黄霉素产生菌BBG1213的发酵工艺优化

对黄霉素产生菌Streptomyces bambergiensis1213培养基配方、种子培养时间及摇瓶装液量等培养条件进行优化,结果表明:当发酵培养基配方为:玉米淀粉3.5%、玉米浆0.6%、酵母粉1.0%、蛋白胨0.3%、黄豆饼粉2.5%、(NH4)2SO40.13%、K2HPO40.03%,BBG1213产抗水平最高;种子培养时间36h为宜;摇瓶装液量30ml,发酵周期86h-89h最佳。采用双碟法,建立了发酵液中黄霉素含量测定方法。     

液相色谱-串联质谱法定量分析莱茵衣藻1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯

研究建立了基于超高效液相色谱串联三重四级杆质谱技术的1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯(1,3-Dioleoyl-2-palmitoylglycerol, OPO)分析方法。在正离子模式下, 以[876>577]为定量离子对, 通过多反应监测模式(Multiple Reaction Monitoring, MRM)扫描, 采用内标法对OPO进行定量分析。对缺氮胁迫条件下一株野生型莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)cc-5325及其半乳糖基水解酶基因敲降突变体M08的OPO进行了定量分析, 研究结果发现莱茵衣藻中OPO在缺氮胁迫期间显著积累, 且不同遗传背景的莱茵衣藻OPO积累量不同。在缺氮第1至第3天, M08的OPO含量相较于cc-5325分别提高了3.70、3.04和2.74倍, M08的OPO产量相较于cc-5325分别提高了1.13、1.53和1.33倍, 说明通过遗传改造莱茵衣藻的某些脂质代谢途径相关基因可以增加其OPO含量, 因此莱茵衣藻具有改成为商业化油脂新食品原料的潜在应用价值。研究建立的功能脂质OPO的定量分析方法对进一步研究不同遗传改造的莱茵衣藻中OPO结构脂的检测提供了技术支持和分析基础。