魔芋神经酰胺的提取及其鞘磷脂含量的测定

采用回流提取法提取魔芋神经酰胺进行初步的探索,重点分析了溶剂浓度、温度、时间、料液比对魔芋神经酰胺提取量的影响,确定了最佳的提取工艺;并且结合高效液相/蒸发光散射检测器的方法对魔芋结合态神经酰胺-鞘磷脂进行了定性定量分析。     

魔芋中神经酰胺类物质的HPLC-ELSD分析及其含量测定

建立高效液相色谱-蒸发光散射检测器分析神经酰胺的方法并进行了含量的测定.色谱柱:ZORBZX Eclipse XDB-C18(4.6mm×250mm,5μm),洗脱方法:梯度洗脱,柱温:35℃,流动相:甲醇/水,流速:1ml/min;检测器:蒸发光散射检测器,漂移管温度:40℃,氮气流速:1.5L/min.系统探讨了梯度洗脱的起始浓度、洗脱的时间和洗脱梯度的程序设置,最佳的梯度洗脱条件为5min内,甲醇浓度从60%线性增加为90%,从5min到25min,甲醇浓度线性增加为95%,在此条件下样品和标准品的分离色谱峰对称性较好.随后测定了各种样品中神经酰胺的含量,并进行了方法学验证,结果神经酰胺在0.2～2μg之间线性关系良好,最低检测限为0.01mg/ml,R2=0.9992;平均回收率为93.3%,RSD=1.65%(n=5).本法灵敏、方便、准确,重现性好,可用于魔芋神经酰胺类物质的分离及其含量的测定.     

产磷脂酶C芽孢杆菌Z-13产酶条件优化

以生物量和酶活为主要指标,采用单因素优化方法结合均匀设计试验,对芽孢杆菌Z-13产磷脂酶C(phospholipaseC,PLC)条件进行了优化。结果表明,该菌合适的产酶条件为:魔芋飞粉2.5 g/L、黄豆粉30 g/L、K2HPO4·3H2O 2.8 g/L、Zn2SO4·7H2O 1.3 g/L、接种量0.5%、摇床转速150 r/min、培养温度30℃、初始pH值9.0,在此条件下培养15 h,活菌总数为4.5×109CFU/mL,卵黄琼脂杯碟法测定磷脂酶C产生的沉淀圈(乳白色晕圈)直径可达30 mm。     

油脂下脚料降解菌的选育

从油污土样等样品分离获得两种高产蛋白酶的菌株,命名为M1、DB2,其酶活力分别213.04,206.95 U/mL.利用该两株菌分别对大豆粕,芝麻粕,菜籽粕作为发酵基质进行了初步的降解蛋白能力比较研究,结果表明M1、DB2均能很好的降解三种粕中的粗蛋白.M1、DB2的最适生长温度分别为30、35 ℃,最适生长pH分别为7、8,最佳生长时间分别为12、32 h.初步鉴定M1、DB2为芽孢杆菌属.