小麦高分子量谷蛋白亚基基因片段的体外扩增

生物体尤其是高等动植物,绝大多数基因的拷贝数是很低的,如果没有基因扩增的手段,几乎无法研究基因的结构及其与表达的关系。当今分子生物学发展中最基本的技术之一基因克隆,实际上就是基因体内扩增(in vivo amplification)的技术。近年来发展了一种基因体外扩增(in vitro amplification)的新技术,又称     

水稻OsTB1基因的结构及其表达分析

TCP基因是一类植物中新发现的、可能具有转录因子活性的基因家族,成员包括金鱼草的Cyclodiea (Cyc)、玉米的Teosinte Branched1 (TB1)以及水稻中的PCF1、PCF2等.玉米的TB1基因有维持玉米顶端优势的作用,与分蘖的发生密切相关;水稻和玉米同属禾本科,在发育的过程中都有分蘖的发生.通过筛选水稻的基因组文库,得到了水稻中的一个TB1同源基因Oryza sativa Teosinte Branched1 (OsTB1).该基因不含内含子,基因编码一个长度为388个氨基酸的蛋白,在氨基酸水平上与TB1的同源性为70%,含有保守的TCP区和R区,是属于TCP基因家族的一个成员.RT-PCR和mRNA原位杂交分析结果表明,OsTB1在水稻的侧芽中有很强的表达,在花序中有较弱的表达.以上结果显示该基因可能在水稻侧芽和花序的起始和发育过程中起重要作用.     

水稻叶绿体DNA的提取和纯化

以籼稻品种珍讪97B为材料,采用溶液捣碎和不连续蔗糖梯度离心的方法提取了籼稻的叶绿体DNA,DNA经限制性内切酶酶解和琼脂糖胶电泳可以得到清晰的条带,来自蚕豆的核酮糖—1,5—二磷酸羧化氧合酶大亚基基因探针和23SrRNA基因探针可以与酶切条带杂交,由此确定了含这二种基因的BamHI酶切片段。     

蚕豆核酮糖1，5-磷酸羧化酶／加氧酶大亚基基因的分子克隆

核酮糖l,5－二磷酸羧化酶／加氧酶由大亚基(Ls)和小亚基组成。Ls由叶绿体DNA编码。蚕豆Ls的基因已被克隆到pBR322。应用几种限制性内切酶酶解以及Southern印迹法构建了该重组质粒的物理图谱。     

叶绿体基因组的构造

叶绿体是植物细胞中一种扁椭圆形的细胞器,具有光合作用这一重要功能。它能够利用太阳辐射中的能量,把二氧化碳和水转变为碳水化合物和氧气,使地球上所有生物得以生存。长期以来,科学家们为揭示光合作用的机制付出了艰辛的努力,使我们对有关的光化学反应以及酶催化反应有了系统的了解;与此同时,科学家们还一直企图在基因水平上来阐明基因物质和叶绿体功能的关系,以期望最终能通过基因的改造来进一步提高植物的光合效率。本文就近年来在叶绿体基因组构造上所取得的重大进展作一概述。     

应用生物工程技术制造天冬甜精

<正> 1966年英国帝国化学工业公司药物部Davey在进行胃泌素(Gastrin)C-末端四肽Try·Met·Asp·Phe的合成过程中,制备了中间产物Asp·PheOMe,偶然发现此化合物——即现在称之为天冬甜精(Asparatame,α—APM)的物质——具有甜味。以后,Davey转入美国Searle公     

水稻中一个人类肿瘤抑制基因同源物的克隆与表达分析(英)

用同源筛选方法 ,从水稻 (OryzasativaL .)基因组文库中分离到一个与人类肿瘤抑制基因QM具有同源性的基因 ,命名为OSQM1。该基因包括 4个外显子和 3个内含子 ,编码 2 19个氨基酸 ,其中有 4 6个碱性氨基酸 ,其等电点高达 11.0 2。同源性搜寻发现此基因存在于真核生物中而且保守性较强 ,表明它可能具有重要的作用。North ern分析结果表明 ,它在不同的水稻器官中都有表达 ,但在花和愈伤组织中的表达水平明显低于其他营养器官。它在根和叶中的表达水平受环境因素的影响。     

水稻叶绿体DNA克隆片段的分析和rbcL基因在重组质粒上的定位

杂交灿稻(珍汕97B)的叶绿体DNA克隆到pBR 322载体上后,从克隆库中筛选出含核酮糖1.5-二磷酸羧化酶/加氧酶大亚基基因(rbcL)的重组子(19.3kb),用10种限制性内切酶分析了这个重组质粒并制作了完整的物理图谱,rbcL基因被定位在这个物理图谱上。     

水稻中一个人类肿瘤抑制基因同源物的克隆与表达分析

用同源筛选方法,从水稻 (Oryza sativa L.) 基因组文库中分离到一个与人类肿瘤抑制基因QM具有同源性的基因,命名为OSQM1.该基因包括4个外显子和3个内含子,编码219个氨基酸,其中有46个碱性氨基酸,其等电点高达11.02.同源性搜寻发现此基因存在于真核生物中而且保守性较强,表明它可能具有重要的作用.Northern分析结果表明,它在不同的水稻器官中都有表达,但在花和愈伤组织中的表达水平明显低于其他营养器官.它在根和叶中的表达水平受环境因素的影响.