人血清脂蛋白的超速离心分离 Ⅱ.人血清极低密度脂蛋白和低密度脂蛋白性质的鉴定

本文对硫酸右旋糖酐粗制的VLDL和LDL混合液,再以区带超离心分离提纯的VLDL和LDL的样品,进行纯度鉴定、理化性质、免疫活性和化学组成的分析。琼脂糖和聚丙烯酰胺电泳结果证明,经脂质和蛋白染色均呈现一条带;免疫双扩散和免疫电泳只呈现一条沉淀弧;超速离心分析LDL 只有一个单一面尖锐的峰,上浮速率为6.75,与直接由人血清分离者无明显差异。证实本实验方法所得VLDL 和LDL 为较纯的制品,但从VLDL 和LDL 各管的琼脂糖电泳行为、电子显微镜中的分子颗粒大小以及VLDL 在分析超速离心中的上浮速率均提示:二者有亚类的存在,特别是VLDL。VLDL 和LDL 的化学组成分析说明LDL 与文献上报道数据一致,但VLDL 有一定差异。本方法为大量制备纯净的VLDL 和LDL 提供了一个有效的方法。     

一次密度梯度超速离心分离人血清四种主要脂蛋白的某些理化性质的研究

 本文对一次密度梯度超速离心获得的四种脂蛋白(VLDL、LDL、HDL_2、HDL_3)进行了理化性质的研究。超速离心分析LDL、HDL_2,HDL_3均呈现一个单一尖锐的上浮峰,上浮速率分别为S_1 6.9和F~0_(1.21) 5.7及2.6。等电点聚焦电泳显示,VLDL主要含载脂蛋白C族,E族和少量A-I,B。HDL_2、HDL_3二者载脂蛋白的种类很相似,但量上略有差异,均以载脂蛋白A-Ⅰ,A-Ⅱ为主,Apoc’s,E次之。VLDL、LDL、HDL_2和HDL_3的化学组分分析与文献报道相似。 作者用本法初步分析了不同性别的各脂蛋白分布图,获得有意义的结果。     

人血清脂蛋白的超速离心分离——Ⅰ.人血清极低密度及低密度脂蛋白的大量分离

本文报道了用区带转头超速离心分离人血清两种低密度脂蛋白的新方法,该法先用硫酸右旋糖酐粗提,浓缩,得到人血清中VLDL和LDL混合液,然后再用溴化钠密度梯度区带超速离心法将VLDL、LDL及其中少量的杂蛋白分开,最后获得较大量纯净的VLDL及LDL制品。本法分离效果好,重复性佳,固定离心条件后,特别是离心速度和时间,可在相同的位置获得VLDL和LDL样品。又由于分离时样品已浓缩,区带超速离心后仍能保持较高的浓度,因而可直接观察VLDL和LDL所在的管数,简化了步骤、缩短了时间,不需浓缩即可使用,避免了在样品浓缩过程中可能产生的变化。本文为大量制备纯净的VLDL及LDL提供了一较大量分离的方法。     

人血清脂蛋白的超速离心分离——Ⅰ.人血清极低密度及低密度脂蛋白的大量分离

本文报道了用区带转头超速离心分离人血清两种低密度脂蛋白的新方法,该法先用硫酸右旋糖酐粗提,浓缩,得到人血清中VLDL 和LDL 混合液,然后再用溴化钠密度梯度区带超速离心法将VLDL、LDL 及其中少量的杂蛋白分开,最后获得较大量纯净的VLDL及LDL制品。本法分离效果好,重复性佳,固定离心条件后,特别是离心速度和时间,可在相同的位置获得VLDL和LDL样品。又由于分离时样品已浓缩,区带超速离心后仍能保持较高的浓度,因而可直接观察VLDL和LDL所在的管数,简化了步骤、缩短了时间,不需浓缩即可使用,避免了在样品浓缩过程中可能产生的变化。本文为大盆制备纯净的VLDL及LDL提供了一较大量分离的方法。     

中国人群(京津地区)载脂蛋白E基因多态性和表型分布的研究

本文利用作者建立的密度梯度超速离心分离VLDL的新方法和分析等电聚焦电泳,测定了95例中国人Apo-E基因多态性和其表型分布以及血脂水平。所得表型分布趋势与国外报告一致:E_3/E_3频率最高,E_3/E_2和E_3/E_4次之,E_4/E_4,E_4/E_2和E_2/E_2最低。同对发现中国人群的E_3/E_3表型百分分布明显高于西方人群,但未发现有E_2/E_2表型。我国人群Apo-E表型分布的这种特征可能与中国人群冠心病的患病率较西方人群为低有关。血清脂质测定和分析表明,具有不同表型人群的血脂水平无显著的统计学差异。     

一次密度梯度超速离心分离人血清的VLDL、LDL、HDL_2、HDL_3及无脂血清

本文将密度梯度、离心力和离心时间作适当的组合和配比:即不连续密度梯度1.000—1,400g/mlNaBr溶液、离心力168,000g、22小时,10℃,在Beckman L8-80型、区带头Ti-14一次超速离心将血清中四种主要脂蛋白和无脂血清相互分开,获得五个明显的蛋白峰。前四个峰经琼脂糖电泳,聚丙烯酰胺电泳,免疫双扩散和分析超速离心鉴定分别为VLDL、LDL、HDL_2和HDL_3,不含清蛋白。峰五为无脂血清,仅含0.046mg/dl胆固醇和0.2mg/dl甘油三酯,本法重复性佳,分离样品多(50ml),效果好,操作简单,并可延长离心机头的使用期限。已用于研究各种因素对脂蛋白含量的影响及其代谢间的相互关系。     

人血清脂蛋白的超速离心分离——Ⅱ.人血清极低密度脂蛋白和低密度脂蛋白性质的鉴定

本文对硫酸右旋糖酐粗制的VLDL和LDL混合液,再以区带超离心分离提纯的VLDL和LDL的样品,进行纯度鉴定、理化性质、免疫活性和化学组成的分析。琼脂糖和聚丙烯酰胺电泳结果证明,经脂质和蛋白染色均呈现一条带;免疫双扩散和免疫电泳只呈现一条沉淀弧;超速离心分析LDL只有一个单一面尖锐的峰,上浮速率为6.75,与直接由人血清分离者无明显差异。证实本实验方法所得VLDL和LDL为较纯的制品,但从VLDL和LDL各管的琼脂糖电泳行为、电子显微镜中的分子颗粒大小以及VLDL在分析超速离心中的上浮速率均提示:二者有亚类的存在,特别是VLDL。VLDL和LDL的化学组成分析说明LDL与文献上报道数据一致,但VLDL有一定差异。本方法为大量制备纯净的VLDL和LDL提供了一个有效的方法。