诊本病的可靠性。     

芯片分析自发恶性转化的大鼠骨髓间充质干细胞的基因表达谱

为解析骨髓间充质干细胞(MSCs)自发恶性转化的遗传学基础, 探讨其临床可用性和安全性。采用密度梯度离心法和贴壁筛选法分离大鼠MSCs, 流式细胞仪分析细胞同源性, 体外培养6个月后获得自发恶性转化的MSCs。应用基因芯片分析自发恶性转化的MSCs中差异表达的基因,进一步采用实时定量RT-PCR验证芯片分析结果。MSCs发生自发恶性转化后, 有44条差异表达基因, 其中21条基因表达上调, 23条基因表达下调。经实时定量RT-PCR检测差异表达基因结果与芯片分析结果一致。Wnt、SHH、Notch、TGFb/BMPs等信号转导通路上的若干基因在MSCs自发恶性转化中起到重要作用。     

皮质醇结合球蛋白的生理功能及其编码基因突变

皮质醇结合球蛋白（CBG）对皮质醇具有高亲和力,在调节血液中的皮质醇水平,转运孕酮,参与炎症反应等过程发挥作用。目前已发现的影响CBG的基因突变或单核苷酸多态性有9种,往往影响CBG水平或是CBG与皮质醇的结合能力,CBG缺陷先证者多表现为慢性疲乏,往往伴随着低血压、高血压或者是肥胖,但并不是所有CBG缺陷患者均有上述症状,由于病例报道数量较少,突变与症状的相关性很难确定,仍需更多针对CBG的遗传学研究。     

高雄激素血症患者非经典型21-羟化酶缺陷症与多囊卵巢综合征的鉴别

目的探讨非经典型21-羟化酶缺陷症(21-OHD)与多囊卵巢综合征(PCOS)的鉴别要点,为临床准确的诊断和及时的治疗提供可靠的临床及实验室依据。方法收集2014年1月至2015年8月在我院内分泌科门诊及住院患者中女性高雄激素血症病例,分析其临床资料的特点,并进行CYP21A2基因分析。结果共收集到合乎纳入标准患者44例,其中包括7例非经典型21-OHD和37例PCOS。实验室检测数据表明,非经典型21-OHD患者的17-羟孕酮、孕酮与PCOS患者相比明显增高,差异具有统计学意义(P值分别为0.011、0.012),促肾上腺皮质激素、皮质醇、睾酮、游离睾酮、雄烯二酮、促黄体生成素、卵泡刺激素、催乳素等指标的差异不具有统计学意义。结论非经典型21-OHD临床表现与PCOS很相似,但治疗方法截然不同,进行肾上腺相关激素测定,尤其是17-羟孕酮的测定,并结合基因检测,有助于这两种疾病的鉴别,从而使临床医师对治疗方案做出正确选择。     

麦没食子儿茶素没食子酸酯对TNF-α诱导的内皮细胞中PAI-1表达的影响及机制研究

目的探讨绿茶的主要成分麦没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)在血管内皮细胞中对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)所诱导的纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)表达的影响及机制。方法利用人脐静脉内皮细胞体外培养方法,分别与TNF-α和/或EGCG孵育,运用蛋白免疫印迹方法检测内皮细胞中磷酸化细胞外调节蛋白激酶1/2(p-ERK1/2)和肿瘤坏死因子受体1(TNFR1)蛋白表达,应用酶联免疫吸附法方法检测细胞液中PAI-1水平。结果 TNF-α以浓度依赖和时间依赖方式增加内皮细胞中PAI-1的表达。EGCG可抑制TNF-α所诱导的PAI-1的表达,并可抑制ERK1/2磷酸化。TNF-α的刺激可使TN-FR1表达明显减少,而EGCG可抑制这一作用。结论 EGCG可能通过抑制ERK1/2的磷酸化,从而抑制TNF-α所诱导的PAI-1的表达,同时可减少TNF-α对TNFR1的抑制作用,在改善肥胖、胰岛素抵抗及相关心血管疾病中起着重要作用。     

Dll4蛋白在高脂饮食喂养大鼠脂肪组织炎症中的作用

目的 探讨Delta-like ligand 4（Dll4）蛋白在高脂饮食喂养大鼠脂肪组织中的表达及其与脂肪组织炎症的关系.方法 将20只SPF级雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为正常饮食组（SD,n=10）和高脂饮食组（HFD,n=10）喂养16w后,应用免疫组化及Western blot方法检测脂肪组织中Dll4及炎症通路NF-κB磷酸化、IL-6的表达.结果 免疫组化结果显示,HFD组Dll4表达量显著升高（P〈0.001）;Western blot结果与免疫组化结果相一致,Dll4蛋白表达量是SD组的1.34倍（P〈0.01）;磷酸化核转录因子NF-κB表达水平升高,HFD组为SD组的2.03倍（P〈0.01）;HFD组炎症细胞因子IL-6水平明显升高,为SD组的3.02倍（P〈0.01）.结论 高脂饮食可增加脂肪组织中Dll4蛋白表达,促进了脂肪组织中炎症的发生.     

相同CYP21A2基因突变(I2g)致3种不同表型的21-羟化酶缺陷症

目的分析3例21-羟化酶缺陷症(21-OHD)患者的病史、临床表现、实验室检查和基因突变的关系。方法通过患者病史、临床表现、实验室检查及影像学资料诊断21-OHD,通过对CYP21A2基因进行分析,寻找致病突变位点。结果 3名患者均确诊为21-OHD。基因测序发现CYP21A2基因均存在相同致病基因突变(I2g),但病史、临床表现及激素测定结果提示3例患者分别为失盐型、单纯男性化型、非经典型。结论相同CYP21A2基因突变(I2g)可存在于不同表型的21-OHD中,相同基因不同表型的机制值得进一步研究。     

钠／碘同向转运体在人不同组织学分型胃癌中的表达

目的研究钠／碘同向转运体（sodium-iodide symporter,NIS）在人不同组织学分型胃癌组织中的表达,分析NIS表达与胃癌组织学分型的关系。方法选取于中国医科大学附属第一医院肿瘤外科行手术治疗的180例患者的胃癌组织为研究对象。依据胃癌的组织学分型分为6组,其中乳头状腺癌30例,管状腺癌30例,低分化腺癌30例,黏液腺癌30例,印戒细胞癌30例,未分化癌30例。选取上述180例患者的癌旁组织及30例慢性胃炎患者的胃组织作为对照。采取免疫组织化学SP法对上述组织的石蜡切片进行染色。结果在人胃癌组织、人胃癌旁组织及人慢性胃炎组织中,NIS阳性细胞率分别为10．6％（19／180）、28．3％（51／180）和90％（27／30）。人胃癌组织与人胃癌旁组织相比（P〈0．01）、人胃癌组织与人慢性胃炎组织相比（P〈0．01）、人胃癌旁组织与人慢性胃炎组织相比（P〈0．01）,NIS阳性细胞率均具有显著统计学差异。在人乳头状腺癌、管状腺癌、低分化腺癌、黏液腺癌、印戒细胞癌及未分化癌中,NIS阳性细胞率分别为30％（9／30）、10％（3／30）、13．3％（4／30）、6．7％（2／30）、3．3％（1／30）和0（0／30）。人乳头状腺癌与人黏液腺癌相比（P〈0．05）、人乳头状腺癌与人印戒细胞癌相比（PGO．01）以及人乳头状腺癌与人未分化癌相比（P〈0．01）,NIS阳性细胞率均具有统计学差异。在人慢性胃炎组织及人胃癌旁组织中,NIS仅表达于胃黏膜细胞的细胞膜上,而在人胃癌组织中,NIS在癌细胞膜有表达,在细胞质也有较明显的表达。结论在人胃癌组织、癌旁组织、慢性胃炎组织中,NIS阳性细胞率依次增高。在本研究人各种组织学分型的胃癌中,随着胃癌恶性程度的增高,NIS表达呈现出减少的趋势。人胃癌组织NIS在癌细胞的细胞膜和细胞质均有表达,而?