邻苯三酚对红细胞膜的过氧化损伤作用

本文用邻苯三酚碱性条件下自氧化产生的超氧阴离子自由基(O₂^-_·)处理分离的红细胞膜,研究外源自由基对红细胞膜的过氧化作用。结果表明,邻苯三酚对红细胞膜结构和功能有明显的损伤作用,导致膜流动性下降,膜荧光物质增加,膜蛋白发生交联作用以及膜重新封闭能力下降。     

介绍一种制备细胞膜的简易方法

为进行细胞膜的生物化学分析,必先分离出纯净的细胞膜.选用哺乳动物红细胞制备细胞膜是目前常用的方法,一般多在一步溶血法的基础上,用高速离心分离制备.由于高速离心机设备目前国内尚不普及,我们尝试在低速离心(4℃,1,200×g,离心45分钟)条件下,进行人红细胞影泡制备.所谓“影泡”,即哺乳动物红细胞溶血去除血红蛋白后,分离到的细胞质膜.成熟的哺乳动物红细胞中没有通常真核细胞所含的任何细胞器.经制备,容易得到纯净的细胞膜,并且材料来源方便,故红细胞影泡是目前研究细胞膜结构功能时常用的一种膜制剂.     

亚硒酸钠抗红细胞膜蛋白交联作用的机理探讨

邻苯二酚氧化处理人红细胞膜会导致膜蛋白交联,产生高分子聚合物(HMP)。用N—乙基马来酰胺(NEM)封闭膜蛋白硫基,则不产生HMP。预先用Na SeO_3(0.05mol/L)处理红细胞膜,也同样不产生HMP。用N—(3-芘)马来酰胺(N-〔3-P〕NEM)标记红细胞膜来测试不同浓度Na_2SeO_3对荧光强度的影响。结果表明,随着Na SeO_3浓度增高荧光强度相应降低。Na_2SeO_3对红细胞膜的预处理时间和荧光强度的变化有关。经Na SeO_3处理的红细胞膜ESR谱提示了Na_2SeO_3与材相互作用有关。用荧光法测定膜结合硒含量表明,Na_2SeO_3处理红细胞膜可导致膜结合硒含量增高。推测,Na SeO_3很可能与膜蛋白疏基作用形成结合硒,从而起到抗膜蛋白交联作用。     

超氧歧化酶(SOD)对人红细胞膜的保护作用

前文曾报道,红细胞膜经外源O₂^-_·自由基(碱性条件下,邻苯三酚自氧化产生)处理后有明显损伤作用。在此基础上,本文研究猪红细胞SOD对人红细胞膜氧化损伤的保护作用。结果表明,外源SOD对人红细胞膜有明显保护作用,表现为膜流动性和膜重封闭能力保持正常水平,膜蛋白交联作用有显著减小。     

人红细胞膜带3蛋白的提纯与鉴定

提出了一种分离纯化人红细胞膜带3蛋白的不含血型糖蛋白制剂的改良方法:先后用0.89％NaCl、20mM pH8.0磷酸钠和0.05％TritonX-100处理膜除去膜骨骼蛋白类和血型糖蛋白,再用自行设计的凝胶制备电泳装置进一步纯化。冰冻干燥的制剂是均质的,得率为18.5±2.85％,它的分子量、氨基酸组成和紫外吸收光谱与文献报道基本相同。     

浅谈超速离心技术在生物学中的应用

超速离心机是一种利用高速旋转的转头所产生的强大离心力场,对样品进行分离、提纯、分析的精密仪器。从1926年瑞典物理学家Sydberg研制成功第一台超速离心机以来,至今已有五十多年的历史。超速离心机已有小规模的试制到成批地进行商品生产。由于超速离心机的产生和超速离心技术的发展以及电子显微镜的作用,人们对细胞的结构和功能的了解越来越清楚了。过去人们只能在电子显微镜中看     

动物的毛与人发角蛋白组分的比较研究

本文用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对10科18种50份动物毛与人发进行了角蛋白组分分析。结果证实,动物的毛与人发角蛋白组分的主要差异在<18.500低分子量区域;不同种属的动物毛角蛋白组分也存在明显差异;大熊猫毛的角蛋白组分与小熊猫和黑熊的相比有显著不同。不同种属动物毛角蛋白组分的差异对动物分类学研究能提供有参考价值的实验依据。     

硒对红细胞膜抗氧化作用的探讨

本文以红细胞膜在体外与超氧阴离子自由基(由邻苯三酚自氧化产生)反应所致氧化损伤作为实验模型,研究了Na₂SeO₃,NaHSeO₃,Na₂SeO₄和SeO₂等硒化合物对红细胞膜的作用。结果表明,Na₂SeO₃有抗氧化作用。表现为膜蛋白交联作用显著减小,脂质过氧化物(膜荧光物质)含量下降。本文还就硒抗氧化作用的机理作了讨论。     

人红细胞封闭影泡的分离及其封闭度的测定

五十年代,Teorell等证实红细胞影泡在等渗条件下能“再封闭”,此后,封闭影泡就成为研究生物膜结构与功能的不对称性及细胞膜对介质的通透性等问题的重要材料。近几年来,红细胞影泡作为一种携带药物或核酸的载体,已初步应用于医药临床或遗传工程技术,受到人们的重视。关于封闭影泡的制备和性质Schwoch和Passow已有评述。他们提出影泡是不均一的。为了分离纯化影泡制剂,Bodemann曾采用蔗糖梯度离心法。我们考虑到蔗糖的渗透压效应,改用葡聚糖作介质,对按Steck方法制