中华倒刺鲃TRPV1基因的克隆及对高温和LPS刺激的响应

为探讨鱼类瞬时受体电位香草酸亚型1(TRPV1)的功能, 研究以本土淡水养殖鱼类中华倒刺鲃Spinibarbus sinensis为实验材料, 克隆其TRPV1基因, 开展生物信息学分析, 预测其蛋白结构, 并检测其组织表达谱。克隆所得到的TPRV1基因片段长2023 bp。该序列所编码的蛋白具有6次跨膜结构域、锚蛋白重复结构域和离子转运结构域。中华倒刺鲃TRPV1基因在脑的各部分区域及肠、肾等组织均有表达。为检验TRPV1基因的表达是否受到温度变化的调控, 实验鱼被分为磷酸缓冲液(PBS)和脂多糖(LPS)组, 并分别于不同温度(25℃和35℃)处理1h、6h和24h后, 检测TRPV1在间脑和延脑的表达量变化。结果显示温度变化和LPS处理会引起该基因在间脑和延脑表达量的明显变化, 但两种组织的变化模式相反, 且具有时间特异性。综上, 中华倒刺鲃TRPV1的表达具有温度和体内炎症的敏感性, 并可能具有组织和时间的特异性。