Wistar大鼠Pdia3cDNA的克隆及原核表达

哺乳动物的精卵融合是一个多分子参与的复杂过程,目前只鉴定出几种影响精卵融合的蛋白因子,对其分子机制还知之甚少.其中位于精子上的Pdja3具有二硫键异构酶活性,可能催化其他精卵融合相关蛋白的二硫键变化而参与精卵膜融合.克隆了Wistar大鼠的Pdia3 cDNA片段,长度为1 620 bp,其中编码区为1 518 bp.测序结果显示,编码区内有两个碱基与GenBank公布的大鼠Pdia3cDNA不同,分别为第147个密码子GAG(Glu)的第1位碱基和第410个密码子AAG(Lys)的第3位碱基,前者造成氨基酸替换,后者仅为多态性.此外,还在大肠杆菌中成功地表达并纯化了GST-Pdia3融合蛋白,为下一步研究大鼠Pdia3在体外影响精卵融合和与其它蛋白的相互作用奠定了基础.     

长叶红砂叶际细菌和真菌群落对季节变化的响应特征

【背景】植物叶际(phyllosphere)定殖着丰富多样的微生物,叶际微生物通过发挥特定功能在逆境下生存,影响寄主植物的生理生态特性并受环境异质性的影响。【目的】植物叶际微生物群落是动态的,认识季节更替对植物叶际微生物群落结构的影响,对于加深对植物-微生物-环境相互作用的理解具有积极意义。【方法】以鄂尔多斯荒漠草原泌盐盐生植物长叶红砂为研究对象,分别测定春季、秋季植物叶片表面理化特性,并结合叶际细菌、真菌高通量测序结果进行综合分析。【结果】长叶红砂冠下土壤含水率、pH、电导率等指标在季节更替下存在显著差异,叶片表面Na+、K+和电导率值存在显著差异;进一步分析发现,叶际细菌分类操作单元(operational taxonomic unit,OTU)、Shannon、Chao1和ACE (abundance-based coverage estimator)指数与土壤和叶片表面盐分含量呈正相关;春季叶际蓝细菌门和拟杆菌门保持了较高的相对丰度,而秋季叶际变形菌门、放线菌门、子囊菌门的相对丰度则高于春季;其中,叶际Bradyrhizobium、Novosphingobium和Edaphob...     

荒漠植物黑沙蒿嫩枝与成熟枝内生菌群落结构差异

[背景]黑沙蒿是我国北方沙漠地区分布广泛、抗旱性能优良的固沙灌木,对稳定沙漠地区生态系统有至关重要的作用.[目的]内生菌在植物生命过程中扮演着重要角色,认识植物生长发育阶段幼嫩和成熟组织内生菌群的结构变化,对于理解菌群间的相互作用及保护宿主植物抵御生物和非生物胁迫具有积极意义.[方法]以宁夏拉巴湖林场黑沙蒿为研究对象,...     

蒙药孟根乌苏-18 味丸、孟根乌苏炮制品的肝肾毒性作用研究

目的:对比研究孟根乌苏(水银)-18味丸、孟根乌苏(水银)炮制品与硫化汞、氯化汞、氯化亚汞的肝肾毒性作用。方法:将Wistar雄性大鼠,根据体重随机分为正常对照组、孟根乌苏-18味丸低、高剂量组(0.29,2.9 g·kg~(-1)·d~(-1))、孟根乌苏-18味丸简化方组(0.26 g·kg~(-1)·d~(-1))、孟根乌苏炮制品低、高剂量组(0.033,0.33 g·kg~(-1)·d~(-1))、硫化汞组(17.39 mg·kg~(-1)·d~(-1))、氯化汞组(4.06 mg·kg~(-1)·d~(-1))、氯化亚汞组(35.3 mg·kg~(-1)·d~(-1)),共9组,每组6只。各组大鼠适应7天后,灌胃给药7天后分别检测肝肾功能,肝肾组织形态学变化,并用电感耦合等离子体发射光谱仪(ICP-OES)和电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)法测肾汞蓄积量,原位末端标记(TUNEL)法测肾细胞凋亡,免疫组化法测肾Ⅲ型胶原蛋白表达,实时荧光定量PCR(Real-Time-PCR)法检测肾脏MT-1、MT-2基因表达的变化。结果:在实验过程中,氯化亚汞组4只大鼠死亡,因此未对实验数据进行统计。大鼠连续7天给药后,药物对各组大鼠肝、肾功能并无影响。肝脏和肾脏病理检查结果表明,孟根乌苏-18味丸和孟根乌苏炮制品低剂量组肝细胞肿胀变性程度较轻,肾小球轻度肥大,肾小管上皮轻度肿胀变性,孟根乌苏-18味丸和孟根乌苏炮制品高剂量组以及硫化汞组大鼠肝脏、肾脏均出现了一定的病理变化,而氯化汞、氯化亚汞组大鼠肝肾病理变化更显著。与正常对照组和孟根乌苏炮制品低剂量组相比,氯化汞组大鼠肾汞蓄积量显著升高(P0.01);硫化汞、氯化汞组大鼠肾细胞凋亡率和Ⅲ型胶原蛋白表达显著升高(P0.01);与正常对照组比较,氯化汞组大鼠肾组织中MT-1和MT-2 m RNA表达显著升高(P0.01,P0.05);氯化汞组大鼠肾组织中MT-1表达显著高于孟根乌苏炮制品低剂量组(P0.01)。结论:临床常用量的孟根乌苏-18味丸和孟根乌苏炮制品肝肾毒性要远低于氯化亚汞、氯化汞。