海藻糖合酶的研究进展

海藻糖是一种天然存在的非还原性二糖, 对生物膜和蛋白质等大分子有独特的保护作用, 在食品、医药、化妆品等多个领域中都有广泛的发展空间。海藻糖合酶(TreS)是一类分子内转糖苷酶, 专一性地以麦芽糖为底物, 一步转化生成海藻糖, 操作工艺简单、底物价格低廉、应用前景良好。本文综述了海藻糖合酶的酶学性质、催化机理、基因工程以及目前存在的主要问题和拟解决方案。     

β-甘露聚糖酶的酶学性质、工农业应用及基因工程研究

甘露聚糖类物质是自然界中半纤维素的第二大组分。β-甘露聚糖酶能水解底物生成甘露 寡糖,释放出与之结合的水分、微量元素等。应用于猪、鸡、鸭和水产动物日粮,可提高饲料的利 用效率,减少养殖业环境污染。甘露寡糖具有改善动物胃肠道微生态环境的功能。多种细菌、真 菌、软体动物等分泌β-甘露聚糖酶,其基因属于糖基水解酶家族5。β-甘露聚糖酶在工农业生产 和环境保护等方面有着广泛的用途。就β-甘露聚糖酶的酶学特性、研究历史、应用技术、效果和 作用机理,特别是其基因工程技术研究进展等作了概述。     

乳酸链球菌素的分子结构、抗菌活性及基因工程研究

乳酸链球菌素(Nisin)是一种由34个氨基酸组成的天然抗菌素,对革兰氏阳性菌具有广谱抑菌作用。Nisin通过吸附于细胞膜,在膜上形成孔洞杀菌。Nisin的11个基因形成基因簇,负责其翻译后修饰、转运,先导序列的切除,成熟分子的外泌,合成过程的调节等。Nisin高产菌株的选育主要通过物理化学诱变,基因工程高效表达技术的研究刚刚开始。Nisin在食品和医药领域具有广泛的应用。本文主要就Nisin的分子结构、分泌机制、抗菌活性、作用机理,特别是它的基因工程技术研究进展等作一概述。     

日粮添加塞曼特罗（CIM）对大鼠生长胴体组成及GH水平的影响

选用２４只２月龄ＳＤ处女鼠配对分组,实验组日粮添加１０μｇ／ｇ塞曼特罗（ＣＩＭ）,试验期３０天。与对照组比较,ＣＩＭ显著提高大鼠生长速度（２７．３０％,Ｐ＜０．０１）和胴体比率,降低腰胁部脂肪重,提高腓肠肌、比目鱼肌和趾浅屈肌的鲜重和ＲＮＡ合量及ＰＮＡ／ＤＮＡ值,同时提高大鼠垂体和血清ＧＨ水平分别达３６．７０％（Ｐ＜０．０１）和２３．７７％（Ｐ＜０．０５）,降低血清脲氮含量。表明ＣＩＭ可显著促进大鼠生长,降低体脂含量,促进肌肉肥大,促进蛋白沉积。其作用机理可能还与其促进ＧＨ的合成和分泌有关。     

海藻糖酶法合成途径及其酶基因的重组表达研究

在生物抗逆研究中,海藻糖合酶基因是继甘露醇、脯氨酸、甜菜碱合成酶基因之后又一个与抗逆相关的基因。海藻糖具有独特的生物学功能,能提高生物体对干旱、高温、冷冻和渗透压的抗性,发现以来就受到人们的普遍关注。随着对海藻糖化学性质、生理功能、作用机理及代谢途径等方面研究的深入,其在生物制品、食品、医药、作物育种及精细化工等领域广阔的应用前景日益显现。就海藻糖在生物体中的合成途径,以及海藻糖合成酶的基因工程研究进展进行了综述。     

重组大肠杆菌产普鲁兰酶的高密度发酵工艺研究

以表达普鲁兰酶的重组大肠杆菌作为出发菌株,在摇瓶培养的基础上,建立了大肠杆菌工程菌产普鲁兰酶的高密度发酵工艺。通过测定细胞密度、细胞干重、分离菌体可溶性成分与不溶性成分及SDS-PAGE电泳,分析重组大肠杆菌的生长和普鲁兰酶的表达情况。摇瓶试验使用合成培养基和LB培养基,重组大肠杆菌在合成培养基生长较慢,诱导5 h的普鲁兰酶表达量高于LB培养基,包涵体比例低于LB培养基。重组大肠杆菌的高密度发酵使用合成培养基,补料阶段采用指数流加的工艺,在设定细胞的比生长速率为0.12的前提下,限制补料中碳源的供应,以阻止乙酸的产生。当细胞密度OD600达到70.0开始诱导,最终细胞密度为每升53.3 g细胞干重,细胞内可溶性普鲁兰酶为每升1.35 g。     

海藻酸裂解酶酶学与基因工程研究进展及应用

海藻中富含海藻酸盐,海藻酸裂解酶降解后产生的寡糖物质具有很强的生物活性及益生作用,酶法降解海藻酸盐的生物降解取代传统的化学降解已日益受到人们的关注,就海藻酸盐降解酶的来源、作用机制、应用效果和影响因素进行了全面综述,阐明了海藻酸盐降解酶的研究具有显著的理论意义和应用价值。     

甘露聚糖酶基因在毕赤酵母中的表达及酶学性质研究

采用PCR的方法,以枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis基因组 DNA 为模板,克隆出甘露聚糖酶MAN的成熟肽编码序列,将其插入巴斯德毕赤酵母Pichia pastoris表达载体pPIC9K中,并位于α-因子信号肽序列的下游,获得重组质粒pPIC9K-MAN。重组质粒线性化后用聚乙二醇法导入毕赤酵母Pichia pastoris菌株GS115中,经大量筛选,获得高效分泌表达甘露聚糖酶的毕赤酵母工程菌株MAN22。将此菌株在5 L发酵罐中进行高密度发酵,测定酶活最高达1102IU /mL,同时对重组甘露聚糖酶的性质进行了初步研究。     

鸡球虫入侵机理、免疫学性质及基因工程在疫苗研制上的应用

鸡球虫病是严重危害养禽业的一种寄生虫病。长期以来主要以化学药物进行防治。但由于球虫抗药性和药物残留等问题日益严重,使得新药开发和应用受到限制。在免疫学中强毒活苗应用广泛但生产费用昂贵,从而促使我们转向对重组亚单位疫苗的研究。不同种类的球虫有较为严格的寄生部位。且不同发育阶段的球虫其免疫原性和抗原构成也有很大差异。在真核寄生生物中,由于受到宿主免疫系统的限制,选用鸡球虫免疫保护性抗原做重组疫苗目前还没有很大突破,因此我们需要采用新方法发现新抗原,有效防治鸡球虫病。     

塞曼特罗(CIM)对瘘管猪血清代谢物、GPT和神经内分泌激素水平的影响

用４头装有长久性颈静脉导管的３月龄杂种小母猪,日粮添喂１μｇ／ｇＣｉｍａｔｅｒｏｌ（ＣＩＭ）,研究５天内血清有关代谢物、酶活性和激素水平的变化。服食ＣＩＭ后,小母猪血清脲氮明显降低,ＦＦＡ持续升高,ＧＰＴ活性上升,ＳＳ含量显著降低,β－内啡肽水平显著升高,胃泌素水平也略有升高。结果表明：ＣＩＭ显著增强小母猪蛋白质代谢,增加氮沉积,同时ＣＩＭ有显著的脂肪动员作用。ＣＩＭ的营养分重分配作用机理可能与调控生长的神经内分泌系统有关。