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利用T7RNA聚合酶/启动子表达系统在大肠杆菌JM109(DE3)中表达化学合成的大鼠肝tRNAⅡe基因.经酚抽提、DEAE-52离子交换柱层析及HPLC层析,分离纯化大鼠肝tRNAⅡe.变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和Northern-blot鉴定表明,大鼠肝tRNAⅡe基因成功地获得表达.氨酸化活性检测表明:纯化后,每1A260单位(40μg)的tRNAⅡe可负载约650pmol的Ⅱe,纯度为54.2%.说明从大肠杆菌中分离纯化出具有一定生物学活性,一定纯度的合成基因表达产物. 相似文献
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