核酶设计、合成与克隆的一种新方法

介绍了一种设计、合成与克隆人造核酶的新方法.通过在“锤头结构”模型中非保守性区域引入 Bgl I 切点,不仅维持了核酶切割活性所必需的二级结构,而且为核酶克隆的鉴定提供了极为方便的手段.另外还通过在核酶模板两端引入限制性内切酶半切点,一步直接将核酶模板连接、聚合、克隆到体外转录载体上,大大简化了以往核酶克隆的繁琐操作,省时、省力,克隆效率也较高.     

百日咳菌培养过程中通气量的变化对百日咳毒素（PT）产量的影响

目的:自20世纪80~90年代以来,各种不同类型的无细胞百日咳疫苗已在各国批准上市[1]。其免疫效果已被证实,不良反应比菌体疫苗明显较低,但成本比菌体疫苗高很多,而百日咳菌的免疫性抗原成分复杂,目前尚未能以分子生物等手段将这些抗原克隆到成本较低的细菌中。因此,改进培养技术     

植物GH3基因家族研究进展

生长素在植物的整个生长发育过程中都具有重要的作用,其早期响应基因可归为3类:Aux/IAAs、GH3s、SAURs.通过功能基因组学的研究,特别是对相关突变体的分子遗传学与分子生物学的研究,使我们对这些基因家族的作用机理的理解更为深入.以下综述了植物GH3基因的结构、功能及表达调控模式,重点介绍了由GH3介导的生长素信号途径与其他信号转导途径之间的互作和GH3基因与植物逆境胁迫适应的关系.     

NRDRiso酶cDNA的序列测定及生物信息学分析

通过鉴定分析人肝组织中辅酶II依赖性视黄醇脱氢酶不同剪接体全长cDNA核苷酸序列与氨基酸序列的结构特征,为今后进一步研究体内维甲酸的代谢情况奠定基础。根据人、小鼠NRDR编码区的一致性序列,设计一对引物,应用RTPCR方法从人肝组织中得到一条377bp的新的cDNA片段。采用RACE法得到了NRDR新亚型cDNA,并以生物信息学软件分析其生物学特征。 测序得知该cDNA长为1003bp,以NADP-dependent retinol dehydrogenase/reductase short isoform（NRDRiso）登录GenBank。其读码框为525bp,拟编码174个氨基酸的蛋白。     

针对点突变癌基因转录物的核酶细胞内性质的研究

前文［１］已证实在体外（ｉｎｖｉｔｒｏ）实验接近生理环境的条件下,本室设计、合成并克隆到的核酶能够高效选择性的定点切割Ｔ２４－ｒａｓ活化癌基因转录物。在此基础上,为阐明该核酶在体内（ｉｎｖｉｖｏ）的生理活性,本文又进一步把核酶基因片段克隆在真核表达质粒ｐＳＭＧ上,并将重组质粒以磷酸钙沉淀法转染由Ｔ２４－ｒａｓ基因诱导的转化细胞系。在细胞和分子水平上检测了核酶在真核细胞内的生物学活性：表现为各恶性转化细胞系的形态特征逆转,生长速度减慢,并呈现出重叠生长减弱恢复接触抑制的趋势,细胞凝集行为接近正常、软琼脂集落形成能力下降;同时,引物延伸实验结果也表明：在体内实验条件下,核酶能够特异性切割点突变Ｔ２４－ｒａｓ癌基因转录物,抑制癌变细胞的恶性行为,使其得到一定程度的逆转。