稻瘟病菌致病突变体的REMI诱变与鉴定

以水稻“爱知旭”(Aichi—aShahi)为寄主,将带选择标记的质粒pCSN43和pBF101为外源DNA,利用限制酶诱导整合(REMI)这种新方法转化稻瘟病菌原生质体,从筛选到的数百个转化体中分离出3个与致病能力密切相关的突变体R2H65、R2H69和R281565。其中,R2H65和R2H69只产生畸形分生孢子,分生孢子的发育和附着胞的形成以及黑色素的合成均受到极大影响,致病性测试证明完全丧失致病能力;R281565的许多表型与野生型的相似,但致病能力却大大降低。     

利用标记基因选配褐壳蛋鸡配套杂交亲本

应用本实验室研制的抗鸡红细胞抗原单价血清(4个位点, 14个等位基因)和DNA指纹技术,对我们组配成功的一个褐壳蛋鸡配套系统的5个亲本进行了群体遗传学分析。结果表明,由标记基因测定所提供的亲本品系遗传差异的大小, 与这些品系实际杂交效果的优劣相一致,证实了标记辅助选种方法有的效性。     

DNA指纹技术的应用及局限性

DNA指纹图谱是一种在一单一实验中可检测出大量DNA位点差异性的分子生物学技术。自1985年Jeffeys et al,从人的肌红蛋白位点获得第一个多位点探针并用于检查人类基回的VNTRs以来,由于各种高水平探针如微卫星探针、寡聚核苷酸探针的相继问世,使DNA指纹技术在动植物科学研究、遗传疾病的诊断、基因图谱的绘制,遗传标记的寻找及法医学等方面得到广泛应用,充分表现了此技术的优越性。当然此技术还需进一步完善。     

利用限制性内切酶诱导整合（REMI）获得稻瘟病菌突变体

限制性内切酶诱导整合（ＲｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎＥｎｚｙｍｅ－ｍｅｄｉａｔｅｄＩｎｔｅｇｒａｔｉｏｎ,简称ＲＥＭＩ,下同）已被成功用于创造随机插入突变和提高转化频率。用限制酶消化的线状质粒ｐＣＳＮ４３或ｐＢＦ１０１,并加一定量的同种限制酶,转化稻瘟病菌（Ｍ．ｇｒｉｓｅａ）的原生质体后,得到约４５０个转化子。对一些表型进行测试后,获得两个分生孢子形态突变体。与野生型相比较,突变体的分生孢子细而且长,呈棒形。ＲＥＭＩ非常有用,因其能提高转化频率,较容易地获得期望数目的转化子;限制性内切酶可随机切割寄主染色体,便于插入线状质粒,导致基因突变。可根据异常表型判定基因的功能,根据插入质粒克隆该基因。     

慈菇蛋白酶抑制剂通过花粉管途径对小麦的导入及转基因植株分析

慈菇蛋白酶制剂（ＡｒｒｏｗｈｅａｄＰｒｏｔｅｉｎａｓＩｎｈｉｂｉｔｏｒ,ＡＰＩ）是来源于慈菇（Ｓａｇｉｔｔａｒｉａｔｒｉｆｏｌｉａ）储藏器官的一种天抗虫物质,属于丝氨酸蛋白酶抑制剂类,能抑制胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶和激肽释放酶,对某些鳞翅目,双翅目以及鞘翅目等昆虫有毒杀作用。     

DNA 指纹技术中所用的探针及其发展

ProbesUsedinDNAFingerprintingTechniqueandTheirDevelopmentLiuShujunChengGuangchao(InstituteofGenetics,AcademiaSinieaBeijing100101)1概述1980年,Wyman和White描述了第一个多等位性的具有高度多态性的人类DNA标记[11]．不久,在胰岛素基因（insulingene）的5’端区域、致癌基因c—HarasIoncogene）的3’端分别发现了相同的高度可变的标记（hypervariablemarker）．在α－球蛋白（α-globin）基因群周围还发现了其它三个标记[2]．1982年,Bell等[1]证实：这些高度多态性区域串联着重复的短序列单位,由于重复单位数目的差…     

稻瘟病菌致病变突体的REMI诱变与鉴定

以水稻“爱知旭”为寄主,将带选择标记的质粒ｐＣＳＮ４３和ｐＢＦ１０１为外ＤＮＡ,利用限制酶诱导整合这种新方法转化稻瘟菌原生质体,从筛选到的数百个转化体中分离出３个与致病能力密切相关的突变体Ｒ２Ｈ６５,Ｒ２Ｈ６９和Ｒ２Ｂ１５６５。其中Ｒ２Ｈ６５和Ｒ２Ｈ６９只产生畸形分生孢子,分生孢子的发育和附着胞的形成以及黑色素的合成均受到极大影响,致病性测试证明完全丧失致病能力;