中国人群脂蛋白脂肪酶基因突变与高脂血症的相关性研究

为进行脂蛋白脂肪酶基因突变与中国人群高脂血症的相关性研究,采用单链构象多态性分析结合DNA序列测定的方法,对386例(其中108例高脂血症患者,278例正常对照)中国人群进行突变筛查。结果发现1个新的沉默突变L103L,1个错义突变P207L,3个剪接突变Int3/3′-ass/C(-6)→T和普遍存在的S447X多态性,其中发生在高脂血症组的P207L杂合子为亚洲首报,并对先证者的家系进行了研究,认为P207L是家族性高脂血症的病因之一,而在正常对照组中也有发现的Int3/3′-ass/C(-6)→T,对以往研究认为其是高脂血症易患因素的观点提出了相反的报告,对于普遍认为有益的多态性位点S447X,进一步研究认为其对于正常人群,特别是健康男性的保护作用更强。结论:脂蛋白脂肪酶基因变异与高脂血症的相关性十分复杂多样,大规模的人群筛查具有重要意义。     

DNA银染的清除与重染

聚丙烯酰胺凝胶电泳因其操作简便 ,分辨率高 ,重复性好等优点在生物大分子的分离 ,提取和鉴定等方面得到广泛的应用 ,它已经成为开展分子生物学研究必不可少的技术方法 .显示聚丙烯酰胺凝胶电泳中核酸的方法主要有溴化乙锭 (ＥＢ)染色和硝酸银染色 .硝酸银染色因其灵敏度高 ,无致癌毒性 ,同时也消除了观测时紫外线对眼睛的伤害 ,因此而被更多的研究人员所采用 .　　许多因素可以影响染色显像的成败与优劣 ,如胶的厚度 ,试剂的浓度 ,冲洗次数和反应温度 ,特别是终止时间的掌握等 .染色背景过深和显像不理想是几乎所有研究人员都曾有过的经历 …     

抗人apo E单克隆抗体细胞株的建立及其性质分析

载脂蛋白E(apo E)是人血液中重要的载脂蛋白成分之一,其遗传表型和血液浓度与高脂蛋白血症及动脉粥样硬化关系密切。制备单克隆抗体和建立相应的免疫化学技术是测定人apo E表型和浓度的重要途径。 利用本室建立的不连续密度梯度超速离心     

人血浆脂蛋白Ｂ∶Ｅ的测定

用纯化的羊抗人载脂蛋白Ｂ抗体包被96孔微量滴定板,与样品保温后,加入辣根过氧化物酶标记的羊抗人载脂蛋白Ｅ纯化抗体,最后用邻苯二胺底物显色. 与同时进行的标准物比较,可测定样品中含有载脂蛋白Ｂ脂蛋白中载脂蛋白Ｅ（简称LpB∶E ）的含量. 用建立的方法对120例血样进行了LpB∶E 测定,并对所得结果进行了简要讨论.     

合酶与合成酶

合酶与合成酶是生化教学中经常提到的,同时也是比较容易混淆的两个概念。例如,对于三羧酸循环中催化乙酰ＣｏＡ与草酰乙酸反应生成柠檬酸的酶,国内教科书就出现了命名的混乱,有的书称为柠檬酸合酶,更多的书称为柠檬酸合成酶。此外,不少教科书把脂肪酸合酶、ＨＭＧＣｏＡ合酶、ＡＬＡ合酶及前列腺内过氧化物合酶误译成脂肪酸合成酶、ＨＭＧＣｏＡ合成酶、ＡＬＡ合成酶及前列腺内过氧化物合成酶等。可见,合酶与合成酶误用存在一定的普遍性。这种状况不仅使青年教师茫然,更使学生无所适从,实在有必要澄清。出现这种错误的可能原因一是名词的错…     

载脂蛋白E

apo-E显示明显的多形性,其异构体部分来源于结构基因的变异,部分来源于翻译后的唾液酸糖化修饰。不同的异构体在受体结合活性上有明显的差别,其原因是由于在活性部位半胱氨酸对精氨酸的取代。apo-E与机体胆固醇代谢的关系极为密切。apo-E_2纯合子受体结合活性低下是Ⅲ型高脂血症形成的主要原因。apo-E_4可能与V型高脂血症的形成有关。     

构型与构象

构型和构象是表征分子结构特征的易混淆的两个概念,构型是指具有一定构造的分子中原子或基团的固有空间排列。广义的构象是指分子中原子或基团在三维空间的取向和定位,狭义的构象是指具有相同构造和构型分子中原子或基团在空间的取向和定位。构型和构象既相互区别,又相互联系。对分子构型和构象概念的正确认识是阐明生物大分子结构与功能复杂关系的重要前提,对其正确地理解和运用将有助于教师教学任务的完成和学生对相关知识的理解和掌握。