自身代谢缓解甲氨蝶呤对小鼠体内成熟卵母细胞副作用的研究

甲氨蝶呤(methotrexate,MTX)作为抗叶酸代谢类药物,在临床上应用广泛。其副作用之一表现为损伤卵母细胞质量。那么,对于有妊娠需求的女性服药者,停药后多久才适合受孕呢?该文结合双光子荧光成像与三维重构技术研究此问题。通过单次腹腔注射生理盐水及5 mg/kg MTX建立了对照组和MTX组小鼠,随后建立了MTX注射后代谢5、10、15、20、25及30天组小鼠。研究发现,小鼠体内成熟卵母细胞的纺锤体正常形态比率与染色体正常空间排布比率,分别于代谢15天和25天后,显著高于MTX组,并恢复至对照组水平。表征卵母细胞功能的体外受精率、二细胞胚胎率及囊胚率,发现分别于代谢15、20、25天后,恢复至对照组水平。该文结果表明,自身代谢可恢复MTX所引起的卵母细胞质量受损及功能下降,所需时间约为小鼠的5个生理周期,即25天。     

早期胚胎全场OCT图像的边界去模糊研究

全场光学相干层析成像技术(全场OCT)是研究早期胚胎形态发育的最理想成像设备,然而所采集图像难免受噪声干扰.这些噪声可模糊早期胚胎内不同组织结构的边界,从而给基于图像边界的结构划分带来干扰.为解决这一问题,本文运用中值滤波、维纳滤波、各向异性扩散算法处理全场OCT获得的早期胚胎图像,并运用信噪比、均方误差、峰值信噪比和边缘保留等指标评价图像处理效果.结果表明:经各向异性扩散算法处理的早期胚胎图像,可完整地保留原始图像信息,且边界最清晰,视觉效果最好.     

基于全场光学相干层析技术评估卵母细胞质量

卵胞质质量是影响卵母细胞发育能力的重要因素，然而目前仍缺少无损且客观高效地评估卵胞质成熟度的方法.已知胞质成熟度低是导致体外成熟卵母细胞发育能力远低于体内成熟卵母细胞的主要原因.全场光学相干层析技术(FF-OCT)具有无损非标记且三维高分辨的特点.FF-OCT采集的体内成熟与体外成熟小鼠卵胞质图像，经对比发现，具有大面积高亮皮质区及胞质均匀分布的卵母细胞，其胞质成熟度更高.为验证这一点，对比了显微镜下筛选和FF-OCT筛选的体外成熟卵母细胞的体外受精率，发现显微镜筛选组的体外受精率远低于体内成熟的情况，FF-OCT筛选组的体外受精率与体内成熟组之间无显著差异.这说明FF-OCT筛选的体外成熟卵母细胞发育能力接近于体内成熟的卵母细胞.此外还利用FF-OCT成功观测到新鲜及老化卵母细胞之间的形态差别，即老化卵母细胞胞质均匀性更差及高亮皮质区更小.因此，FF-OCT可用于无损评估卵胞质质量，且大面积高亮皮质区的存在性及胞质分布的均匀性是评估卵胞质质量的有效指标.