人源抗菌肽LL-37的原核表达及活性鉴定

目的:实现大肠杆菌高效可溶表达人源抗菌肽LL-37。方法:LL-37基因克隆至原核载体pET32a,于大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达。运用相关生物信息学软件分析重组蛋白Trx-LL-37的理化性质、亲/疏水性、蛋白质二级结构及其可溶表达概率。实验还考察了不同诱导温度对重组蛋白可溶表达比例的影响。结果:生物信息学分析显示,Trx-LL-37分子量21.5kD,理论等电点6.3,物理性质稳定,二级结构简单,具有可溶表达倾向。重组蛋白最佳诱导温度为17℃,与37℃相比,可溶表达比例由37.2%提高至50.2%,并且总表达量也提高了5%左右。抑菌结果显示纯化产物对多种常见细菌的生长具有抑制作用。结论:可采用融合方式通过原核系统高效可溶表达LL-37,为LL-37的功能研究打下基础。     

基于细胞色素c的胞外电子传递过程

电活性微生物具有独特的胞外电子传递功能,在地球化学循环和环境污染修复中起着重要作用。细胞色素c在电活性微生物胞外电子传递过程中扮演了重要角色,不仅参与直接电子传递途径,还参与电子媒介介导的间接电子传递。其电子传递功能不仅对地球环境中铁、锰、碳等元素的循环具有重要作用,还应用于能源生产、废水处理、生物修复等众多领域,具有良好的应用潜力。本文以电活性微生物的2个模式菌属(希瓦氏菌属和地杆菌属)为例,综述了电活性微生物将电子由胞内转移至胞外的方式和途径,详细阐述了细胞色素c在该胞外电子传递过程中的重要作用,总结了细胞色素c介导的胞外电子传递过程所涉及的分析方法,并对微生物胞外电子传递未来的研究方向提出了展望。     

水分胁迫对棉花叶片中IAA从含量、IAA氧化酶和过氧化物酶活性的影响

整株干旱降低盐棉46号叶片中的IAA总量,叶龄愈小下降愈多。幼叶中IAA总量的下降主要是结合态IAA减少的结果。气干和-1.7MPa PEG溶液渗透胁迫处理也降低离体成熟叶片的IAA总量,其变化与叶片含水量呈直线相关(r=0.905)。整株干旱处理提高各叶片的过氧化物酶活性,叶龄愈小提高愈多,但IAA氧化酶活性无显著变化。离体和整株干旱时IAA总量的下降,可能是过氧化物酶活性增加所致。     

叶片衰老和气孔关闭

苗龄10天的小麦第一真叶的上部长10cm的离体叶片,将其形态下端直立插入不同的激素溶液中进行处理。在光照下,对照组的气孔在24小时后关闭,ABA(10 ppm)处理叶片的气孔很快关闭,并加速衰老。KT(10 ppm)处理后72小时的叶片的气孔仍不关闭,并推迟衰老。但是,如果先以KT处理5小时,再移置ABA中,或移置黑暗中,或在叶片二面涂以凡士林,此时叶片的气孔虽然均已处于关闭状态,但KT推迟其衰老的效应仍然保持。实验结果说明叶片衰老与气孔开闭之间并不表现为简单的平行关系。     

细胞分裂素的Sephadex LH-20层析法

在研究植物内源激素的分布和消长规律时,需要从植物样品中提取,分离和纯化内源激素,随后进行定性和定量分析。关于植物内源激素的提取、分离和生物鉴定的技术方法,我们已经有过介绍。近来,我们运用交联葡聚糖LH-20(Sephadex LH-20)柱层析来分离和纯化细胞分裂素类物质,获得了较好的结果。     

用高效液相色谱测定细胞分裂素

高效液相色谱是一种快速、灵敏、分辨率高的检测技术。近代的高效色谱仪;还配有电子计算机装置,使操作和数据处理的自动化程度大为提高,分析测定的结果更加准确可靠。在研究植物激素工作中,运用高效液相色谱技术已有近十年历史。本文就细胞分裂素类物质的高效液相色谱检测方法作一介绍。     

用气液色谱—电子捕获器测定脱落酸

气液色谱(Gas Liquid Chromatography,简写GLC)是一种快速、灵敏、专一和准确的分析法,在国内外科研工作中得到了广泛的应用。1970年,Seeley和Powell用装有电子捕获器(Electron Capture Detector简写ECD)的气相色谱仪,检测了苹果果实汁液中的脱落酸,其灵敏度达到10—100pg。这样就使得脱落酸的测定技术提高了一大步。我们实验室以前是用生物鉴定方法测定植物激素的。近年来开始运用气液色谱等分析技术来定     

用气-液相色谱仪测定细胞分裂素

我们实验室曾用生物鉴定法和高效液相色谱测定细胞分裂素类物质。前者不能辨出细胞分裂素的各成分,测得的只是总活性。后者虽能快速测定细胞分裂素的各成分,但对样品的纯化程度要求较高,都有一定局限性;气相色谱仪则对样品纯化程度要求相对较低,并能准确、快速地测定细胞分裂     

团花(Anthocephalus chinensis)种子和果实中抑制物质的研究

团花的种子中有抑制物质,把种子和果实的其它部分分别用有机溶剂提取和分离,所得粗提物经柱层析和薄层层析纯化后,用气相色谱、高效液相色谱、气-质联用等仪器进行测定,并结合生物鉴定,证明种子和果实其它部分中均含有一定量的脱落酸。种子中的含量为11.7μg/g干重,其它部分15.8μg/g干重。     

棉株根系伤流中的细胞分裂素类物质

棉株根系伤流有明显昼夜节奏,白天多,夜晚较少。白天中又以上午9～12时的伤流量为最高。伤流中CTK量及其浓度也以白天为高。在切除地上部4天以后,从蕾期和铃期棉株已不再能收集到伤流液,但盛花期棉株在切除地上部6天以后,仍产生了相当多的伤流,其中仍含有丰富的CTK类物质。盛花期棉株根系伤流量及其中CTK水平高于铃期棉株,提示铃期棉株根系活力已开始趋向衰老。根据Sephadex LH-20柱层析及高效液相层析鉴定出棉株根系伤流中的CTK类物质有Z,ZR,和IPA。