尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶基因UGT1A7基因多态性与肝硬化易感性关系的研究

目的:探讨UGT1A7基因多态性与肝硬化易感性之间的关系.方法:设置150例肝硬化汉族住院患者组与100例性别/年龄相匹配的志愿者对照组,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析法(PCR-RFLP)检测肝硬化组与正常组中UGT1A7的基因多态性,并进行统计学分析.结果:肝硬化组中C2等位基因型与对照组相比明显升高,P＜0.001,差异有显著性意义.结论:肝硬化与UGT1A7基因相关,UGT1A7等位基因C2可能是肝硬化发生的危险因素.     

乙肝病毒X蛋白通过激活NF-κB信号通路上调ABCG2的表达

目的：研究乙肝病毒X蛋白（HBx）通过核因子-κB（NF-κB）信号通路对半转运蛋白（ABCG2）的调节作用。方法：用特异性的NF-κB信号通路阻断剂PDTC阻断NF-κB信号通路,荧光双标激光扫描共聚焦显微镜观察L02细胞系转染HBx基因前后及PDTC加入前后NF-κB信号通路的激活、失活情况,同时用Real-time PCR和Western Blot技术检测转染前后及PDTC加入前后ABCG2在mRNA及蛋白水平的表达变化。结果：以L02细胞为参照,转染HBx基因后的L02-HBx细胞NF-κB信号通路被激活,ABCG2 mRNA和蛋白水平分别增加3.62±0.15和4.61±0.73倍,差异有统计学意义（P〈0.05）;PDTC作用24h后L02/HBx细胞NF-κB信号通路阻断,ABCG2 mRNA和蛋白表达分别为2.15±0.32倍和2.37±0.55倍,与未加入PDTC作用的L02-HBx细胞相比均有统计学意义（P〈0.05）。结论：NF-κB信号通路是HBx上调ABCG2表达的途径之一。     

姜黄素对大鼠肝星状细胞表达受体型蛋白酪氨酸磷酸酶的影响的实验研究

目的:本研究通过观察受体型蛋白酪氨酸磷酸酶(PTPRJ)在大鼠肝星状细胞中的表达及姜黄素对其的影响,探讨以PTPRJ为靶点,姜黄素对抗肝纤维化的分子机制.方法:四氯化碳(CCL4)皮下注射诱导大鼠肝纤维化模型,并采用Percoll梯度离心法分离培养原代大鼠肝星状细胞,采用western-blot、RT-PCR法分别测定PTPRJ、其mRNA在肝组织及肝星状细胞的表达变化及姜黄素对其表达的影响.结果:western-blot、RT-PCR检测结果显示:肝组织和肝星状细胞中PTPRJ表达呈阳性,并随着肝纤维化进展,其表达逐渐降低;姜黄素作用后,肝组织和肝星状细胞PTPRJ表达明显增多.结论:姜黄素可显著增强肝星状细胞PTPRJ的表达,从而改善或逆转肝纤维化进展.     

硫化氢在大鼠肝星状细胞氧应激中对α-SMA与细胞周期影响的实验研究

目的:探讨硫化氢在大鼠肝星状细胞氧应激中对α-SMA与细胞周期的影响.方法:将大鼠肝星状细胞株HSC-T6分为8组:空白组(B组,HSC-T6);对照组(C组,B组+500μ mol/L Fe-NTA);NaHS组(N1:C组+20μ mol/LNaHS;N2:C组+100μ mol/LNaHS;N3:C组+200μ mol/L NaHS);格列苯脲组(G1:C组+20umol/LGLBN;G2:C组+200umol/L GLBN;G3:C组+700umol/L GLBN).用免疫组化的方法定性测定α-SMA,用流式细胞仪测定细胞周期.结果:24h的细胞DNA含量S期对照组和空白组有明显差异(41%vs58.6%,P＜0.05),给与NaHS后,细胞DNA含量S期N1、N2和N3组与对照组均有明显差异(62.0%,66.8%,72.8%vs58.6%均P＜0.05),给与GLBN处理后,细胞DNA含量S期G1、G2和G3组与对照组均有明显差异(38.6%,34.8%,32.5%vs58.6%均P＜0.05),各项指标结果与给与NaHS处理后结果相对应,各组与相对应组比较均有明显差异(P＜0.05).24h的免疫组化照片显示对照组和空白组有明显差异,给与GLBN后,G2组与G3组与对照组有明显差异,给与NaHS后,N1,N2,N3组均与对照组,G1,G2,G3组有显著差异.结论:氧应激下硫化氢对HSC细胞具有保护作用,可抑制肝纤维化的发生发展.