转录因子Foxo3a高表达对小鼠T淋巴瘤EL-4细胞周期和凋亡的影响

为了研究转录因子Foxo3a高表达对小鼠T淋巴瘤EL-4细胞周期和凋亡的影响,采用电穿孔法将真核表达载体pEGFP-N1/Foxo3a转染小鼠T淋巴瘤细胞系EL-4细胞,并通过聚合酶链式反应和免疫印迹法分别检测Foxo3a mRNA及蛋白表达。转录因子Foxo3a高表达后,采用细胞计数法绘制其细胞生长曲线;采用荧光显微镜法及流式细胞仪定性和定量观察典型EL-4细胞凋亡形态特征、细胞凋亡百分率及细胞周期变化情况。结果表明,转录因子Foxo3a真核表达质粒pEGFP-N1/Foxo3a经酶切鉴定及测序检测序列正确。转染pEGFP-N1/Foxo3a的小鼠EL-4细胞表达Foxo3a mRNA和蛋白水平显著升高。Foxo3a高表达明显抑制EL-4细胞的增殖能力,并使EL-4细胞发生明显G2期阻滞(P<0.001)。Foxo3a基因高表达后,荧光显微镜可以观察到典型凋亡的细胞形态。同时,EL-4细胞凋亡百分率显著升高(P<0.01)。结果提示,Foxo3a高表达可以有效抑制小鼠T淋巴瘤细胞体外细胞增殖,使细胞周期G2时相阻滞,并具有诱导细胞凋亡的作用。     

CD4+T细胞的新亚型：Th17细胞及其生物效应

辅助性T细胞通常分为Th1型和Th2型.20余年来,该分类方法形成了理解CD4 T细胞免疫生物学、固有免疫和适应性免疫调节理论的框架.近来研究发现,机体存在一种新型的不同于1型和2型的CD4 效应T细胞——辅助性17细胞(Thelp 17,Th 17),该细胞是由天然T细胞前体分化而来,具有独立的分化和发育调节机制,并特异性地产生白介素17(interleukin 17,IL-17)效应因子,在自身免疫性疾病和感染性疾病中发挥重要调节作用.这将对深入研究机体免疫调节、免疫病理和机体防御反应机制具有重要意义.就这种新型的辅助性T细胞的产生、发育分化机制和免疫调节效应研究进展做一简要综述.     

清栓酶静脉注射溶栓治疗急性心肌梗塞4例疗效报告

清栓酶静脉注射溶栓治疗急性心肌梗塞４例疗效报告二九一医院刘国祥,刘光伟,于红我们应用大剂量清栓酶静点治疗急性心肌梗塞４例,均取得了满意效果,报告如下：一、一般资料：本组选择对象均为冠心病监护病房的急性心肌梗塞,均为男性,年龄在３０──６４岁之间,急性...     

CD127与T淋巴细胞

CD127是IL-7受体α链,T淋巴细胞对IL-7的特异性应答主要通过CD127的表达实现的。CD127在胸腺细胞向T淋巴细胞的发育过程、成熟T细胞内环境稳态的维持、病毒感染后T细胞的免疫应答及记忆性T细胞的分化及幸存等方面发挥重要的作用。在整个T淋巴细胞生命周期中仅有两个阶段缺乏CD127的表达：即双阳性CD4+CD8+T细胞及激活的T细胞。近期,随着对CD127研究的不断深入,发现CD127在作为记忆性T细胞及调节性T细胞特异性的表面标记物方面也发挥着重要作用。本文简要介绍了CD127在T淋巴细胞生命周期的不同阶段所发挥的调节作用及其机制。     

实验动物胰岛细胞的分离纯化

胰岛移植作为治疗1型糖尿病的有效方法,临床应用前景较好。但是,由于在胰岛移植手术中,有功能的胰岛细胞数量较少,而严重影响其治疗效果。因此,如何提高胰岛分离纯化效果,获取尽可能多的高质量的胰岛,成为胰岛移植手术成败的关键。本文仅就在采用实验动物分离和纯化胰岛方面的实验经验作以简要介绍。     

Toll样受体信号传导途径的研究进展

Toll样受体家族（Toll-like receptors,TLRs）成员在固有免疫反应,尤其是调节吞噬细胞（如巨噬细胞等）特异性识别微生物病原体抗原,分泌促炎细胞因子,上调共刺激分子,并诱导机体适应性免疫反应抗微生物病原体感染中发挥重要调控作用,被称为机体固有免疫和适应性免疫调节中的辅助受体（adjuvant receptor）。目前,对Toll样受体家族成员调控免疫反应信号传导途径的研究已成为分子免疫学领域的研究热点,认为主要存在髓样分化蛋白88（MyD88,是一种转接蛋白）依赖性和MyrD88非依赖性两条主要调控途径。本文仅就Toll样受体信号传导途径的研究进展作以简要综述。     

应用双光子显微镜和流式细胞仪定性及定量确定小鼠巨噬细胞的吞噬功能

建立了流式细胞仪和双光子激光共聚焦荧光显微镜进行定性和定量检测小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞的方法,并同传统光学显微镜细胞化学染色观察方法相比较,探讨其检测巨噬细胞吞噬效应的优越性。常规方法获取小鼠腹腔和脾脏巨噬细胞,制备巨噬细胞悬液。常规制备鸡红细胞,计数并调整活细胞数,用5-二醋酸羧基荧光素琥珀酸单胞菌酯(5-carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester,CFSE)染色,与巨噬细胞共温育一定时间后,小鼠巨噬细胞特异性荧光抗体F4/80标记巨噬细胞。应用流式细胞仪检测巨噬细胞中CFSE阳性百分率来表示巨噬细胞吞噬率;应用双光子显微镜观察被吞噬的CFSE阳性鸡红细胞动态分布情况。同时,采用传统光学显微镜吉姆萨染色观察巨噬细胞吞噬百分率。结果显示,流式细胞仪结合双光子显微镜检测巨噬细胞吞噬率与传统的显微镜计数法比较,两者有明显的正相关性。双光子显微镜和流式细胞仪可以定性与定量检测巨噬细胞吞噬功能,该方法具有灵敏、快捷、重复性好以及准确率高的特点,是进行免疫学研究的可行方法。