小空间细颗粒饲养对青少年恒河猴屈光发育及玻璃体腔长度变化的影响

采用小空间细颗粒饲养方法研究长时间近距离注视对青少年恒河猴屈光状态发育和玻璃体腔长度变化的影响. 将12只1.5~2.0岁健康恒河猴随机分为三组, 每组四只. 其中A组和B组每天分别置于视觉封闭的猴笼内饲养8和4 h, 同时将食物处理成细小颗粒状置于代谢盘中(需仔细翻找才能获得). 每3个月进行一次眼轴长度、玻璃体腔长度、屈光状态和角膜曲率测量, 总观察周期为18个月. 采用对照t检验进行数据分析, P<0.05有显著性意义. 结果显示, 观察期间A组眼轴和玻璃体腔长度增长最为显著, 屈光状态明显向近视化方向发展; B组眼轴和玻璃体腔长度也有明显增长, 但屈光度无明显变化; C组眼轴和玻璃体腔长度增长最为缓慢, 屈光度轻度向远视化方向发展. 观察期间各组的角膜曲率均无明显改变. 研究结果表明, 强制性近距离注视能够加快青少年恒河猴玻璃体腔长度的增长, 导致单纯性近视的发生与发展, 是建立近距离工作相关的灵长类近视眼动物模型的可行性方法.     

诱导胚胎干细胞向角膜上皮细胞分化的实验研究

探索胚胎干细胞在表层角膜缘基质诱导下向角膜上皮细胞分化的可能性. 体外培养带GFP标记的 ES-D3细胞, 并利用视黄酸进行预诱导, 然后将预诱导后的细胞接种在表层角膜缘基质上, 细胞融合形成单层后, 随机分为3组进行研究: 第1组传代后直接进行检测; 第2组在 气-液界面上培养10天, 然后植入裸鼠皮下以进行体内诱导; 第3组作为对照组, 不给予GFP-ES-D3细胞特殊诱导条件, 细胞自由分化. 诱导分化的细胞植入裸鼠皮下体2周后没有畸胎瘤形成. 诱导分化的细胞呈现上皮样外观, 体内诱导组和体外诱导组免疫组织化学染色均检测到CK3, P63和PCNA表达阳性, 电子显微镜检查可见两组细胞表面都有微绒毛和细胞间紧密连接形成. 实验对照组部分细胞脱落和死亡, 大部分表现神经样细胞的树突样外观, 小部分未死亡的贴壁细胞呈多态性, 这些结果表明胚胎干细胞在特定条件下经表层角膜基质诱导能够分化为角膜上皮细胞. 胚胎干细胞诱导分化有可能为眼表重建和组织工程化角膜的构建提供上皮种子细胞.     

诱导胚胎干细胞向角膜上皮细胞分化的实验研究

探索胚胎干细胞在表层角膜缘基质诱导下向角膜上皮细胞分化的可能性.体外培养带GFP标记的ES-D3细胞,并利用视黄酸进行预诱导,然后将预诱导后的细胞接种在表层角膜缘基质上,细胞融合形成单层后,随机分为3组进行研究:第1组传代后直接进行检测;第2组在气-液界面上培养10天,然后植入裸鼠皮下以进行体内诱导;第3组作为对照组,不给予GFP-ES-D3细胞特殊诱导条件,细胞自由分化.诱导分化的细胞植入裸鼠皮下体2周后没有畸胎瘤形成.诱导分化的细胞呈现上皮样外观,体内诱导组和体外诱导组免疫组织化学染色均检测到CK3,P63和PCNA表达阳性,电子显微镜检查可见两组细胞表面都有微绒毛和细胞间紧密连接形成.实验对照组部分细胞脱落和死亡,大部分表现神经样细胞的树突样外观,小部分未死亡的贴壁细胞呈多态性,这些结果表明胚胎干细胞在特定条件下经表层角膜基质诱导能够分化为角膜上皮细胞.胚胎干细胞诱导分化有可能为眼表重建和组织工程化角膜的构建提供上皮种子细胞.